葉 斌, 曾宣利, 王國(guó)良
(浙江萬(wàn)里學(xué)院生物與環(huán)境學(xué)院,寧波 315100)
松材線蟲(chóng)病(Bursaphelenchus xy lophilus)是國(guó)際上公認(rèn)的最具危險(xiǎn)性、毀滅性,同時(shí)又較難控制的檢疫對(duì)象[1-2]。在日本和中國(guó),該病的自然傳播主要借助羽化后的松墨天牛(Monocham us alternatus)成蟲(chóng)在補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)或產(chǎn)卵時(shí),將線蟲(chóng)通過(guò)取食或產(chǎn)卵傳入健康松樹(shù)而使其致病[3-6]。
目前各地采用如注射高效內(nèi)吸性殺蟲(chóng)、殺線蟲(chóng)劑,加強(qiáng)檢疫杜絕人為傳播,清除、處理病木材和用生物防治方法防治媒介昆蟲(chóng)松墨天牛等綜合治理措施治理松材線蟲(chóng)病。其中疫區(qū)通過(guò)有效地降低松墨天牛的種群密度達(dá)到明顯減少松樹(shù)枯死率,成為防治的主要措施之一。由于松林環(huán)境條件和松墨天牛鉆蛀為害的特性,采用生物防治方法,如用多種方法噴灑白僵菌(Beauveria bassiana)和釋放寄生性天敵昆蟲(chóng)哈氏硬皮腫腿蜂(Sclerodermusharmandi)[我國(guó)過(guò)去誤訂為管氏腫腿蜂(Scleroderma guani)]、花絨寄甲(Dastarcus helophoroides)等取得了好的效果。由于林間松墨天牛幼蟲(chóng)不形成排糞、排氣孔,蛀道充滿木屑、糞便,多種方法噴灑的白僵菌孢子不易接觸到松墨天牛幼蟲(chóng)而侵入,明顯影響防效。采用蟲(chóng)菌結(jié)合方法,如將白僵菌的分生孢子附著在松墨天牛幼蟲(chóng)的寄生蜂腫腿蜂和某些松林中共生微小昆蟲(chóng)如黃色梢小蠹(Cryphalus fulvus)等蟲(chóng)體上后,把這些微小昆蟲(chóng)放入林間尋找天牛分布的病死木,讓帶菌的微小昆蟲(chóng)去感染松天牛,能明顯提高效果[7-10]。
2007年和2008年作者在調(diào)查飼養(yǎng)松墨天牛時(shí)發(fā)現(xiàn),有蚤蠅(Megaselia sp.)寄生松墨天牛幼蟲(chóng),引起松墨天牛幼蟲(chóng)死亡并繁殖出許多蚤蠅。國(guó)內(nèi)報(bào)道[11]蚤蠅對(duì)落葉松毛蟲(chóng)寄生率達(dá)55%,對(duì)舞毒蛾達(dá)20%,對(duì)天幕毛蟲(chóng)達(dá)89.7%,對(duì)落葉松毛蟲(chóng)越冬代2~3齡幼蟲(chóng)的寄生率可達(dá)64.28%,對(duì)控制落葉松毛蟲(chóng)的蟲(chóng)口密度,起到一定的作用。國(guó)外利用寄生性蚤蠅防治檢疫性害蟲(chóng)紅火蟻有較多報(bào)道。寄生性蚤蠅也叫斷頭蠅[12],主要是 Pseudacteon tricuspis,它將魚(yú)雷形的單卵產(chǎn)于紅火蟻的后胸,在寄生后的第4天就能在紅火蟻的頭部發(fā)現(xiàn)2齡若蟲(chóng)。蚤蠅生活史中大部分時(shí)間在紅火蟻的頭殼里度過(guò),最后,蚤蠅從紅火蟻的口器位置鉆出完成羽化。蚤蠅作為紅火蟻微孢子蟲(chóng)病原載體可能起了重要作用[13]。本地為了防治松材線蟲(chóng)病,采用多種方法噴灑白僵菌已經(jīng)應(yīng)用多年,但是效果不理想。為了提高松墨天牛的生物防治效果,近2年作者對(duì)該蚤蠅和利用其攜帶球孢白僵菌防治松墨天牛進(jìn)行了一系列的研究,以期探索松材線蟲(chóng)病防治的新途徑。
