熊勇超 侯月云 趙建忠 郭暉 何廣學(xué)

γ干擾素釋放試驗(yàn)在檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌潛伏感染中的應(yīng)用

熊勇超 侯月云 趙建忠 郭暉 何廣學(xué)

結(jié)核?。╰uberculosis，TB）是嚴(yán)重危害人民群眾健康的呼吸道傳染病，被列為我國法定重大傳染病之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織估計(jì)，全球約有1／3人群存在潛伏性結(jié)核感染（latent tuberculosis infection，LTBI），其中感染人群一生中約有5%～10%會(huì)發(fā)展為活動(dòng)性結(jié)核［1］。我國為結(jié)核病高發(fā)國家，LTBI數(shù)目十分龐大。根據(jù)現(xiàn)有資料顯示，我國 Mtb感染率為44.5%（結(jié)核菌素試驗(yàn)硬結(jié)直徑≥5mm為陽性）［2］。第五次全國結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查報(bào)告顯示，我國活動(dòng)性、涂陽和菌陽肺結(jié)核的患病率分別為459／10萬、66／10萬和119／10萬［3］。存在LTBI的人沒有明顯的癥狀和體征，也沒有傳染性，但是一旦機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)生變化，其發(fā)展為活動(dòng)性結(jié)核的可能性極高，并且會(huì)變得有傳染性。因此，早期發(fā)現(xiàn)和早期預(yù)防LTBI是結(jié)核病感染控制最有效的措施［4］。目前，國內(nèi)外對(duì)診斷LTBI還缺乏統(tǒng)一的金標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)階段用于診斷LTBI的方法主要有2種：結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)（tuberculin skin test，TST）和 γ干擾素釋放試驗(yàn)（interferon gamma release assays，IGRAs）。前者是目前還在應(yīng)用中的一種傳統(tǒng)的試驗(yàn)方法，后者是一種新型的檢測(cè)LTBI的方法，國內(nèi)外對(duì)IGRAs檢測(cè)LTBI已有一定的研究［5－6］，筆者對(duì)IGRAs的原理和方法、敏感度和特異度、成本和成本－效益分析，以及在不同年齡和不同免疫狀況人群中的應(yīng)用等方面進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。

一、IGRAs原理和方法

隨著科技的發(fā)展，診斷方法不斷更新進(jìn)步。近年來，有一類用于診斷LTBI的新方法進(jìn)入了人們的視線，即IGRAs。IGRAs的基本原理是：如果機(jī)體受到過Mtb感染，當(dāng)再次接觸相同抗原刺激后致使記憶T細(xì)胞發(fā)生增殖分化并釋放出大量γ干擾素（interferon gamma，IFN－γ），然后通過采用酶聯(lián)免疫吸附或酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)（ELISA或ELISPOT）方法定量檢測(cè)來診斷LTBI。目前IGRAs主要有兩種商業(yè)產(chǎn)品：一種是以ELISA試驗(yàn)原理為基礎(chǔ)的澳大利亞Cellestis公司生產(chǎn)的 QFT（QuantiFERON－TB）、QFT－G（QuantiFERON－TB Gold）和 QFT－IT（QuantiFERON－TB Gold In－Tube），該產(chǎn)品是通過體外檢測(cè)經(jīng)Mtb特異性抗原刺激后致T細(xì)胞所釋放的IFN－γ的含量來診斷LTBI；另一種是以ELISPOT試驗(yàn)原理為基礎(chǔ)的英國牛津Immunotech公司生產(chǎn)的T－SPOT，其通過體外檢測(cè)經(jīng)Mtb特異性抗原刺激后能產(chǎn)生IFN－γ的T細(xì)胞數(shù)量來診斷LTBI。

作者單位：102206北京，中國疾病預(yù)防控制中心結(jié)核病預(yù)防控制中心［熊勇超（北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院研究生）、侯月云（北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院研究生）、郭暉、何廣學(xué)］；北京市豐臺(tái)區(qū)疾病預(yù)防控制中心（趙建忠）

