在PRRSV非結(jié)構(gòu)蛋白2（nsp2）的非必需區(qū)插入的標記疫苗的外源基因穩(wěn)定表達

豬繁殖與呼吸綜合征病毒 (PRRSV)非結(jié)構(gòu)蛋白2(nsp2)在PRRSV各株顯示高度的多樣性和可變性，nsp2區(qū)域中間的一些序列對于病毒的復制不是必要的。最近的研究試圖在nsp2的不重要的區(qū)域插入外源基因，然而插入外源基因在體外不能被重組病毒穩(wěn)定表達。

本研究在減毒疫苗毒株HuN4-F112（疫苗株HuN4-F112是高致病性PRRSV HuN4株的減毒株）的nsp2區(qū)域刪除75個核苷酸 （25個氨基酸），然后插入一個編碼新城疫病毒（NDV）核蛋白 （NP）的B細胞優(yōu)勢表位基因 （49個氨基酸），構(gòu)建了一個感染性的cDNA克隆。

全長cDNA感染性克隆在體外感染細胞，拯救出重組病毒 （rHuN4-F112-Δ508-532），刪除 75核苷酸和插入 NDV NP基因并沒有影響病毒的復制。它們和改造前的病毒具有相似的生長動力學特點。

重組病毒在細胞上傳20多代，通過免疫熒光分析 (IFA)和染色體基因組測序，可知插入的基因穩(wěn)定表達。

為了評價重組病毒作為疫苗的免疫效果，我們給仔豬免疫重組病毒并且用致死劑量的高致病性PRRSV攻毒。免疫仔豬產(chǎn)生抗NDV NP和PRRSV的特異性抗體，沒有產(chǎn)生對抗刪除nsp2 25aa的抗體。攻毒后，所有的免疫仔豬沒有出現(xiàn)臨床癥狀或死亡，而對照組的豬只在攻毒后10天全部死亡。

這個試驗的結(jié)果顯示重組PRRSV可作為標記的備選疫苗。

譯自：Xu YZ，Zhou YJ，Zhang SR，et al.Stable expression of foreign gene in nonessential region of nonstructural protein 2 (nsp2) of porcine reproductive and respiratory syndrome virus：Applications for marker vaccine design.Vet Microbiol，2012 Mar 30.[Epub ahead of print]

胸膜肺炎急性發(fā)作時放線桿菌的轉(zhuǎn)錄概況

細菌在其自然宿主內(nèi)的基因表達譜可以洞察宿主-病原體相互作用和細菌感染的分子決定因素。本研究檢測了胸膜肺炎急性發(fā)作時豬胸膜肺炎放線桿菌的轉(zhuǎn)錄概況。

我們對比分析了25只患病豬肺臟損傷組織分離的胸膜肺炎放線桿菌的轉(zhuǎn)錄概況 （樣品在攻毒后6、12、24小時采樣）。攻毒6個小時內(nèi)，可在豬的肺臟觀察到局灶性纖維蛋白出血性病變，這表明胸膜肺炎放線桿菌已設(shè)法在宿主體內(nèi)成功地安頓下來。

我們識別了237個不同的調(diào)控基因，這些基因編碼的蛋白與細菌在宿主體內(nèi)寄生和生存有關(guān)。這些蛋白質(zhì)由許多主導不同方面能量代謝的基因控制，特別是厭氧呼吸及碳水化合物的代謝。顯示早期感染時，細菌外膜和蛋白質(zhì)翻譯后加工的改變也是重要的。結(jié)果表明，胸膜肺炎放線桿菌利用各種戰(zhàn)略增加其適應性，如應用鈉泵作為一種替代方法獲得能量。此外，轉(zhuǎn)錄數(shù)據(jù)提供了胸膜肺炎放線桿菌逃避宿主諸多免疫因素和在惡劣環(huán)境中 （在宿主巨噬細胞內(nèi)）生存的潛在線索。它能在巨噬細胞內(nèi)生存可能與脲酶活性，動員各種應激反應相關(guān)，細胞表面的唾液酸使其逃避宿主的防御系統(tǒng)。

這些數(shù)據(jù)強調(diào)了胸膜肺炎放線桿菌隨著宿主狀態(tài)進行代謝調(diào)整的重要性，幫助人們深入了解胸膜肺炎放線桿菌高效入侵和在急性發(fā)病時定植和留存的機理。