蚤蠅來(lái)自2008年作者在調(diào)查飼養(yǎng)松墨天牛時(shí)發(fā)現(xiàn)的寄生在松墨天牛幼蟲(chóng)上的實(shí)驗(yàn)室越冬種群,采用長(zhǎng)、高、寬均為60 cm的飼養(yǎng)箱,用冷凍豬腿肉作飼料全年飼養(yǎng)[14],建立實(shí)驗(yàn)種群供各項(xiàng)試驗(yàn)使用。
1.1.1 種類(lèi)鑒定
將飼養(yǎng)過(guò)程中得到的蚤蠅各蟲(chóng)態(tài),參照相關(guān)文獻(xiàn)[15-16]作出初步鑒定。
1.1.2 蚤蠅的生活史、繁殖力與擴(kuò)散力
生活史試驗(yàn)于2009年4-11月在浙江萬(wàn)里學(xué)院微生物研究所實(shí)驗(yàn)室(自然室溫)進(jìn)行。各蟲(chóng)態(tài)發(fā)育和繁殖觀察于2010年5-6月進(jìn)行。試驗(yàn)時(shí)在飼養(yǎng)箱內(nèi)放入10頭將羽化的蛹和2個(gè)誘卵皿(90mm培養(yǎng)皿,每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)放入2 g豬腿肉片和5m L自來(lái)水),每天更換1次誘卵皿。每天觀察5次,記錄產(chǎn)卵、幼蟲(chóng)生長(zhǎng)、化蛹和羽化等過(guò)程。另外同時(shí)解剖10頭剛羽化雌成蟲(chóng)的腹部,用實(shí)體解剖鏡觀察懷卵量。
擴(kuò)散能力研究試驗(yàn)設(shè)在寧波市高教園區(qū)的大綠化區(qū)(南北2 000m左右,東西1 500m左右,以草坪和綠化樹(shù)木為主,內(nèi)有河流和道路)內(nèi)。在釋放蚤蠅成蟲(chóng)前1 d,用豬腿肉片+敵百蟲(chóng)引誘皿誘殺自然條件下的其他蠅類(lèi)。
試驗(yàn)時(shí)在中心點(diǎn)放置1個(gè)釋放瓶(允許蚤蠅成蟲(chóng)從瓶蓋側(cè)面的小洞鉆出),內(nèi)裝200頭將羽化蚤蠅蛹,離中心點(diǎn)南北方向 100、200、300、400m 各放 1個(gè)引誘皿(90 mm培養(yǎng)皿內(nèi)放入5 g豬腿肉薄片和10 m L自來(lái)水),每天更換1次引誘皿,共 3 d,帶回室內(nèi),體視顯微鏡下檢查各點(diǎn)引誘皿內(nèi)蚤蠅的卵粒數(shù)。得出該蚤蠅在平原草坪上的擴(kuò)散能力和特點(diǎn)。
1.2.1 繁菌方式與毒力
球孢白僵菌菌株MA 0813分離于北侖區(qū)病死松樹(shù)中自然白僵的松墨天牛幼蟲(chóng)上。繁菌方式分為“蟲(chóng)菌”(菌株MA 0813涂接于越冬后松墨天牛4~5齡幼蟲(chóng)25 d后形成的白僵蟲(chóng)上的孢子),“PPDA菌”(菌株接種在PPDA培養(yǎng)基上25 d后產(chǎn)生的白僵菌孢子)和“商品菌”(鹽城市神微微生物科技有限公司生產(chǎn)白僵菌孢子粉)。接種方法:用小號(hào)狼毫毛筆蘸取不同繁菌方式的白僵菌孢子,涂抹越冬后的松墨天牛4~5齡幼蟲(chóng)背部。接種孢子量的計(jì)算:將毛筆蘸取的白僵菌孢子在含0.2%吐溫-80的無(wú)菌水中稀釋、振蕩后,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),求平均值。各處理的平均接種孢子量分別為:蟲(chóng)菌1,10.2×104孢子/頭;蟲(chóng)菌 2,5.1×104孢子/頭;PPDA 菌 1,10.2×104孢子/頭;PPDA 菌 2,5.1×104孢子/頭;商品菌,10.2×104孢子/頭。
每天觀察1次,24 d后根據(jù)觀察數(shù)據(jù)計(jì)算接種后松墨天牛幼蟲(chóng)的死亡率、僵蟲(chóng)率,以時(shí)間(d)的對(duì)數(shù)為x,死亡率的幾率值為y,采用幾率值分析法,計(jì)算毒力回歸方程和致死中時(shí)(LT50)。試驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析[17]。