美國食品藥品管理局（Food and Drug Administration，F(xiàn)DA）于2001年提出QFT法作為第一代診斷LTBI的IGRAs［7］，該試驗(yàn)是采用純化蛋白衍生物（purified protein derivative，PPD）作刺激源，用ELISA檢測(cè)血液中IFN－γ的含量，從而對(duì)Mtb感染做出診斷。之后，F(xiàn)DA又分別于2005和2007年批準(zhǔn)使用 QFT－G 和 QFT－IT 來診斷 LTBI［8－9］，QFT－G利用早期分泌性靶抗原6（early secretory antigenic target 6，ESAT6）和培養(yǎng)分泌蛋白10（culture filtrate protein 10，CFP10）作為特異性抗原，刺激感染了Mtb的機(jī)體中具有免疫活性的T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生特異性的細(xì)胞因子IFN－γ，并通過ELISA檢測(cè)IFN－γ的濃度來診斷結(jié)核感染。為了提高診斷的特異度，QFT－IT法中還加入了TB7.7的部分多肽，這兩種檢測(cè)方法比第一代QFT更準(zhǔn)確，提高了診斷的特異度。FDA于2008批準(zhǔn)T－SPOT作為第四種IGRAs方法，其方法以ESAT6和CFP10作為刺激抗原，用ELISPOT方法測(cè)定分泌IFN－γ的T淋巴細(xì)胞的數(shù)量，來判斷Mtb感染情況。

二、IGRAs的特異度和敏感度

IGRAs采用結(jié)核特異性抗原，刺激感染了Mtb的機(jī)體中具有免疫活性的T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生特異性的細(xì)胞因子IFN－γ，通過檢測(cè)IFN－γ的濃度來診斷Mtb感染。QFT從第一代采用PPD，第二代使用ESAT6和CFP10，到第三代運(yùn)用ESAT6、CFP10和TB7.7作為特異性抗原，QFT檢測(cè)LTBI的特異度也不斷提升。此外，IGRAs敏感度也并不低，目前采用不同檢測(cè)手段診斷LTBI的Meta分析得出結(jié)論：在診斷LTBI時(shí)，IGRAs的敏感度至少達(dá)到和TST一樣高［6］。Pai等［10］的一項(xiàng)Meta分析的研究中顯示，對(duì)于LTBI低風(fēng)險(xiǎn)的人群中，QFT－G和QFT－IT在非免疫人群中的特異度為99%，在BCG免疫人群中的特異度為96%，T－SPOT合并特異度為93%，與之比較，TST在非免疫人群中的合并特異度為97%，而在BCG免疫人群中的特異度僅僅為59%。Higuchi等［11］在47例確診的結(jié)核病患者和84名健康的人群中比較QFT－G和T－SPOT兩種檢測(cè)LTBI的方法，評(píng)價(jià)了兩者的敏感度和特異度，QFT－G和T－SPOT的敏感度分別為87.2%和100.0%，兩者的特異度分別為98.8%和83.3%。結(jié)果顯示，QFT－G的特異度優(yōu)于T－SPOT，而敏感度不如后者。

國內(nèi)外許多研究中已經(jīng)對(duì)IGRAs的敏感度進(jìn)行了評(píng)價(jià)，直到目前IGRAs較TST更準(zhǔn)確，敏感度至少達(dá)到了TST的敏感度。在Kampmann等［12］的一項(xiàng)前瞻性研究中，調(diào)查的209例兒童中活動(dòng)性肺結(jié)核和LTBI分別為91和118例，研究者對(duì)受試對(duì)象分別采用 TST、QFT－IT和T－SPOT方法，結(jié)果顯示，對(duì)于痰培養(yǎng)確診的活動(dòng)性肺結(jié)核TST、QFT－IT 和 T－SPOT 的敏感度分別為 83%、80% 和58%。在埃塞俄比亞開展的一項(xiàng)研究，研究者在107名受試者人群中評(píng)價(jià)QFT－IT，其中包括31例痰培養(yǎng)陽性和76例痰培養(yǎng)陰性，使用廠家推薦的陽性臨界值（≥0.35IU／ml），檢測(cè)敏感度為 57.1% （20／35），然而其特異 度 為 36.8%（28／76）。如果IFN－γ的臨界值采用≥0.1IU／ml，其檢測(cè)的敏感度可增加至77.4%［13］。Soysal等［14］對(duì)100例未進(jìn)行過治療的培養(yǎng)陽性的空洞性結(jié)核病患者及47例健康志愿者進(jìn)行對(duì)照研究，研究結(jié)果表明，當(dāng)QFT－IT臨界值為0.818 IU／ml時(shí)，特異度最高，敏感度卻沒有明顯降低。廠家推薦QFT的臨界值為≥0.35IU／ml，是由 Mori等［15］在日本研究119例活動(dòng)性肺結(jié)核及216名健康對(duì)照時(shí)設(shè)定的。Lee等［16］的研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)臨界值界定為≥0.13IU／ml時(shí)，敏感度從70.1%增加到86.2%，而特異度從91.6%降低為86.2%。土耳其有一項(xiàng)評(píng)價(jià)用于診斷LTBI的IGRAs臨界值界定研究，發(fā)現(xiàn)當(dāng)臨界值界定為≥0.1IU／ml時(shí)，試驗(yàn)的敏感度增加了13.8%［14］。對(duì)贊比亞成年人的一項(xiàng)研究顯示，當(dāng)臨界值界定為≥0.13IU／ml時(shí)，檢測(cè)的敏感度從74%增加到82%，同時(shí)指出當(dāng)臨界值定為≥0.2IU／ml時(shí)，敏感度增加了10%［17］。因此，根據(jù)目前廠家推薦的高臨界值，QFT檢測(cè)結(jié)果也許存在假陰性結(jié)果，有必要在不同環(huán)境、不同人群、不同國家及不同結(jié)核病負(fù)擔(dān)地區(qū)開展界定新的臨界值的研究，低的臨界值用于暴露于結(jié)核病患者可能性高者，對(duì)于可能性低者，就采用高的臨界值。