譯自：Klitgaard K，F(xiàn)riis C，Jensen TK，et al.Transcriptional Portrait of Actinobacillus pleuropneumoniae during Acute Disease-Potential Strategies for Survival and Persistence in the Host.PLoS One，2012 Apr 17.[Epub ahead of print]

明確人和豬的鞭蟲基因的特殊性

鞭蟲 （毛首線蟲）能導致世界范圍內(nèi)約600百萬人得病，大多在發(fā)展中國家。鞭蟲也感染其他動物，包括豬 (T.suis)，狗 (T.vulpis)和非人靈長類動物，使被感染動物和人患相似的鞭蟲病。雖然鞭蟲物種一直被認為是具有宿主特異性的，但這一觀點具有相當大的爭議，多年來，T.trichiura和T.suis是否屬同一種是有爭議的。

這里，我們將人源和豬源鞭蟲整個線粒體基因組進行對比，通過系統(tǒng)發(fā)生分析，驗證了這一假說——人和豬的鞭蟲是不同種的。這一結(jié)果與先前比較核糖體DNA得出的結(jié)論一致。

未來將進行大規(guī)模的研究工作證實T.trichiura在豬及T.suis在人中是否存在。

譯自：Liu GH，Gasser RB，Su A，et al.Clear Genetic Distinctiveness between Human-and Pig-Derived Trichuris Based on Analyses of Mitochondrial Datasets.PLoS Negl Trop Dis.2012 Feb 21.[Epub ahead of print]

不同歐洲國家戊型肝炎病毒在家豬中的流行和傳播

戊型肝炎病毒 （HEV）基因型3和4型能導致人的肝病，并且以豬為主要的儲存器。世界范圍內(nèi)對豬HEV的研究很多，但是缺乏關(guān)于豬群中HEV感染動力學方面的資料。

在六個不同的歐洲國家研究商品豬養(yǎng)殖場HEV傳播動力學。收集的數(shù)據(jù)顯示HEV在斷奶仔豬流行率在8%～30%。HEV在架子豬流行率在20%～44%之間。育肥豬的流行率在8%～73%之間。母豬流行率在所有這六個歐洲國家相似。只在西班牙和捷克共和國的被檢公豬糞中便檢測到HEV，流行率分別為4.3%和3.5%。

所收集的數(shù)據(jù)使用最近開發(fā)的模型進行了分析，估計不同國家的HEV傳播動力學，證明戊型肝炎在豬場流行。

這個研究中所有的樣品運用相同的檢測方法 （實時RTPCR），運用相同的模型 （SIR模型）進行數(shù)據(jù)分析。本研究描述了歐洲國家戊型肝炎病毒的流行和畜群間傳播動力學（捷克共和國、意大利、葡萄牙、西班牙、荷蘭和英國），證實在豬場HEV從斷奶仔豬到育肥豬的循環(huán)傳播。繁殖數(shù)的數(shù)學定義為R0，所有被研究的歐洲國家R0在同一范圍。

譯自：Berto A，Baker JA，Mesquita JR，et al.Prevalence and transmission of hepatitis E virus in domestic swine populations in different European countries.BMC Res Notes，2012 Apr 25.[Epub ahead of print]

菲律賓豬埃博拉萊斯頓病毒血清流行病學調(diào)查

埃博拉病毒在非洲流行，可導致人和非人靈長類動物病毒性出血熱。埃博拉萊斯頓病毒 (REBOV)已引起一些獼猴發(fā)病，但未發(fā)現(xiàn)其與人類患病有關(guān)聯(lián)。2008年年底，在菲律賓人們首次在豬體內(nèi)發(fā)現(xiàn)REBOV。

2008年，在菲律賓邦阿西楠省和布拉干省REBOV流行的豬場共采集215份豬血清。運用多個血清診斷系統(tǒng)檢測這些樣品中REBOV的特異性抗體。在非流行地區(qū)——打拉共采集了98份豬血清。通過檢測這些樣品，調(diào)查REBOV是否在菲律賓的豬群中普遍存在。通過檢測發(fā)現(xiàn)感染豬場中70%的豬血清為REBOV抗體陽性，而在檢測打拉采集的血清樣品中未發(fā)現(xiàn)陽性。2008年感染豬場的REBOV高流行率顯示豬是REBOV的易感動物。本研究中運用的多種血清學檢測在未來可用于監(jiān)測菲律賓豬群中的REBOV感染。

