趙永福，鄒堂斌，羅楊合

（賀州學院化學與生物工程系，廣西賀州 542800）

超聲波輔助萃取-氣相色譜法同時測定蔬菜中5種有機磷農(nóng)藥殘留*

趙永福，鄒堂斌，羅楊合

（賀州學院化學與生物工程系，廣西賀州 542800）

建立超聲波輔助萃取-氣相色譜法同時分離測定蔬菜中5種有機磷農(nóng)藥殘留量的方法。實驗結(jié)果表明，采用超聲波加速提取有機磷農(nóng)藥殘留，樣品提取效果好，干擾物少，檢測快速；在DB-1701色譜柱中，供試的5種有機磷農(nóng)藥分離良好；以FPD為檢測器，選擇性較好。方法的檢出限為0.004～0.01 μg／mL，5種農(nóng)藥在2個添加水平下的回收率為78.9%～105.9%，測定結(jié)果的相對標準偏差為2.6%～7.6%(n=6)。該方法具有測定有機磷農(nóng)藥種類多、快速等優(yōu)點，能滿足農(nóng)藥多殘留分析的要求。

超聲波輔助萃??；氣相色譜法；有機磷農(nóng)藥殘留

我國是世界上施用農(nóng)藥量最大的國家之一，其中有機磷類農(nóng)藥用量接近農(nóng)藥用量的70%［1］。有機磷類農(nóng)藥屬于高效、廣譜殺蟲劑，應用于水果、蔬菜等的病蟲害防治。國內(nèi)外經(jīng)常報道關于有機磷急性中毒的事件，而且人類通過飲食攝入還會將殘留農(nóng)藥蓄積于體內(nèi)，從而給人體造成慢性傷害，因此食品中有機磷農(nóng)藥殘留問題一直受到人們關注。歐洲、日本等國家和地區(qū)不斷修改進口水果、蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留量的限制規(guī)定，因此有關蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留檢測方法的研究也變得十分迫切與必要。目前，蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留檢測方法有氣相色譜法［2-9］、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法［10，11］等。其中大多數(shù)需要經(jīng)過提取、凈化和檢測等步驟，方法前處理過程繁瑣、耗時較長，不適合蔬菜產(chǎn)品多批次快速檢驗。筆者利用超聲波輔助萃取方法，提高有機磷農(nóng)藥殘留提取率，并且減少了提取時間，可實現(xiàn)快速分析。綜合采用GC-FPD法檢測，干擾減小，對于有機磷農(nóng)藥殘留的檢測效果令人滿意。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀：GC-17A型，配火焰光度檢測器(FPD)，日本島津公司；

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：RE52-99型，上海亞榮生化儀器廠；

超聲波清洗器：KQ-300DB型，昆山市超聲儀器有限公司；

甲胺磷、氧化樂果、敵敵畏、馬拉硫磷、對硫磷標準樣品溶液：農(nóng)藥殘留級，均為100 μg／mL，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護檢測所；

甲胺磷、氧化樂果、敵敵畏、馬拉硫磷、對硫磷標準儲備液：均為10 μg／mL，分別準確吸取甲胺磷、氧化樂果、敵敵畏、馬拉硫磷、對硫磷標準樣品溶液1 mL于10 mL容量瓶中，用丙酮稀釋到刻度，配制成各自的標準儲備液，使用時以丙酮逐級稀釋至所需濃度；

丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯：農(nóng)藥殘留級；

無水硫酸鈉：分析純，北京化工廠。

1.2 樣品處理

稱取10 g蔬菜樣品在組織搗碎機上制成勻漿，加入丙酮20 mL，超聲提取5 min，減壓抽濾，濾渣用丙酮超聲提取5 min，減壓抽濾。合并兩次濾液，搖勻，轉(zhuǎn)移至100 mL分液漏斗中，待凈化。

在分液漏斗中加二氯甲烷50 mL，緩慢振搖2 min，靜置，待清晰分層后，收集有機相(下層)于100 mL三角瓶中。加25 mL二氯甲烷于分液漏斗水相中，重復操作1次后棄去水相。在有機相中，加入20 g無水硫酸鈉，脫水；加3 g酸洗活性炭，脫色素等雜質(zhì)，振搖，靜置。待溶液澄清透亮后過濾，加2 mL乙酸乙酯于濾液中，真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮濾液至2 mL，待測。

1.3 色譜條件

色譜柱：DB-1701石英毛細管柱(30 m×0.32 mm， 0.25 μm)，美國 Agilent公司；進樣口溫度：240℃；FPD檢測器溫度：250℃；柱溫：從l10℃以10℃／min升至200℃，保持8 min，最后以20℃／min升至260℃，保持5 min；載氣：氮氣；柱流量：2.5 mL／min；進樣量：1 μL，不分流模式進樣。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜圖

按照1.3色譜條件，5種供試有機磷農(nóng)藥在DB-1701柱上有很好的分離效果和較低檢出限。分別對5種有機磷農(nóng)藥標準品進行保留時間的定性，5種有機磷農(nóng)藥在此條件下實現(xiàn)基線完全分離。0.2 μg／mL混合標準溶液的色譜圖見圖1。

2.2 提取條件

甲胺磷、氧化樂果、敵敵畏、馬拉硫磷、對硫磷5種有機磷農(nóng)藥在丙酮中有良好溶解性，在超聲波輔助下，用丙酮從蔬菜樣品中提取殘留農(nóng)藥具有良好的效果。色素干擾物用活性炭除去。

圖1 混合標準溶液色譜圖

比較3，5，8，l2 min不同萃取時間對萃取效果的影響。試驗表明，在超聲波輔助下，萃取5 min可保證良好的萃取效果，回收率高，重復性好。延長萃取時間回收率沒有明顯提高，分析時間增加了，而且重現(xiàn)性受到影響，因此本實驗選擇萃取時間為5 min。因此按照實驗選擇1.2樣品處理方法，既能保證良好的提取效果和較少的共萃物干擾，又節(jié)省處理時間。

2.3 線性方程、線性范圍與檢出限

準確配制0.0l～1 μg／mL不同濃度的各種有機磷農(nóng)藥混合標準溶液系列，按照1.3色譜條件進行測定，以峰面積A對濃度c進行線性回歸，繪制標準曲線。按3倍信噪比計算方法檢出限，結(jié)果見表1。

表1 5種有機磷類農(nóng)藥的線性方程、相關系數(shù)、線性范圍和檢出限

由表1可知，5種有機磷農(nóng)藥在0.01～1 μg／mL范圍內(nèi)線性關系良好，檢出限滿足出口水果、蔬菜農(nóng)藥殘留檢測要求。

2.4 回收率及精密度試驗

分別對農(nóng)藥添加水平為1.0，0.5 mg／kg的黃瓜、香菇空白樣品進行加標回收試驗，每個添加水平做6次平行試驗，計算平均回收率和相對標準偏差(RSD)，結(jié)果見表2。由表2可知，方法測定結(jié)果的相對標準偏差為2.6%～7.6%，回收率為78.9%～105.9%，說明該方法具有較高的精密度和準確度。

3 結(jié)語

超聲波輔助萃取-氣相色譜法同時分離測定蔬菜中5種有機磷農(nóng)藥殘留，加速了萃取過程，具有提取快速、回收率高的特點。單批樣品可在90 min內(nèi)完成檢測，檢測效果滿足蔬菜農(nóng)藥殘留分析要求。該方法可以實現(xiàn)蔬菜中多種有機磷農(nóng)藥殘留的快速檢測。

表2 樣品加標回收率與精密度(n=6)

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［9］單美娜，徐曉楓，蒲云霞，等.毛細管氣相色譜法測定蔬菜中19種有機磷農(nóng)藥殘留［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志2011，21(9)： 2 157-2 159.

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［11］王玉健，黃惠玲，林正鋒，等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定水果中吡菌磷等9種有機磷農(nóng)藥殘留量［J］.分析實驗室，2011，30(10)： 88-91.

Simultaneous Determination of 5 Organophosphorus Pesticide Residues in Vegetables by Gas Chromatography with Ultrasonic Wave Extraction

Zhao Yongfu，Zou Tangbin，Luo Yanghe
(Department of Chemistry and Biology Engineering of Hezhou University，Hezhou 542800, China)

A method of simultaneous separating and determining 5 organophosphorus pesticides residues in vegetables by gas chromatography with ultrasonic wave extraction was established. The result showed that this method had good performance of extraction，less interference and rapid determining for the organophosphorus pesticide residues.Five organophosphorus residues were separated well in DB-1701 column. Samples were determined by FPD with good selectivity. The detection limits were 0.004-0.0l μg／mL. The average recovery rates of the 5 pesticides with 2 level additions ranged from 78.9%to 105.9%and the relative standard deviations were 2.6%-7.6%(n=6).This method has the merits of rapid detection, it can meet the needs of the determination of pesticide residue.

ultrasonic wave extraction; gas chromatography; organophosphorus pesticide residue

O657.7

A

1008-6145(2012)04-0031-03

10.3969／j.issn.1008-6145.2012.04.009

*廣西教育廳項目(200911MS254)；賀州學院2009科研項目（2009KYYB03）；廣西桂東資源開發(fā)利用重點建設實驗室項目（2009SYS［2］03）

聯(lián)系人：趙永福；E-mail： zhaoyongfu2008@163.com

2012-04-05