目前，由于LTBI的診斷缺乏金標(biāo)準(zhǔn)，要想非常準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)IGRAs診斷LTBI的敏感度和特異度是很難做到的。但是從上述研究可以看出，在診斷LTBI時(shí)IGRAs比TST的特異度更高，而且敏感度并不比TST低，能有效地區(qū)分LTBI與健康人群，為LTBI的診斷提供可靠的依據(jù)。我國為結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家，人群BCG接種率高，采用IGRAs對(duì)LTBI的篩查及對(duì)結(jié)核病的預(yù)測(cè)尤其重要。

三、IGRAs成本及成本－效益評(píng)價(jià)

TST診斷LTBI的突出優(yōu)點(diǎn)是價(jià)格低廉，相對(duì)而言，由于IGRAs試驗(yàn)試劑盒依賴進(jìn)口且費(fèi)用較貴，我國對(duì)流動(dòng)人口、密切接觸者和HIV感染者等高風(fēng)險(xiǎn)人群進(jìn)行LTBI篩查時(shí)，是否可以推廣單用IGRAs或者推廣其作為TST陽性者二次篩查方法，與單用TST相比，三者成本－效果哪項(xiàng)最優(yōu)，成為其能否在我國推廣應(yīng)用的關(guān)鍵。關(guān)于LTBI篩查策略的成本及成本－效益，國內(nèi)外已有一定的研究。Nienhaus等［18］進(jìn)行了結(jié)核病篩查方法的成本及成本－效益的系統(tǒng)綜述的研究，綜述包括13篇相關(guān)研究，其中5篇文獻(xiàn)僅僅考慮了篩查的成本，8篇文獻(xiàn)分析了不同篩查方法的成本－效益研究，所有的13項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)使用IGRAs篩查方法時(shí)，成本均有所降低。6篇文獻(xiàn)比較了兩階段TST／IGRAs（即TST陽性人群中使用IGRAs方法）與單用IGRAs篩查方法，其中4篇文獻(xiàn)顯示兩階段TST／IGRA成本－效益好，另外2篇文獻(xiàn)單用的IGRAs篩查方法成本－效益更優(yōu)。已有的研究已經(jīng)充分證實(shí)對(duì)醫(yī)務(wù)人員、來自結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家的移民和密切接觸者等高風(fēng)險(xiǎn)人群使用IGRAs進(jìn)行TB篩查是最符合成本－效益原則的。

Diel等［19］的研究顯示，與TST單用檢測(cè)方法相比，TST／QFT兩階段方法成本更低。單用TST方法比單用QFT方法檢測(cè)成本高48.6%。對(duì)所有接觸者進(jìn)行TST／IGRAs兩階段篩查策略是成本最低的。陳群飛等［20］的IGRAs篩查LTBI的成本－效果分析研究顯示，T－SPOT試驗(yàn)總成本最高，TST試驗(yàn)次之，TST和T－SPOT聯(lián)用總成本最低；預(yù)防1例活動(dòng)性結(jié)核，TST與T－SPOT聯(lián)用所致的增量成本最小，T－SPOT試驗(yàn)次之，TST試驗(yàn)最高；患病率、TST試驗(yàn)效果指標(biāo)會(huì)影響成本－效果，但聯(lián)用成本－效果始終最高。Oxlade等［21］的一項(xiàng)在高收入國家的γ干擾素釋放試驗(yàn)與結(jié)核病篩查成本－效益分析研究指出，只有在結(jié)核病高危人群中，以TST或QFT篩查LTBI是符合成本－效益原則的，TST陽性者在進(jìn)行QFT篩查是最符合成本－效益原則的。同時(shí)Diel等［22］指出為減少結(jié)核病疾病負(fù)擔(dān)，在進(jìn)行LTBI治療前使用QFT－IT，尤其是在TST篩查密切接觸者中結(jié)果大于5mm人群中采用QFT－IT檢測(cè)方法最符合成本－效益原則。我國屬于結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家，結(jié)核感染人群基數(shù)大，上述的篩查LTBI的成本和成本－效益研究帶來了一些啟示，建議在TST陽性人群中選用IGRAs方法作為輔助診斷方法，可以預(yù)防結(jié)核病的發(fā)生，從而減少結(jié)核病的疾病負(fù)擔(dān)。