1.2.2 染菌量與毒力
試驗(yàn)采用蟲(chóng)菌繁殖法獲得的菌株MA 0813孢子,接種濃度為高濃度5.05×106孢子/m L,低濃度0.51×106孢子/m L。接種方法:用移液槍吸取一定量的菌液滴涂越冬后的4、5齡松墨天牛幼蟲(chóng)背部。試驗(yàn)共設(shè):高5(高濃度 5μL)、高 3(高濃度3μL)、低10(低濃度10μL)、低5(低濃度5μL)、低3(低濃度3μL)和空5等6個(gè)處理???處理滴涂0.2%吐溫-80的無(wú)菌水5μL作為空白對(duì)照。每天觀察1次,觀察22 d,獲得的結(jié)果用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,分別得出LD50,毒力回歸方程和致死中時(shí)(LT50)等[17]。
1.2.3 染菌方式與毒力
試驗(yàn)在室內(nèi)養(yǎng)蟲(chóng)箱中進(jìn)行,共設(shè)4個(gè)處理,每處理30頭越冬后的4齡、5齡松墨天牛幼蟲(chóng)。每頭幼蟲(chóng)放入瓶蓋鉆有2mm大小洞孔的5 m L塑料離心管內(nèi)。
放菌蠅法:養(yǎng)蟲(chóng)箱中同時(shí)放入裝有松墨天牛幼蟲(chóng)的塑料離心管和菌蠅瓶。菌蠅瓶?jī)?nèi)放入150頭將羽化的蚤蠅蛹,菌蠅瓶瓶蓋經(jīng)特殊設(shè)計(jì),羽化后蚤蠅必須鉆過(guò)有2層白僵松墨天牛幼蟲(chóng)塊的白僵菌層,達(dá)到攜帶白僵菌分生孢子的目的。捕獲10頭鉆出菌蠅瓶的蚤蠅,放入0.2%吐溫-80的無(wú)菌水中振蕩、稀釋后,用血球計(jì)數(shù)板測(cè)量蚤蠅攜帶白僵菌分生孢子的數(shù)量。放蠅法:方法同菌蠅法,但瓶蓋內(nèi)沒(méi)有白僵菌層。撒菌粉:用單層紗布包1 g白僵松墨天牛幼蟲(chóng)塊,在松墨天牛幼蟲(chóng)離心管上方20 cm處振蕩10次。對(duì)照:放入松墨天牛幼蟲(chóng),不作其他處理。30 d后檢查各處理松墨天牛幼蟲(chóng)僵死情況。
1.3.1 對(duì)松樹(shù)段內(nèi)松墨天牛低齡幼蟲(chóng)防效試驗(yàn)
2010年6 月,從山上砍取生長(zhǎng)正常,直徑4~5 cm,長(zhǎng)50 cm松樹(shù)段和1年生嫩枝,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)供松墨天牛成蟲(chóng)取食和產(chǎn)卵,到松樹(shù)段上有多處松墨天牛低齡幼蟲(chóng)(1齡、2齡)為害狀和排出的木屑時(shí),松樹(shù)段兩端包尼龍薄膜后放入養(yǎng)蟲(chóng)箱中進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)采用放菌蠅法,養(yǎng)蟲(chóng)箱內(nèi)放入的菌蠅瓶有300頭將羽化的蚤蠅蛹,30 d后劈開(kāi)松樹(shù)段,檢查松樹(shù)段內(nèi)松墨天牛幼蟲(chóng)僵死情況。
1.3.2 林地防治松墨天牛低齡幼蟲(chóng)效果試驗(yàn)
試驗(yàn)于2010年7月10日,在東錢(qián)湖白巖山靈峰廟下的林地中進(jìn)行。試驗(yàn)只設(shè)放菌蠅法(同上述)和對(duì)照。對(duì)照設(shè)在離試驗(yàn)區(qū)1 000 m的森林中。試驗(yàn)時(shí)每隔大約100 m,在離地1m的樹(shù)干上用膠帶紙粘貼上1個(gè)菌蠅瓶(內(nèi)放入150~200頭將羽化的蚤蠅蛹),共放10個(gè),15 d后再放1次。8月25日在試驗(yàn)區(qū)中砍取生長(zhǎng)衰弱或松墨天牛蟲(chóng)幼蟲(chóng)為害狀明顯的松樹(shù),劈開(kāi)松樹(shù)段,檢查松樹(shù)內(nèi)松墨天牛幼蟲(chóng)寄生僵死百分率。