譯自：Sayama Y，Demetria C，Saito M，et al.A seroepidemiologic study of Reston ebolavirus in swine in the Philippines.BMC Vet Res，2012 Jun 18.[Epub ahead of print]

益生菌發(fā)酵的高濕玉米日糧對斷奶仔豬生長性能和腸道微生物的影響

本文研究了用嗜酸乳桿菌和乳酸片球菌發(fā)酵的高濕玉米對斷奶仔豬生長性能和腸道微生物的影響。

270頭剛斷奶的仔豬 （公母各半）以體重和窩為區(qū)組，按照隨機區(qū)組設(shè)計分成3個組 （每個處理5個圈，每圈18頭豬），分別飼喂3種日糧：沒有接種任何微生物的發(fā)酵高濕玉米 （對照組）；接種嗜酸乳桿菌發(fā)酵的高濕玉米 （LA組）；接種乳酸片球菌發(fā)酵的高濕玉米 （PA組）。豬飼喂液體日糧5周。用嗜酸乳桿菌和乳酸片球菌的特異性引物進行定量PCR分析，發(fā)現(xiàn)用這兩種菌發(fā)酵的高濕玉米中富含這兩種菌。乳酸是發(fā)酵過程中產(chǎn)生的主要短鏈脂肪酸 （SCFA）。3種發(fā)酵的高濕玉米中乳酸片球菌發(fā)酵組乳酸的濃度最高。5周的飼養(yǎng)試驗結(jié)果顯示，3種日糧對豬的生長性能無影響。但在試驗的最后3周，與PA組相比，LA組豬的增重較高，糞便中的大腸桿菌的數(shù)量較少 （P＜0.05）。對結(jié)腸細菌區(qū)系進行PCR和DDGE分析發(fā)現(xiàn)3個細菌群，而PA組豬只有1個細菌群。另外，LA組和PA組結(jié)腸的細菌多樣性和豐度降低 （P＜0.05）。無論飼喂何種日糧嗜酸乳桿菌和乳酸片球菌都很難在豬的腸道定植。這些結(jié)果說明飼喂益生菌發(fā)酵的高濕玉米可以調(diào)節(jié)豬的腸道微生物菌群，嗜酸乳桿菌發(fā)酵的高濕玉米具有影響豬的生長性能的潛力。

譯自：Wang JQ，Yin FG，Zhu C，et al.Evaluation of probiotic bacteria for their effects on the growth performance and intestinal microbiota of newly-weaned pigs fed fermented highmoisture maize.Livestock Science， 2012， 145(1–3) ：79-86.

釀酒酵母菌對赫曲毒素A和玉米赤霉烯酮的吸收及其與細胞壁厚度的關(guān)系

為了研究釀酒酵母菌對赫曲毒素A和玉米赤霉烯酮清除能力及其脫毒能力與菌的細胞壁厚度的關(guān)系，研究了釀酒酵母菌在不同毒素濃度對真菌毒素的結(jié)合能力以及胃腸道環(huán)境對其結(jié)合能力的影響。

本研究所用的釀酒酵母菌株均具有清除赫曲毒素A和玉米赤霉烯酮的能力。RC012和RC016菌株對赫曲毒素A的清除率最高，RC009和RC012對玉米赤霉烯酮的清除率最高。用透射電子顯微鏡對酵母的細胞壁進行了超微結(jié)構(gòu)分析，發(fā)現(xiàn)酵母的細胞直徑或細胞壁厚度影響其對真菌毒素的清除能力。胃腸道環(huán)境中酵母菌與真菌毒素的結(jié)合能力增強。

以上結(jié)果說明，本研究所檢測的釀酒酵母菌株均能清除赫曲毒素A和玉米赤霉烯酮，其清除作用的原理是物理吸附，胃腸道環(huán)境可增強其吸附能力。

譯自：Armando MR，Pizzolitto RP，Dogi CA，et al.Adsorption of ochratoxin A and zearalenone by potential probiotic Saccharomyces cerevisiae strains and its relation with cell wall thickness.Journal of Applied Microbiology,2012,accepted.