四、IGRAs在不同人群中的應(yīng)用

與TST檢測(cè)方法相比，IGRAs有眾多的優(yōu)點(diǎn)：試驗(yàn)操作簡單，不需受試者回訪，在BCG免疫人群中其特異度明顯高于TST等。目前，國內(nèi)外已開展了IGRAs在成年人、兒童、HIV感染者及免疫抑制等人群中應(yīng)用的相關(guān)研究，如何在不同年齡、HIV感染者及免疫抑制人群中選擇準(zhǔn)確合適的診斷LTBI的檢測(cè)方法。

（一）IGRAs在不同年齡中的應(yīng)用

已有研究證實(shí)IGRAs在成人LTBI診斷中的價(jià)值。日本相關(guān)指南建議：對(duì)于18～49歲人群，QFT的診斷價(jià)值比TST高；而在大于50歲人群中，QFT的應(yīng)用有所限制［23］。但是，由于兒童受年齡、病原學(xué)確診率低，免疫系統(tǒng)還未完全形成、近期接種BCG等多種因素影響，在兒童中診斷LTBI尤為困難。時(shí)春虎等［24］進(jìn)行的一項(xiàng)關(guān)于IGRAs診斷兒童LTBI的Meta分析研究表明，10篇文獻(xiàn)報(bào)道了QFT對(duì)兒童LTBI的診斷價(jià)值，匯總敏感度和特異度分別為40%和87%；4篇文獻(xiàn)報(bào)道了T－SPOT對(duì)兒童LTBI的診斷價(jià)值，匯總敏感度和特異度分別為74%和84%；研究指出，IGRAs適用于進(jìn)一步鑒別診斷兒童是否處于LTBI，不適合兒童LTBI的篩查。有些研究者建議IGRAs用于篩查5歲以上兒童及接種BCG兒童的LTBI診斷，不建議用于5歲以下兒童的LTBI診斷［23，25］。孫琳等［26］在兒童中進(jìn)行研究結(jié)果表明，ELISPOT試驗(yàn)適宜作為兒童TST試驗(yàn)初篩后LTBI診斷的重要輔助檢查。由于兒童一旦患上結(jié)核病，后果非常嚴(yán)重，死亡率高，嚴(yán)重威脅兒童的生命健康。盡管IGRAs在診斷兒童結(jié)核病方面有一定的優(yōu)勢(shì)，但是仍需要開展大量研究來確定其在兒童LTBI診斷中的臨界值和敏感度。

（二）IGRAs在HIV感染者和免疫抑制人群中的應(yīng)用

對(duì)于諸如合并HIV感染、重癥疾病者等免疫抑制人群，TST檢測(cè)方法缺乏足夠的敏感度［27－29］。許多研究已證實(shí)IGRAs在HIV感染者及免疫抑制人群中的應(yīng)用價(jià)值，Jones等［30］的一項(xiàng)研究表明，在HIV人群中QFT－IT結(jié)果同TST相比與LTBI危險(xiǎn)因素相關(guān)的可能性更大，QFT－IT試驗(yàn)在HIV感染人群中可能較TST試驗(yàn)更有價(jià)值。康振等［31］的一項(xiàng)關(guān)于IGRAs診斷艾滋病患者LTBI的Meta分析結(jié)果表明，QFT－G的總敏感度和特異度分別為44%和91%，T－SPOT總敏感度和特異度分別為82%和75%，IGRAs適合用于進(jìn)一步的鑒別診斷艾滋病患者是否處于潛伏感染，不適合結(jié)核感染的篩查。Hoffmann等［32］在血液透析患者中評(píng)價(jià)IGRAs的LTBI診斷研究顯示，在血液透析患者中，QFT－IT是一種有效的替代TST診斷LTBI方法。HIV感染者屬結(jié)核病高風(fēng)險(xiǎn)人群，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和診斷結(jié)核病高風(fēng)險(xiǎn)人群的LTBI，是控制結(jié)核病在人群中傳播的至關(guān)重要環(huán)節(jié)，因此，有必要進(jìn)一步在HIV感染者及免疫抑制人群中開展IGRAs在LTBI診斷中準(zhǔn)確性的相關(guān)研究。

