張金艷， 趙 樂， 郭 琰， 李貽奎

(1．中國中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院，北京100091;2．鄭州大學(xué)藥學(xué)院，河南鄭州450001)

苦杏仁-桔梗，是臨床上用于止咳、平喘、祛痰的經(jīng)典藥對(duì);據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前市售中成藥中含此藥對(duì)且用于止咳、祛痰、平喘的有30余種，如川貝止咳糖漿、感冒清熱顆粒、杏蘇止咳顆粒等［1］。但目前尚未見對(duì)兩者配伍合理性及兩者最佳配伍比例的研究報(bào)道。本研究擬通過鎮(zhèn)咳、祛痰試驗(yàn)，對(duì)兩者配伍的合理性進(jìn)行論證，并在此基礎(chǔ)上確定兩者配伍用于止咳、祛痰的最佳比例。

1 材料

1．1 受試藥物 苦杏仁Prunus armeniaca L．varansu Maxim．和桔梗 Platycodon grandiflorum(Jaoq．)A．DC．均購自北京同仁堂藥店，經(jīng)專家鑒定為正品。將苦杏仁、桔梗分別加水6倍量，浸泡30 min，第一次煎煮30 min，第二次加水5倍量，煎煮30 min，合并煎液，靜置，濾過，濾液濃縮呈流浸膏狀，減壓干燥，得干粉，粉碎，密閉分裝。每克苦杏仁浸膏干粉相當(dāng)于苦杏仁生藥18．181 8 g;每克桔梗浸膏干粉相當(dāng)于桔梗生藥4．347 8 g。

1．2 對(duì)照藥品和試劑 枸櫞酸噴托維林片，規(guī)格25 mg/片，天津力生制藥股份有限公司，批號(hào)1001004;鹽酸氨溴索，規(guī)格30 mg/片，上海勃林格殷格翰藥業(yè)有限公司，產(chǎn)品批號(hào):084195。

1．3 動(dòng)物 健康ICR小鼠，雌雄各半，體質(zhì)量18～20 g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，許可證編號(hào):許可證編號(hào):SCXK(京)2006-0009。健康豚鼠，雌雄各半，體質(zhì)量300～350 g，由北京芳元緣養(yǎng)殖場(chǎng)提供，許可證編號(hào):SCXK(京)2009-0014。

2 方法

2．1 動(dòng)物分組及給藥

2．1．1 小鼠止咳實(shí)驗(yàn) 小鼠按體質(zhì)量分層隨機(jī)分為12組:正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、枸櫞酸噴托維林對(duì)照組、苦杏仁組、桔梗組及兩者不同配伍組(1∶1組、1∶2組、1∶3組、1∶4組、2∶1組、3∶1組、4∶1組)。枸櫞酸噴托維林對(duì)照組的劑量為20 mg/kg，苦杏仁組、桔梗組及兩者不同配伍組的藥物總劑量均為3．0 g生藥/kg。動(dòng)物按照20 mL/kg灌胃給藥，每天1次，連續(xù)5 d。

2．1．2 豚鼠止咳實(shí)驗(yàn) 豚鼠按體質(zhì)量分層隨機(jī)分為12組:正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、枸櫞酸噴托維林對(duì)照組、苦杏仁組、桔梗組及兩者不同配伍組(配伍比例與小鼠止咳實(shí)驗(yàn)相同)。枸櫞酸噴托維林對(duì)照組的劑量為15 mg/kg，苦杏仁組、桔梗組及兩者不同配伍組的藥物總劑量均為2．5 g生藥/kg。動(dòng)物按照5 mL/kg灌胃給藥，每天1次，連續(xù)5 d。

2．1．3 祛痰實(shí)驗(yàn) 小鼠按體質(zhì)量分層隨機(jī)分為11組:蒸餾水對(duì)照組、鹽酸氨溴索對(duì)照組、苦杏仁組、桔梗組及兩者不同配伍組(配伍比例與小鼠止咳實(shí)驗(yàn)相同)。鹽酸氨溴索對(duì)照組的劑量為30 mg/kg，苦杏仁組、桔梗組及兩者不同配伍組的藥物總劑量均為3．0 g生藥/kg。動(dòng)物按照20 mL/kg灌胃給藥，每天1次，連續(xù)5 d。

2．2 指標(biāo)測(cè)定

2．2．1 小鼠止咳實(shí)驗(yàn) 末次給藥后1 h，將小鼠放入500 mL透明密閉容器內(nèi)，用超聲霧化器向容器內(nèi)均勻噴入霧化濃氨水，連續(xù)噴霧20 s;以小鼠收縮腹部并張口作為咳嗽標(biāo)準(zhǔn)，記錄小鼠咳嗽潛伏期和放入容器后2 min內(nèi)的咳嗽次數(shù)。