成蟲(chóng)體長(zhǎng)1~2 mm,胸背部隆起呈駝背狀,胸部背板黃褐色或褐色,側(cè)板黃色。中側(cè)片具毛,無(wú)鬃,背側(cè)鬃2根,小盾片鬃2對(duì)。腹部背板黑色至黑褐色,腹面后幾節(jié)氣門(mén)異常大。翅略呈灰褐色,翅脈黑褐色,翅無(wú)橫脈,徑脈粗壯,近翅的中部與前緣脈愈合,中脈細(xì)弱,斜伸過(guò)翅面。足黃色,腿節(jié)側(cè)扁,后足腿節(jié)末端色暗,前足跗節(jié)細(xì)長(zhǎng),后足腿節(jié)基部的腹緣毛長(zhǎng)于腹緣端部的腹緣毛;脛節(jié)缺前背纖毛,后背纖毛強(qiáng)壯。卵細(xì)長(zhǎng),底部平,呈船形。幼蟲(chóng)白色,頭部尖,無(wú)長(zhǎng)尾。蛹黃色或紅褐色,前端背部具一對(duì)羽化板,在每個(gè)板狀結(jié)構(gòu)上各生一個(gè)呼吸角。初步鑒定為東亞異蚤蠅(Megaselia spiracularis Schmitz)。
年生活史:從2009年4月21日出現(xiàn)越冬代成蟲(chóng)到11月15日幼蟲(chóng)全部化蛹止,全年發(fā)生10代,以蛹越冬。各代時(shí)間為:第1代,4月下旬-5月下旬;第2代,5月下旬-6月上旬;第3代,6月上旬-6月下旬;第4代,6月下旬-7月上旬;第5代,7月上旬-7月下旬;第6代,7月下旬-8月上旬;第7代,8月上-8月下旬;第8代,8月下旬-9月中旬;第9代,9月中旬-10月中旬;第10代,10月中旬-11月中旬,為越冬代。
圖1 東亞異蚤蠅特征
成蟲(chóng)羽化后當(dāng)天便交尾產(chǎn)卵。雌雄成蟲(chóng)在飛行中交尾。卵多產(chǎn)于相對(duì)干爽的食物表面和培養(yǎng)皿接近水面的壁上,多為10~20粒聚在一起。雌蟲(chóng)平均產(chǎn)卵45粒。解剖雌成蟲(chóng)平均懷卵量35.3粒,幅度17~51粒。卵期很短,在室溫(平均溫度23℃)條件下,10~24 h內(nèi)孵化。幼蟲(chóng)期4~6 d。1~2齡幼蟲(chóng)多聚在一起取食,進(jìn)入3齡后期,便開(kāi)始遷移,尋找隱蔽場(chǎng)所化蛹。蛹開(kāi)始為淡黃色,之后逐漸變暗,直至成為紅褐色?;?~3 d后形成一對(duì)呼吸角。經(jīng)過(guò)3~5 d,成蟲(chóng)破殼而出。成蟲(chóng)活動(dòng)敏捷,做“停走”式運(yùn)動(dòng),并開(kāi)始交尾、產(chǎn)卵。成蟲(chóng)期在日均溫28~29℃時(shí)只有1 d,日均溫25℃時(shí)1~2 d,日均溫20℃時(shí)2~3 d。
誘卵皿誘卵情況:第1天 69粒,第2天121粒,第3天35粒。其中最多1個(gè)誘卵皿有卵91粒,6~7 d后有84頭發(fā)育為老熟幼蟲(chóng),表明1 g豬腿肉片可以繁殖40頭以上的幼蟲(chóng)。
東亞異蚤蠅在平原草坪上的擴(kuò)散能力和特點(diǎn)見(jiàn)表1。該蚤蠅活動(dòng)能力強(qiáng),飛行擴(kuò)散能力超過(guò)400m,但是就近產(chǎn)卵趨勢(shì)十分明顯,100 m處引誘皿中產(chǎn)卵量占總產(chǎn)卵量的72.30%,200m處引誘皿中產(chǎn)卵量占總產(chǎn)卵量的16.74%,2處誘卵量占總誘卵量的89.04%。
表1 東亞異蚤蠅的飛行擴(kuò)散能力
