摘 要:目的:研究民族藥芪花降糖方對四氧嘧啶小鼠糖尿病模型的影響。方法:小鼠尾靜脈注射四氧嘧啶復(fù)制糖尿病小鼠模型,以二甲雙胍為陽性對照,研究芪花降糖方灌胃給藥對糖尿病小鼠血糖的影響。結(jié)果:芪花降糖方對糖尿病小鼠有明顯降血糖作用,與模型組比較差異有顯著性意義(P<0.05)。結(jié)論:芪花降糖方能降低糖尿病小鼠的血糖,值得進一步深入研究。
關(guān)鍵詞:芪花降糖方;糖尿??;血糖
中圖分類號:R285文獻標(biāo)識碼:A
文章編號:1007-2349(2011)05-0059-02
芪花降糖方是本項目組在對云南民族藥進行整理研究工作中,收集到的治療糖尿病的有效驗方,由云南苗族藥三七等藥物組成,為考察該方對糖尿病的作用,筆者復(fù)制了四氧嘧啶糖尿病小鼠動物模型,并用該模型觀察了該藥的抗糖尿病作用?,F(xiàn)將實驗結(jié)果報告如下。
1 實驗材料
1.1 動物 健康昆明種小鼠,雄性,體重18~22 g,四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院動物研究所提供,生產(chǎn)許可證號:SCXK(川)2008-24。生產(chǎn)批號:Dossy2010-7。
1.2 藥品與試劑 芪花降糖方藥物煎劑,由云南中醫(yī)學(xué)院民族醫(yī)藥研究中心提供,是由云南產(chǎn)三七等藥組成的復(fù)方,按常規(guī)方法制備供試藥,臨用前用蒸餾水配成所需濃度;二甲雙胍片,北京雙鶴藥業(yè)股份有限公司,090809;四氧嘧啶(Alloxan),Sigma-Aldrich公司,1437801;葡萄糖氧化酶法測定試劑盒,上海榮盛生物技術(shù)有限公司,20100501。
1.3 儀器 UV2250-紫外分光光度計,島津公司(日本);CF16 RXⅡseries冷凍離心機,HITACHI公司(日本)。
2 實驗方法
2.1 四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型復(fù)制 參照文獻
[1]選用健康雄性昆明種小鼠,禁食6 h,自由飲水,實驗前測定正常小鼠血糖值為7.30~9.99 mmol/L,自尾靜脈按70 mg/kg注入四氧嘧啶,復(fù)制糖尿病模型。造模后第4 d尾靜脈取血,用葡萄糖氧化酶法測定血糖,選用血糖值>11.0 mmol/L的小鼠作為合格的受試糖尿病模型小鼠
[2]。
2.2 實驗動物的分組與給藥
[3~4] 受試小鼠在造模4 d后測定的血糖值記為0周,將篩選合格的小鼠,隨機分為模型對照組,陽性對照組和芪花降糖方組;分別給予等量蒸餾水、二甲雙胍、芪花降糖方藥液。各組動物均按0.2mL/10 g體重灌胃(ig)給藥,每天定時給藥1次,連續(xù)給藥4周。
2.3 實驗動物血糖測定方法 每周取血前1 h均給藥1次,斷尾取血10 μL,加入400 μL蛋白沉淀劑中(冰浴中放置),3000 r/min,離心5min(冷凍離心機),取上清液250 μL,按試劑盒說明書采用葡萄糖氧化酶法進行血糖測定。
2.4 檢測指標(biāo) (1)體重、進食量和飲水量:實驗期間,每天記錄小鼠的進食量和飲水量,并觀察動物的一般情況;每周測量1次小鼠的體重;(2)血糖:實驗期間,每周自小鼠尾靜脈取血,用葡萄糖氧化酶法測定血糖水平,連續(xù)4周,動態(tài)觀測動物血糖的變化。
3 統(tǒng)計學(xué)方法
實驗數(shù)據(jù)均以(Ax-G ±s )表示,采用單因素方差分析法進行數(shù)據(jù)處理。
4 實驗結(jié)果
芪花降糖方對四氧嘧啶糖尿病小鼠進食量、飲水量、體重和血糖的影響結(jié)果分別見表1~表4。
從上表1、表2和表3中可看出:陽性藥物組和芪花降糖方組動物在給藥1~4周內(nèi)進食量和飲水量明顯減少(P<0.05);與模型組動物比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。在整個實驗過程中芪花降糖方對糖尿病小鼠體重?zé)o明顯影響,與模型組比較(P>
0.05)。
本批實驗動物造模前平均血糖值為(8.72±1.12)mmol/L,模型組小鼠于造模后血糖呈升高的趨勢。陽性對照藥組于第1周血糖開始降低,與模型組比較,第1、3、4周差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。芪花降糖方在給藥1周后血糖開始降低,第2、3、4周與模型組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
5 討論
四氧嘧啶是胰島β細胞毒劑,通過產(chǎn)生超氧自由基而破壞β細胞,導(dǎo)致胰島素缺乏,產(chǎn)生類似糖尿病的表現(xiàn),是篩選糖尿病藥物最常用的動物模型
[2]。小鼠于造模后72 h后血糖穩(wěn)定升高,筆者在后96 h取血測定血糖,選用血糖值>11.0 mmol/L的小鼠作為模型小鼠
[2]。造模成功的小鼠血糖值與造模型前平均血糖值為(8.72±1.12)mmol/L比較,差異有顯著性意義,且均出現(xiàn)明顯多飲、多食的表現(xiàn)。
芪花降糖方是由云南苗族藥三七等藥物組成的民族藥有效驗方,可明顯降低四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的血糖,改善多飲、多食的表現(xiàn),值得進一步深入研究。
參考文獻:
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