2．2．2 豚鼠止咳實(shí)驗(yàn) 末次給藥后1 h，將豚鼠放入3 L透明密閉容器內(nèi)，用超聲霧化器向容器內(nèi)均勻噴入20．0%的霧化枸櫞酸溶液，連續(xù)噴霧1 min;以豚鼠收縮腹部/并張口出聲咳嗽作為咳嗽標(biāo)準(zhǔn)，記錄豚鼠咳嗽潛伏期和放入容器后10 min內(nèi)的咳嗽次數(shù)。

2．2．3 祛痰實(shí)驗(yàn) 末次給藥后30 min，腹腔注射5%酚紅生理鹽水溶液20 mL/kg，30 min后處死動(dòng)物，暴露氣管，剝?nèi)夤苤車M織，剪下自甲狀軟骨下至支氣管分支處的一段氣管，浸入盛有2 mL 5%NaHCO3溶液的試管中，振搖以將其中排出的酚紅充分洗出，放置過夜，得到透明上清液，于546 nm處測(cè)定氣管洗出液的吸收度值。

3 結(jié)果

3．1 小鼠止咳實(shí)驗(yàn) 結(jié)果(表1)顯示:與模型對(duì)照組比較，苦杏仁、桔梗及各配伍組的小鼠咳嗽潛伏期均顯著延長、小鼠咳嗽次數(shù)均顯著減少(與模型組比較均P＜0．01);從咳嗽次數(shù)來看，各配伍組的咳嗽次數(shù)與單味苦杏仁或單味桔梗組比較有不同程度的減少，其中苦杏仁-桔梗(1∶1)組和苦杏仁-桔梗(2∶1)組的咳嗽次數(shù)均顯著少于相同劑量的單味苦杏仁組及單味桔梗組(與單味苦杏仁和單味桔梗組比較，均P＜0．05或 P＜0．01);從咳嗽潛伏期來看，苦杏仁-桔梗(1∶1)組的咳嗽潛伏期顯著長于相同劑量的單味桔梗組，其他各配伍組的咳嗽潛伏期與單味苦杏仁組和單味桔梗組比較均無顯著性差異。

表1 苦杏仁、桔梗及二者配伍對(duì)濃氨水致小鼠咳嗽的影響(n=10， ± s)Tab．1 Effect of bitter apricot seed，platycodon root，and their different compatibility on cough models made by ammonia stimulation in mouse

表1 苦杏仁、桔梗及二者配伍對(duì)濃氨水致小鼠咳嗽的影響(n=10， ± s)Tab．1 Effect of bitter apricot seed，platycodon root，and their different compatibility on cough models made by ammonia stimulation in mouse

注:與模型對(duì)照組比較，﹡﹡P ＜0．01;與苦杏仁3 g生藥/kg比較，△P ＜0．05;與桔梗3 g生藥/kg比較，﹟ P ＜0．05，﹟﹟P ＜0．01。Note:＊＊P ＜0．01 vs model group;△P ＜0．05 vs bitter apricot seed group;#P ＜0．05，##P ＜0．01 vs platycodon root group．

組別 咳嗽潛伏期/s 咳嗽次數(shù)/(次/2 min)正常對(duì)照 —0±0模型對(duì)照 10．70 ±3．40 125．8 ±21．7枸櫞酸噴托維林20 mg/kg 25．20 ±3．26﹡﹡ 57．9 ±15．7﹡﹡苦杏仁3 g生藥/kg 20．70 ±3．27﹡﹡ 90．0 ±10．8﹡﹡桔梗3 g生藥/kg 18．70 ±1．49﹡﹡ 100．6 ±11．9﹡﹡苦杏仁-桔梗 =1 ∶1 21．20 ±1．81﹡﹡﹟﹟ 74．5 ±14．7﹡﹡△﹟﹟苦杏仁-桔梗 =1 ∶2 19．10 ±2．08﹡﹡ 87．0 ±10．2﹡﹡﹟苦杏仁-桔梗 =1 ∶3 19．00 ±2．54﹡﹡ 96．2 ±11．3﹡﹡苦杏仁-桔梗 =1 ∶4 19．70 ±1．49﹡﹡ 99．4 ±14．1﹡﹡苦杏仁-桔梗 =2 ∶1 18．90 ±4．07﹡﹡ 78．3 ±10．9﹡﹡△﹟﹟苦杏仁-桔梗 =3 ∶1 19．50 ±3．41﹡﹡ 85．0 ±10．4﹡﹡﹟﹟苦杏仁-桔梗 =4 ∶1 20．20 ±2．10﹡﹡ 89．9 ±13．6﹡﹡

