【作者】吳飛

上海長(zhǎng)征醫(yī)院，上海，200003

糞便隱血試驗(yàn)是臨床上診斷消化道出血的常測(cè)指標(biāo)。已知的化學(xué)法易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，是因?yàn)橐资茱嬍澈退幬锏挠绊憽Ｄz體金法與化學(xué)法相比，靈敏度、特異性都有了很大的提高，在臨床上已得到廣泛應(yīng)用，但由于Hb易受胃內(nèi)各種消化酶的作用和腸道內(nèi)的細(xì)菌分解的作用而變性，減弱免疫反應(yīng)故結(jié)果易出現(xiàn)假陰性。同時(shí)測(cè)定Hb與Tf，使消化道出血性疾病的陽(yáng)性檢出率有明顯的提高[1]。為了探討Hb與Tf聯(lián)合檢測(cè)在臨床上的應(yīng)用價(jià)值，我們選擇了本院2011-01-01至2011-06-30消化內(nèi)科住院病人，臨床懷疑消化道出血(包括胃、腸的潰瘍、出血、鉤蟲病、惡性腫瘤、息肉等)，分別用三種方法對(duì)送檢的600例糞便標(biāo)本進(jìn)行了隱血檢測(cè)。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本

來自2011-01-01至2011-06-30本院消化內(nèi)科住院病人，臨床懷疑消化道出血，送檢便隱血標(biāo)本600例。

1.2 器材

(1)大便潛血(OB)半定量測(cè)試卡(化學(xué)法)，生產(chǎn)廠家珠海貝索生物技術(shù)公司。(2)大便隱血診斷試劑(單克隆抗體膠體金法)，生產(chǎn)廠家艾康生物技術(shù)(杭州)有限公司。(3)轉(zhuǎn)鐵蛋白膠體金診斷試紙(單克隆抗體膠體金法)，生產(chǎn)廠家萬(wàn)華普曼生物工程有限公司。

1.3 方法

化學(xué)法檢測(cè)Hb，利用血紅蛋白中含鐵血黃素催化H2O2釋放新生態(tài)氧，氧化色原物質(zhì)匹拉米洞，產(chǎn)生紫藍(lán)-紫紅的顏色，據(jù)此判斷結(jié)果。膠體金法檢測(cè)Hb，采用膠體金雙抗體夾心法。轉(zhuǎn)鐵蛋白法檢測(cè)Tf，采用膠體金免疫夾心法。所有標(biāo)本均使用三種試劑檢測(cè)，5分鐘內(nèi)判讀結(jié)果。三種檢測(cè)方法一種為陽(yáng)性則判斷為陽(yáng)性，三種檢測(cè)方法均為陰性則判斷為陰性。

2 結(jié)果

2.1 三種方法檢測(cè)總例數(shù)600例，陽(yáng)性366例，陰性234例。

2.2 化學(xué)法陽(yáng)性結(jié)果共179例，占總數(shù)600例的29.8%，占陽(yáng)性366例的48.9%。

2.3 膠體金法陽(yáng)性結(jié)果共198例，占總例數(shù)的33.0%，占陽(yáng)性366例的54.1%。 轉(zhuǎn)鐵蛋白法陽(yáng)性結(jié)果共246例，占總例數(shù)600例的41.0%，占陽(yáng)性366例的67.2%。免疫雙聯(lián)法陽(yáng)性結(jié)果共324例，占總例數(shù)600例的54.0%，占陽(yáng)性366例的88.5%（表1）。

表1 不同檢測(cè)方法便隱血檢測(cè)結(jié)果分析Tab.1 Results analysis for different detection method of excrement occult blood

2.3.1 膠體金法檢測(cè)Hb結(jié)果分析

靈敏度＝198/324×100%＝61.1%，假陰性率＝126/324×100%＝38.9%，特異性＝234/234×100%＝100%（表2）。

表2 膠體金法試驗(yàn)結(jié)果Tab.2 Detection result of colloidal gold method

2.3.2 轉(zhuǎn)鐵蛋白法檢測(cè)Tf結(jié)果分析

靈敏度＝246/324×100%＝75.9%，假陰性率＝78/324×100%＝24.1%，特異性＝234/234×100%＝100%（表3）。

表3 轉(zhuǎn)鐵蛋白法試驗(yàn)結(jié)果Tab.3 Detection result of transferrin method

2.4 對(duì)于上、下消化道出血（經(jīng)胃鏡檢查證實(shí)）的陽(yáng)性檢出率

2.4.1 上消化道出血：化學(xué)法陽(yáng)性94例，占57.3% ；膠體金法陽(yáng)性99例，占60.4%；轉(zhuǎn)鐵蛋白法陽(yáng)性135例，占82.3%；免疫雙聯(lián)法任一種為陽(yáng)性149例，占90.8%。

2.4.2 下消化道出血：化學(xué)法陽(yáng)性56例，占44.8%；膠體金法陽(yáng)性97例，占77.6%；轉(zhuǎn)鐵蛋白法陽(yáng)性83例，占66.4%；免疫雙聯(lián)法任一種為陽(yáng)性122例，占97.6%。

表4 上、下消化道出血陽(yáng)性檢出率結(jié)果Tab.4 Positive detection rate of upper and lower gastrointestinal hemorrhage