繁菌方式與白僵菌毒力測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果表明,白僵菌繁菌方式與其對(duì)松墨天牛幼蟲(chóng)的毒力明顯有關(guān),用松墨天牛幼蟲(chóng)繁殖的球孢白僵菌MA 0813菌株2種接種濃度,僵死蟲(chóng)率都為100%,LT50分別為9.81 d和13.79 d。PPDA上培養(yǎng)MA0813菌株只在高濃度時(shí)才有理想效果,接種量為10.2×104孢子/頭的僵死蟲(chóng)率為100%,但是其LT50為17.22 d,比蟲(chóng)菌相同接種量處理慢了7 d多,而PPDA菌接種量5.1×104孢子/頭的效果不理想。
不同孢子濃度和接種量接種越冬后的松墨天牛幼蟲(chóng)試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。球孢白僵菌MA 0813菌株滴涂法的毒力回歸方程為y=8.04+3.63x,R=0.986 5。LD50=(0.145 5±0.110 5)萬(wàn)孢子/頭,95%置信區(qū)間0.033 8萬(wàn)~0.239 6萬(wàn)孢子/頭。LD95=(0.412 8±0.101 9)萬(wàn)孢子/頭,95%置信區(qū)間0.260 5萬(wàn)~0.511 6萬(wàn)孢子/頭。
表2 球孢白僵菌不同繁菌方式對(duì)越冬后松墨天牛幼蟲(chóng)的毒力
表3的結(jié)果說(shuō)明,滴涂高濃度孢子液(5.05×104孢子/m L)5μL和3μL處理的僵死蟲(chóng)率都為100%,LT50分別為10.39 d和11.77 d,兩者沒(méi)有明顯區(qū)別,但是兩者LT90有明顯差別。而滴涂低濃度孢子液(0.51×104孢子/m L)10μL處理的僵死蟲(chóng)率96.7%,同滴涂高濃度孢子液的2個(gè)處理效果接近,而與滴涂低濃度孢子液5μL和3μL的處理有明顯區(qū)別。將表2中蟲(chóng)菌2處理的數(shù)據(jù)同表3中高3處理的數(shù)據(jù)比較可以發(fā)現(xiàn),同一菌株,同一繁菌方法,兩處理的僵死蟲(chóng)率都為 100%,LT50蟲(chóng)菌2處理為13.79 d,高3處理的11.77 d,但是接種的菌量和方法不同,高3處理滴涂孢子液1.5×104孢子/頭,蟲(chóng)菌2處理涂孢子粉5.1×104孢子/頭,兩處理接種的孢子量為1∶3.4,表明滴涂孢子液處理的毒力明顯高于涂孢子粉處理。
表3 球孢白僵菌MA0813菌株不同孢子濃度、數(shù)量對(duì)越冬后松墨天牛幼蟲(chóng)的毒力
經(jīng)對(duì)10頭鉆出菌蠅瓶的蚤蠅攜菌量進(jìn)行測(cè)定,放菌蠅法中每只蚤蠅平均攜帶白僵菌分生孢子數(shù)量為1.02×105孢子/頭。
不同染菌方式處理越冬后松墨天牛幼蟲(chóng)的校正僵死蟲(chóng)率分別為:放菌蠅法53.3%;放蠅法13.3%;撒菌粉23.3%;對(duì)照0%。表明3種染菌方式都有一定的效果,其中放菌蠅法在菌蠅與松墨天牛幼蟲(chóng)數(shù)量比為 5∶1條件下,校正僵死蟲(chóng)率達(dá)到53.3%,明顯高于放蠅法和撒菌粉及兩者之和。
2.7.1 對(duì)松樹(shù)段內(nèi)松墨天牛低齡幼蟲(chóng)效果
30 d后劈開(kāi)松樹(shù)段,檢查松樹(shù)段內(nèi)松墨天牛1~2齡幼蟲(chóng)僵死情況,結(jié)果(表4)表明,在室內(nèi)條件下,每養(yǎng)蟲(chóng)箱內(nèi)放入300頭將羽化的蚤蠅蛹(菌蠅與松墨天牛低齡幼蟲(chóng)數(shù)量比大約為4~5∶1)時(shí),3種方法對(duì)松樹(shù)段內(nèi)松墨天牛低齡幼蟲(chóng)都有效果,其中放菌蠅法的校正僵死蟲(chóng)率達(dá)到46.40%,明顯高于放蠅法和撒菌粉及兩者之和。撒菌粉法的校正僵死蟲(chóng)率為21.85%,明顯高于放蠅法。
表4 不同染菌法對(duì)松樹(shù)段內(nèi)松墨天牛低齡幼蟲(chóng)的效果1)