3．2 豚鼠止咳實(shí)驗(yàn) 結(jié)果(表2)顯示:與模型對(duì)照組比較，苦杏仁、桔梗及兩者各配伍組的豚鼠咳嗽潛伏期均顯著延長、咳嗽次數(shù)均顯著減少(與模型組比較均P＜0．05或 P＜0．01);從咳嗽次數(shù)來看，苦杏仁-桔梗(1∶1)組的咳嗽次數(shù)顯著少于相同劑量的單味苦杏仁組，同時(shí)也顯著少于相同劑量的單味桔梗組(與單味苦杏仁和單味桔梗組比較，均P＜0．05或 P ＜0．01);苦杏仁-桔梗(1 ∶2)組的咳嗽次數(shù)顯著少于相同劑量的單味桔梗組(與單味桔梗組比較，P＜0．05);從咳嗽潛伏期來看，各配伍組的咳嗽潛伏期均有長于相同劑量單味苦杏仁組和單味桔梗組趨勢(shì)，但均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

表2 苦杏仁、桔梗及二者配伍對(duì)枸櫞酸致豚鼠咳嗽的影響( ± s)Tab．2 Effect of bitter apricot seed，platycodon root，and their different compatibility on cough models made by citric acid stimulation in guinea pig

表2 苦杏仁、桔梗及二者配伍對(duì)枸櫞酸致豚鼠咳嗽的影響( ± s)Tab．2 Effect of bitter apricot seed，platycodon root，and their different compatibility on cough models made by citric acid stimulation in guinea pig

注:與模型組比較，﹡ P ＜0．05，﹡﹡P ＜0．01;與苦杏仁 2．5 g生藥/kg比較，△P ＜0．05;與桔梗2．5 g生藥/kg比較，﹟ P ＜0．05，﹟﹟P ＜0．01。Note:*P ＜0．05，＊＊P ＜0．01 vs model group;△P ＜0．05 vs bitter apricot seed group;#P ＜0．05，##P ＜0．01 vs platycodon root group．

組別 動(dòng)物數(shù)/只 咳嗽潛伏期/s 咳嗽次數(shù)/(次/10 min)正常對(duì)照 10 —0±0模型對(duì)照 9 36．3 ±8．4 50．9 ±6．4枸櫞酸噴托維林15 mg/kg 8 68．3 ±7．5﹡﹡ 20．8 ±3．7﹡﹡苦杏仁2．5 g生藥/kg 9 47．2 ±4．4﹡﹡ 42．4 ±7．4﹡桔梗2．5 g生藥/kg 8 45．1 ±4．1﹡ 43．4 ±5．4﹡﹡苦杏仁-桔梗(1 ∶1) 9 52．1 ±9．3﹡﹡ 33．7 ±7．6﹡﹡△﹟﹟苦杏仁-桔梗(1 ∶2) 9 49．7 ±10．9﹡ 38．0 ±4．6﹡﹡﹟苦杏仁-桔梗(1 ∶3) 9 49．0 ±6．7﹡﹡ 42．1 ±5．7﹡﹡苦杏仁-桔梗(1 ∶4) 9 46．4 ±10．1﹡ 43．6 ±6．0﹡苦杏仁-桔梗(2 ∶1) 8 50．3 ±12．4﹡ 39．1 ±5．4﹡﹡苦杏仁-桔梗(3 ∶1) 9 48．9 ±6．1﹡﹡ 38．8 ±7．3﹡﹡苦杏仁-桔梗(4 ∶1) 8 49．0 ±5．5﹡﹡ 43．5 ±4．9﹡

3．3 祛痰實(shí)驗(yàn) 結(jié)果(表3)顯示:與模型對(duì)照組比較，苦杏仁、桔梗及兩者配伍組的小鼠氣道酚紅排泌量均顯著高于蒸餾水組(與蒸餾水組比較均P＜0．01);各配伍組的氣道酚紅排泌量與單味苦杏仁或單味桔梗組比較有不同程度的增高，其中苦杏仁-桔梗(1∶2)組的酚紅排泌量最高，同時(shí)高于相同劑量的單味苦杏仁組及單味桔梗組(與單味苦杏仁和單味桔梗組比較，均P＜0．05或P＜0．01)。