小 結(jié)

總之，我國是一個(gè)結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家，在BCG接種率比較高的環(huán)境下，用TST試驗(yàn)診斷LTBI容易產(chǎn)生假陽性結(jié)果。目前，大量研究已表明IGRAs對(duì)BCG免疫和NTM人群的LTBI診斷比TST更具優(yōu)勢(shì)，在此人群中IGRAs可替代TST診斷LTBI。盡管IGRAs目前還不能完全取代TST，但是IGRAs在條件允許地區(qū)可作為一項(xiàng)重要的診斷LTBI工具?，F(xiàn)階段，有必要進(jìn)一步在結(jié)核病高發(fā)地區(qū)和高風(fēng)險(xiǎn)人群中評(píng)價(jià)IGRAs的應(yīng)用，從而更加及時(shí)準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)和診斷LTBI和活動(dòng)性肺結(jié)核，這對(duì)控制Mtb感染具有十分重要的意義。

［1］Dye C，Scheele S，Dolin P，et al.Consensus statement.Global burden of tuberculosis：estimated incidence，prevalence and mortality by country.WHO Golbal Surveillance and Monitoring Project.JAMA，1999，287：677－686.

［2］全國結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查技術(shù)指導(dǎo)組，全國結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查辦公室.2000年全國結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查報(bào)告.中國防癆雜志，2002，24（2）：65－108.

［3］王宇.全國第五次結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查資料匯編.北京：軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社，2011：1－6.

［4］Sterling TR，Bethel J，Goldberg S，et al.The scope and impact of treatment of latent tuberculosis infection in the United States and Canada.Am J Respir Crit Care Med，2006，173（8）：927－931.

［5］謝莉，馬嶼，高微微，等.抗原刺激后外周血單個(gè)核細(xì)胞γ干擾素釋放反應(yīng)在結(jié)核分枝桿菌感染和結(jié)核病診斷中的意義.中華結(jié)核和呼吸雜志，2005，28（8）：545－549.

［6］Diel R，Goletti D，F(xiàn)errara G，et al.Interferon－γrelease assays for the diagnosis of latent Mycobacterium tuberculosis infection：a systematic review and meta－analysis.Eur Respir J，2011，37（1）：88－89.

［7］Food and Drug Administration.QuantiFERON?－TB－P010033［EB／OL］.［2012－06－20］.http：／／www.fda.gov／MedicalDevices／ProductsandMedicalProcedures／DeviceApprovalsand－Clearances／Recently－ApprovedDevices／ucm084025.htm.

［8］Mazurek GH，Jereb J，Lobue P，et al.Guidelines for using the QuantiFERON－TB Gold test for detecting Mycobacterium tuberculosis infection，United States.MMWR Recomm Rep，2005，54（RR－15）：49－55.

［9］Food and Drug Administration.QuantiFERON?－TB Gold In－Tube－P010033／S011［EB／OL］.［2012－06－20］.http：／／www.fda.gov／MedicalDevices／ProductsandMedicalProcedures／Device－ApprovalsandClearances／PMAApprovals／ucm106548.htm.

［10］Pai M，Zwerling A，Menzies D.Systematic review：T－cellbased assays for the diagnosis of latent tuberculosis infection：an update.Ann Intern Med，2008，149（3）：177－184.

［11］Higuchi K，Kawabe Y，Mitarai S，et al.Comparison of performance in two diagnostic methods for tuberculosis infection.Med Microbiol Immunol，2009，198（1）：33－37.

［12］Kampmann B，Whittaker E，Williams A，et al.Interferongamma release assays do not identify more children with active tuberculosis than the tuberculin skin test.Eur Respir J，2009，33（6）：1374－1382.

［13］Legesse M，Ameni G，Mamo G，et al.Performance of QuantiFERON－TB Gold In－Tube（QFTGIT）for the diagnosis of Mycobacterium tuberculosis （Mtb）infection in Afar Pastoralists，Ethiopia.BMC Infect Dis，2010，10：354.