2.7.2 林地防治松墨天牛低齡幼蟲(chóng)試驗(yàn)結(jié)果
試驗(yàn)區(qū)共砍取生長(zhǎng)衰弱或松墨天牛幼蟲(chóng)為害狀明顯的松樹(shù)4株,共檢查到松樹(shù)內(nèi)松墨天?;钣紫x(chóng)56頭,白僵蟲(chóng)37頭,死蟲(chóng)4頭。松墨天牛低齡幼蟲(chóng)僵死率為37.3%。對(duì)照區(qū)共砍取松樹(shù)2株,檢查到活幼蟲(chóng)43頭,白僵蟲(chóng)1頭,白僵蟲(chóng)百分率2.4%。試驗(yàn)結(jié)果初步表明,7月上中旬在山林中每隔大約100 m,放150~200頭菌蠅2次,能夠提高松墨天牛低齡幼蟲(chóng)僵死率達(dá)35%。
劉廣純等[14-16]對(duì)東亞異蚤蠅各蟲(chóng)態(tài)的形態(tài)特征進(jìn)行了描述。東亞異蚤蠅以豬腿肉片飼養(yǎng)在寧波全年發(fā)生10代,以蛹越冬。在平均溫度24℃室溫條件下,11~15 d完成1代。人工飼養(yǎng)、繁殖十分容易,平均1 g豬腿肉片可以繁殖40頭以上的幼蟲(chóng)。
研究發(fā)現(xiàn),繁菌方式與白僵菌對(duì)松墨天牛幼蟲(chóng)的毒力明顯有關(guān)。接種濃度相同時(shí),用松墨天牛幼蟲(chóng)繁殖的白僵菌比PPDA上培養(yǎng)的白僵菌對(duì)松墨天牛幼蟲(chóng)LT50約少7 d。說(shuō)明蟲(chóng)菌法繁殖的白僵菌毒力遠(yuǎn)高于其他方法。
本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)東亞異蚤蠅成蟲(chóng)壽命很短,夏天日平均溫度在28~29℃時(shí)只有1 d,日平均溫度在25℃時(shí)只有1~2 d。本地松墨天牛低齡幼蟲(chóng)發(fā)生期為6月下旬到9月上旬的高溫季節(jié),所以作者認(rèn)為在實(shí)際防治應(yīng)用時(shí)可以不考慮該蚤蠅與白僵菌有無(wú)毒力關(guān)系。
防治松材線蟲(chóng)病需要面對(duì)山林環(huán)境條件和松墨天牛鉆蛀為害特性,生物防治是最主要方法之一。寄生性天敵昆蟲(chóng)哈氏硬皮腫腿蜂,在林間當(dāng)代擴(kuò)散半徑達(dá)50 m左右,寄生率平均為31.2%,3個(gè)月后蜂群在林間擴(kuò)散半徑達(dá)150 m左右,寄生率提高到25.0%~46.1%[18-19]。但是人工繁殖多代的哈氏硬皮腫腿蜂在自然條件下活力不高是個(gè)難題。在林間多種方法噴灑的白僵菌孢子不易接觸到松墨天牛幼蟲(chóng)而侵入,從而影響防效。采用蟲(chóng)菌結(jié)合方法能明顯提高效果[7-10]。甘玉英等[20]在松墨天牛幼蟲(chóng)初期采用剝皮噴菌小蠹攜傳法(林間選擇有小蠹蟲(chóng)的死樹(shù),將其伐倒,剝開(kāi)樹(shù)皮,并把所有的內(nèi)皮朝上,用噴霧法把菌液均勻噴灑在死樹(shù)皮上,使小蠹成蟲(chóng)全部染菌),達(dá)到防治松墨天牛幼蟲(chóng)的目的。該法對(duì)松墨天牛幼蟲(chóng)當(dāng)代校正寄生率達(dá)41.53%,明顯高于噴霧法的26.74%。本研究采用放菌蠅法,7月上中旬在山林中每隔大約100 m,在離地1m的樹(shù)干上用膠帶紙粘貼上1個(gè)菌蠅瓶,先后放 2次,松墨天牛低齡幼蟲(chóng)校正僵死率達(dá)35%。相比之下,放菌蠅法更方便、更省工,適合工廠化生產(chǎn)和大面積推廣、應(yīng)用。在推廣、應(yīng)用前,對(duì)放菌蠅的時(shí)間、次數(shù)、距離和菌蠅與松墨天牛比例等有待進(jìn)一步探明。
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