4 討論

中藥配伍是中醫(yī)遣方用藥的特色優(yōu)勢(shì)，中藥通過合理配伍，調(diào)其偏性，制其毒性，能達(dá)到強(qiáng)化主效應(yīng)、兼顧次效應(yīng)，降低負(fù)效應(yīng)的作用。然而，由于中藥組方和配伍的復(fù)雜性，中藥組方配伍的合理性及配伍機(jī)制尚缺乏系統(tǒng)的科學(xué)研究。因此，對(duì)常用中藥進(jìn)行療效與配伍關(guān)系的研究是非常重要和必要的［1-3］。

苦杏仁和桔梗在臨床上常常配伍使用，常見于市售中成藥處方和醫(yī)生處方，用于止咳、祛痰［4-10］。因此，我們推測(cè):苦杏仁與桔梗可能存在配伍增效作用。本研究通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)了上述推測(cè):兩者在止咳、祛痰作用上確有配伍增效作用。由此，我們提出了新的問題:兩者的最佳配伍比例又是怎樣呢?我們對(duì)臨床上苦杏仁和桔梗配伍用藥的比例進(jìn)行了大致統(tǒng)計(jì):苦杏仁和桔梗在止咳橘紅口服液、橘紅丸和感冒清熱顆粒中的比例均為1．3∶1;在千金止咳丸中的比例為1．7∶1;在寶咳寧顆粒中的比例為2∶1;在復(fù)方川貝止咳糖漿、小兒百部止咳糖漿、小兒咳喘顆粒、解肌寧嗽丸中的比例均為1∶1;在醫(yī)生處方中最常見比例也是1∶1。可見無論市售中成藥還是醫(yī)生處方，苦杏仁和桔梗止咳祛痰的配伍比例不一，但以傾向于1∶1者居多。本研究則通過實(shí)驗(yàn)明確了苦杏仁和桔梗用于止咳、祛痰的最佳配伍比例分別是1∶1和1∶2。該研究結(jié)果提示:苦杏仁和桔梗在臨床上配伍應(yīng)用時(shí)，可能需要根據(jù)用藥目的的不同側(cè)重，適當(dāng)調(diào)整兩者用藥比例，即兩者的最佳配伍比例取決于用藥目的的不同側(cè)重。當(dāng)以止咳為主要治療目的時(shí)，苦杏仁和桔梗以1∶1配伍最佳;當(dāng)以祛痰為主要目的時(shí)，兩者以1∶2配伍最佳。根據(jù)《本經(jīng)》記載，苦杏仁的功效在于止咳平喘、潤腸通便;桔梗的功效在于宣肺祛痰、利咽、排膿。這從某種程度上與本研究結(jié)果一致:即苦杏仁和桔梗配伍用于祛痰時(shí)，需要在止咳配伍比例的基礎(chǔ)上適當(dāng)增加祛痰藥桔梗的比例。該研究結(jié)果將為苦杏仁和桔梗的臨床配伍應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)和最佳配伍比例參考。

表3 杏仁、桔梗及兩者配伍對(duì)小鼠氣道酚紅排泌的影響(n=10， ± s)Tab．3 Effect of bitter apricot seed，platycodon root，and their different com patibility on phlegm expelling in mouse，to which phenol red was injected intraperitoneally

表3 杏仁、桔梗及兩者配伍對(duì)小鼠氣道酚紅排泌的影響(n=10， ± s)Tab．3 Effect of bitter apricot seed，platycodon root，and their different com patibility on phlegm expelling in mouse，to which phenol red was injected intraperitoneally

注:與蒸餾水對(duì)照組比較，﹡﹡P＜0．01;與苦杏仁3 g生藥/kg比較，△P ＜0．05，△△P ＜0．01;與桔梗3 g生藥/kg比較，﹟ P ＜0．05。Note:＊＊P ＜0．01 vs distilled water group;△P ＜0．05，△△P ＜0．01 vs bitter group;#P ＜0．05 vs platycodon root group．

組別 氣道酚紅排泌量(分光光度值)蒸餾水0．199 ±0．033鹽酸氨溴索30 mg/kg 0．571 ±0．204＊＊△△﹟#苦杏仁3．0 g生藥/kg 0．293 ±0．116＊＊﹟桔梗3．0 g生藥/kg 0．399 ±0．093＊＊△苦杏仁-桔梗(1 ∶1) 0．332 ±0．119＊＊苦杏仁-桔梗(1∶2) 0．530 ±0．130＊＊△△﹟#苦杏仁-桔梗(1 ∶3) 0．434 ±0．117＊＊△△苦杏仁-桔梗(1 ∶4) 0．356 ±0．096＊＊苦杏仁-桔梗(2 ∶1) 0．438 ±0．079＊＊△△苦杏仁-桔梗(3 ∶1) 0．387 ±0．078＊＊△苦杏仁-桔梗(4 ∶1) 0．302 ±0．053＊＊﹟

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