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田皂角水提物藥理作用的實(shí)驗(yàn)研究

2011-12-29 00:00:00李燕婧鐘正賢陳家源盧文杰
云南中醫(yī)中藥雜志 2011年12期


  摘要:目的:觀察田皂角水提物的藥理作用。方法:采用試管法抗菌、耳廓腫脹法、扭體法、皮膚過敏試驗(yàn)和急性毒性試驗(yàn),進(jìn)行抗菌、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗過敏試驗(yàn)。結(jié)果:田皂角水提物可抗菌;減輕小鼠耳廓腫脹;減少小鼠扭體次數(shù);降低皮膚過敏反應(yīng)。急性毒性試驗(yàn)表明,田皂角水提物的最大給藥量為150 g生藥/kg。結(jié)論:田皂角水提物具有一定的抗菌、抗炎、鎮(zhèn)痛和抗過敏作用。
  關(guān)鍵詞:田皂角水提物;藥理試驗(yàn);抗菌;抗炎;鎮(zhèn)痛;抗過敏
  中圖分類號(hào):R285文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
  文章編號(hào):1007-2349(2011)12-0063-02
  
  田皂角(Aeschynornene indicaL.)別名合萌、水皂角。為蝶形花科植物田皂角,分布于華北、華東、中南、西南等地。味甘、苦,性微寒??汕鍩崂麧瘢铒L(fēng)明目,通乳。主治熱淋、血淋、水腫、泄瀉、痢疾、目赤腫痛等癥[1]。關(guān)于其化學(xué)成分和藥理研究未見報(bào)道。本文根據(jù)其民間功用,對(duì)田皂角水提物進(jìn)行相關(guān)藥理試驗(yàn),以期發(fā)現(xiàn)新的藥用途徑,為臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)?,F(xiàn)將研究報(bào)告如下。
  1實(shí)驗(yàn)材料
  1.1受試藥物田皂角水提物(5.19 g生藥/g膏),由本院中藥化學(xué)研究所提供。實(shí)驗(yàn)時(shí)用蒸餾水研磨配制成藥液備用。阿司匹林腸溶片為武漢遠(yuǎn)大制藥集團(tuán)股份有限公司產(chǎn)品,批號(hào):081101。地塞米松為天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司產(chǎn)品,批號(hào):090611。息斯敏,西安楊森制藥有限公司產(chǎn)品,批號(hào)090218967。
  1.2動(dòng)物昆明種小鼠,清潔級(jí),體重18~22 g,雌雄各半。由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,許可證號(hào):SCXK桂2003—0003。小鼠分性別飼養(yǎng)于空調(diào)實(shí)驗(yàn)室內(nèi),室溫:(22±2)℃,相對(duì)濕度:(60±2)%,喂顆粒標(biāo)準(zhǔn)飼料,自由飲水和攝食。
  1.3儀器722型光柵分光光度計(jì),上海分析儀器三廠產(chǎn)品。FA1004-型萬分之一電子天平,上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品。
  1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用PEMS 3.1統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( ±s )表示,組間比較采用t檢驗(yàn)。
  2方法與結(jié)果
  2.1抗菌試驗(yàn)取田皂角水提物用水配制成試驗(yàn)藥液,115 ℃高壓滅菌20 min,備用。采用液體試管二倍稀釋法,用營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、改良馬丁培養(yǎng)基將供試液作系列稀釋,使藥液濃度為1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512、1∶1024,分裝試管,每管1.0 mL,第11管作為陽性對(duì)照,第12管作為陰性對(duì)照。除陰性對(duì)照管外,每管接種100,000CFU/mL相應(yīng)菌液0.1 mL,分別接種大腸埃希菌、乙型副傷寒沙門菌、福氏志賀氏菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌。細(xì)菌置35 ℃~37 ℃培養(yǎng)24 h,真菌置25 ℃~28 ℃培養(yǎng)24~48 h,將各管培養(yǎng)物分別接種于相應(yīng)的不含藥物的瓊脂培養(yǎng)基平板上,細(xì)菌置35 ℃~37 ℃培養(yǎng)24 h,真菌置25 ℃~28 ℃培養(yǎng)24~48 h,以生長菌落不超過5個(gè)者為田皂角水提物的最小抑菌濃度(MIC)。結(jié)果見表1。