3 討論

化學(xué)法在消化道出血患者中的檢出率略低于膠體金法和轉(zhuǎn)鐵蛋白法，因?yàn)檠t蛋白化學(xué)法的檢測(cè)下限在0.5 μg/ml以上，而膠體金法的檢測(cè)下限是大于或等于0.2 μg/ml，轉(zhuǎn)鐵蛋白法的檢測(cè)下限僅僅是大于或等于10 ng/ml。而且，當(dāng)患者進(jìn)食入動(dòng)物性肉、血、肝臟和VitC、鐵劑、中藥、富含葉綠素的食物等干擾物時(shí)，化學(xué)法易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果[1-2]。目前膠體金法和轉(zhuǎn)鐵蛋白法只是定性檢測(cè)，僅能給出陽(yáng)性或陰性結(jié)果，很難進(jìn)行定量測(cè)定，甚至不能報(bào)告強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性或幾個(gè)加號(hào)(+1，+2，+3，+4)，故而不能對(duì)消化道出血病人進(jìn)行療效觀察[2-3]，因此觀察止血程度欠佳，而化學(xué)法可根據(jù)反應(yīng)時(shí)間和顏色深淺報(bào)告強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性或幾個(gè)加號(hào)，大致估計(jì)出血量，適合對(duì)臨床的正確引導(dǎo)。表1結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)鐵蛋白法的敏感性高于膠體金法，這是由于在血液中Hb和Tf的比值為51.2/1，而糞便中Hb和Tf的比值為5.4/1，血紅蛋白在胃腸內(nèi)受到消化酶和細(xì)菌的作用易變性，轉(zhuǎn)鐵蛋白在腸道內(nèi)有抗菌能力強(qiáng)，性質(zhì)比較穩(wěn)定的特點(diǎn)。聯(lián)合檢測(cè)血紅蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白時(shí)發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性率明顯提高，為54.0%，說明在檢測(cè)上消化道出血時(shí)有一部分病例隱血，用單克隆法不能測(cè)出Hb，以致出現(xiàn)了假陰性。此原因可能有三：①過量大出血而致反應(yīng)體系中抗原過剩出現(xiàn)前帶現(xiàn)象；②上消化道出血后，血紅蛋白或紅細(xì)胞經(jīng)過消化后已不具有原來的免疫原性，抗原性發(fā)生改變；③部分病人血紅蛋白與單克隆抗體不匹配而致假陰性[3-5]。用轉(zhuǎn)鐵蛋白法檢測(cè)也出現(xiàn)了假陰性，原因可能是出血很少，轉(zhuǎn)鐵蛋白法檢測(cè)法達(dá)不到它的檢測(cè)下限[5-6]，因此出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

在上消化道出血病例中，Tf測(cè)定陽(yáng)性率高于Hb測(cè)定陽(yáng)性率，是由于Hb在消化道中受腸內(nèi)細(xì)菌和消化酶的作用而變性，導(dǎo)致其抗原性降低，由于體液中的Hb成分阻礙抗原抗體反應(yīng)，而出現(xiàn)假陰性結(jié)果，大量出血而致反應(yīng)體系中抗原過剩而出現(xiàn)后帶現(xiàn)象[6-7]。在下消化道出血病例中，Hb測(cè)定陽(yáng)性率高于Tf測(cè)定陽(yáng)性率，可以看出在下消化道出血病例中Tf不如Hb敏感，這是因?yàn)榧s有10%的病例出現(xiàn)Tf值較低的現(xiàn)象。已知遺傳性無(wú)轉(zhuǎn)鐵蛋白血癥，各種惡性疾病、炎癥為主的多種疾病均可導(dǎo)致Tf值低下，使其出現(xiàn)假陰性結(jié)果[8-9]。但聯(lián)合檢測(cè)Hb和Tf發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性率明顯提高，能夠起到優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)的作用，減少假陰性，提高上下消化道陽(yáng)性結(jié)果的檢出率。當(dāng)Hb法受到干擾時(shí)，將Tf法作為補(bǔ)充檢測(cè)手段，是判斷是否存在消化道出血最有價(jià)值的方法。從表4中還可看出，在下消化道出血患者中，轉(zhuǎn)鐵蛋白法檢出陽(yáng)性率仍較膠體金法低，這是因?yàn)榧s有10%的病例出現(xiàn)轉(zhuǎn)鐵蛋白值較低的現(xiàn)象[10]。已知遺傳性無(wú)轉(zhuǎn)鐵蛋白血癥，各種惡性疾病，炎癥為主的多種疾病(如手術(shù)、創(chuàng)傷、心肌梗死、感染等)均可導(dǎo)致轉(zhuǎn)鐵蛋白值低下（Tf為負(fù)性急性時(shí)相反應(yīng)蛋白[10-11]，只有大腸癌患者的糞便中會(huì)出現(xiàn)大量的Tf），因此在這些情況下，轉(zhuǎn)鐵蛋白法檢測(cè)結(jié)果為陰性。聯(lián)合檢測(cè)Hb和Tf 發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性率為97.8%，這可能是由于有一部分消化道大量出血的病例，膠體金法測(cè)定隱血很容易出現(xiàn)前帶現(xiàn)象，造成假陰性，而通過Tf測(cè)定可以將這部分假陰性結(jié)果檢出，起到彌補(bǔ)作用，提高檢出率。

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