［14］Soysal A，Torun T，Efe S，et al.Evaluation of cut－off values of interferon－gamma－based assays in the diagnosis of M .tuberculosis infection.Int J Tuberc Lung Dis，2008，12（1）：50－56.

［15］Mori T，Sakatani M，Yamagishi F，et al.Specific detection of tuberculosis infection：an interferon－gamma－based assay using new antigens.Am J Respir Crit Care Med，2004，170（1）：59－64.

［16］Lee JY，Choi HJ，Park IN，et al.Comparison of two commercial interferon－gamma assays for diagnosing Mycobacterium tuberculosis infection.Eur Respir J，2006，28（1）：24－30.

［17］Kanunfre KA，Leite OH，Lopes MI，et al.Enhancement of diagnostic efficiency by agamma interferon release assay for pulmonary tuberculosis.Clin Vaccine Immunol，2008，15（6）：1028－1030.

［18］Nienhaus A，Schablon A，Costa JT，et al.Systematic review of cost and cost－effectiveness of different TB－screening strategies.BMC Health Serv Res，2011，11（1）：247.

［19］Diel R，Nienhaus A，Lange C，et al.Cost－optimisation of screening for latent tuberculosis in close contacts.Eur Respir J，2006，28（1）：35－44.

［20］陳群飛，王莉，李幼平，等.γ－干擾素釋放試驗(yàn)篩查潛伏性結(jié)核患者的成本效果分析.中國循證醫(yī)學(xué)雜志，2011，11（7）：768－774.

［21］Oxlade O，Schwartzman K，Menzies D.Interferon－gamma release assays and TB screening in high－income countries：a costeffectiveness analysis.Int J Tuberc Lung Dis，2007，11（1）：16－26.

［22］Diel R，Nienhaus A，Loddenkemper R.Cost－effectiveness of interferon－γrelease assay screening for latent tuberculosis infection treatment in Germany. Chest，2007，131 （5）：1424－1434.

［23］The 81st annual meeting of the Japanese Society for Tuberculosis.Sendai，Japan.April 26－28，2006.Program and Abstracts.Kekkaku，2006，81（3）：105－319.

［24］時(shí)春虎，康振，楊克虎，等.γ－干擾素釋放試驗(yàn)診斷兒童潛伏結(jié)核菌感染的 Meta分析.中國循證兒科雜志，2010，7（4）：263－270.

［25］Newton SM，Brent AJ，Anderson S，et al.Paediatric tuberculosis.Lancet Infect Dis，2008，8（8）：498－510.

［26］孫琳，焦偉偉，趙順英，等.ELISPOT檢測(cè)技術(shù)在兒童結(jié)核病診斷中的應(yīng)用.標(biāo)記免疫分析與臨床，2008，15（6）：349－353.

［27］Ariga H，Harada N.Evolution of IGRA researches.Kekkaku，2008，83（9）：641－652.

［28］Madariaga MG，Jalali Z，Swindells S.Clinical utility of interferon gamma assay in the diagnosis of tuberculosis.J Am Board Fam Med，2007，20（6）：540－547.

［29］Moreno S，Blázquez R，Novoa A，et al.The effect of BCG vaccination on tuberculin reactivity and the booster effect among hospital employees.Arch Intern Med，2001，161（14）：1760－1765.

［30］Jones S，de Gijsel D，Wallach FR，et al.Utility of QuantiFERON－TB Gold in－tube testing for latent TB infection in HIV－infected individuals.Int J Tuberc Lung Dis，2007，11（11）：1190－1195.

［31］康振，時(shí)春虎，田金徽，等.γ干擾素釋放試驗(yàn)診斷艾滋病患者潛伏結(jié)核感染的 Meta分析.循證醫(yī)學(xué)，2010，10（6）：359－363.

［32］Hoffmann M，Tsinalis D，Vernazza P，et al.Assessment of an interferon－gamma release assay for the diagnosis of latent tuberculosis infection in haemodialysis patient.Swiss Med Wkly，2010，140（19／20）：286－292.

2012－06－20）

（本文編輯：范永德）

重大傳染病防治項(xiàng)目“結(jié)核病感染控制新技術(shù)平臺(tái)的研究”（2009ZX10004－714）；中美新發(fā)與再發(fā)傳染病合作項(xiàng)目（子項(xiàng)目16）

何廣學(xué)，Email：heguangxue＠chinatb.org

注：熊勇超與侯月云并列第一作者