  表1田皂角水提物體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果
  試驗(yàn)菌種菌號(hào)藥物最低抑菌濃度(MIC)稀釋度藥物濃度/mg?mL-1金黃色葡萄球菌260031∶3211.71表皮葡萄球菌260691∶1623.43大腸埃希桿菌441021∶1623.43乙型副傷寒沙門菌500941∶493.75福氏志賀氏菌515721∶846.87銅綠假單胞菌101041∶846.87枯草芽孢桿菌635011∶3211.71白色念珠菌101041∶1623.43結(jié)果表明,田皂角水提物對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌有較強(qiáng)抗菌作用;對(duì)白色念珠菌、大腸桿菌、表皮葡萄球菌具有中度的抗菌作用;對(duì)乙型副傷寒沙門菌、福氏志賀氏菌、銅綠假單胞菌具有低度抗菌作用。
  2.2對(duì)醋酸所致小鼠扭體次數(shù)的影響[2]取小鼠50只,雌雄各半,隨機(jī)分為空白對(duì)照組,田皂角水提物高、中、低劑量(15.0、7.5、5.0 g/kg)組和陽性藥阿斯匹林(0.2 g/kg)組,每組10只。每天灌胃給藥1次,空白對(duì)照組給予等體積蒸餾水,連續(xù)給予5 d。于末次給藥后1 h,每只小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 mL/只,立即觀察并記錄20 min內(nèi)各小鼠的扭體次數(shù)。比較給藥組與對(duì)照組之間的差異,評(píng)價(jià)受試藥物的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果見表2。
  表2田皂角水提物對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響( ±s ,n=10)
  組別劑量/g?kg-1扭體次數(shù)空白對(duì)照組—19.8±13.9阿司匹林0.27.8±5.3*田皂角水提物15.08.8±6.1*田皂角水提物7.58.2±4.5*田皂角水提物5.012.9±10.3與空白對(duì)照組比較,*P<0.05
  結(jié)果表明,與空白對(duì)照組比較,田皂角水提物大、中劑量組及阿司匹林組均明顯減少小鼠扭體次數(shù),提示田皂角水提物具有一定鎮(zhèn)痛作用。
  2.3對(duì)巴豆油所致小鼠耳廓腫脹的抑制作用[3]取小鼠50只,雌雄各半,隨機(jī)分為空白對(duì)照組,田皂角水提物高、中、低劑量(15.0、7.5、5.0 g/kg)組和陽性藥地塞米松(0.0045 g/kg)組,每組10只。用藥各組每天灌胃給藥1次,空白對(duì)照組給予等體積蒸餾水,連續(xù)給予7 d。于末次給藥0.5 h后,用微量注射器取(0.05 mL 2%)巴豆油溶液涂于小鼠右耳,待4 h后處死小鼠。立即用口徑為8 mm的打孔器,沿著小鼠左右耳廓相同部位打孔取材,然后在電子天平上分別稱重,以兩耳片重量(mg)的差值作為腫脹程度指標(biāo),并求出百分抑制率(%)。結(jié)果見表3。
  表3田皂角水提物對(duì)巴豆油引起小鼠耳廓腫脹的影響( ±s ,n=10)
  組別劑量/g?kg-1腫脹度/mg抑制率(%)空白對(duì)照組—17.09±4.39—地塞米松0.004511.62±4.14*32.0田皂角水提物15.013.25±2.55*22.5田皂角水提物7.512.98±3.11*24.0田皂角水提物5.013.90±5.6318.7與空白對(duì)照組比較,*P<0.05
  結(jié)果表明,與空白對(duì)照組比較,田皂角水提物大、中劑量組及地塞米松組均可明顯降低小鼠耳廓腫脹度,提示田皂角水提物具有抗炎作用。
  2.4小鼠被動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn)[4]抗原:醫(yī)用天花粉。佐劑:4%氫氧化鋁凝膠。臨用時(shí)以3.75 mg天花粉溶于1.5 mL氫氧化鋁凝膠中。致敏:健康小鼠10只,體重18~22 g,將上述天花粉氫氧化鋁凝膠混懸液腳掌注射,兩只后腳掌各注入0.05 mL,共注射0.1 mL。15 d后,斷頭取血,離心取抗血清備用。
  被動(dòng)皮膚致敏:另取小鼠50只,雌雄各半,隨機(jī)分為空白對(duì)照組,田皂角水提物高、中、低劑量(15.0、7.5、5.0 g/kg)組和陽<strong style="position:abs

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