曹秀梅

(河北承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，河北 承德 067000)

甘草是最常用的大宗藥材，年需求量巨大。連續(xù)多年的掠奪性采挖使我國野生甘草資源日趨枯竭，生態(tài)環(huán)境嚴(yán)重惡化［1－3］，實(shí)現(xiàn)甘草資源可持續(xù)利用根本有效措施就是人工栽培甘草代替野生甘草［4］。人工栽培的方法多以野生甘草種子進(jìn)行栽培，可能存在因種子質(zhì)量良莠不齊，影響人工甘草的質(zhì)量［5］。因此，選育優(yōu)良品種甘草是提高人工甘草質(zhì)量和延續(xù)甘草資源的可持續(xù)性發(fā)展的重要保證，最為快速有效的選育途徑是以現(xiàn)有野生種群或人工栽培混雜群體為對象，從中篩選藥材質(zhì)量優(yōu)良的變異品種［6］。本研究以甘草為材料，進(jìn)行甘草種內(nèi)的變異類型劃分以及藥材產(chǎn)量和藥材質(zhì)量的評價研究，以期為甘草優(yōu)良品種選育方法提供借鑒。

1 材料與方法

1．1 材料

選擇種源相同，生長年限一致，栽培管理?xiàng)l件相同的甘草栽培試驗(yàn)地塊。參照王文全提出的甘草變異類型劃分指標(biāo)體系，參數(shù)指標(biāo)包括莖皮顏色、莖皮被覆物特性、葉片形狀、葉片邊緣形態(tài)特征、葉片大小，根據(jù)5種不同參數(shù)選取研究的甘草變異個體，納入研究的甘草樣本包括不同莖皮顏色12株(莖全部紅色4株、莖基部紅色4株、莖綠色4株)，不同莖皮被覆物性狀8株(無刺毛各4株、刺毛4株)，不同葉片性狀11株(圓葉4株、狹長葉4株、闊葉3株)，不同葉片邊緣形狀8株(波狀皺褶4株、平整4株)。

1．2 方法

1．2．1 測定指標(biāo)內(nèi)容

對樣品地上植株形態(tài)特征指標(biāo)、植株地下部分形態(tài)特征指標(biāo)、甘草藥材質(zhì)量指標(biāo)和甘草藥材產(chǎn)量指標(biāo)進(jìn)行量化測定，具體指標(biāo)名稱參考文獻(xiàn)相關(guān)指標(biāo)［7］。

1．2．2 測定指標(biāo)的量化方法

高長寬指標(biāo)測定及量化方法:采用直尺測量頂葉長、頂葉寬、小葉長、小葉寬、復(fù)葉長、側(cè)枝長、株高等指標(biāo)。

粗度指標(biāo)測定及量化方法:地徑和蘆頭直徑采用游標(biāo)卡尺測量。

顏色指標(biāo)測定及量化方法:所有顏色均以RGB為指標(biāo)進(jìn)行測量，莖皮、葉片及其他被覆物顏色依照制作的比色卡，在試驗(yàn)基地進(jìn)行比色，以確定RGB值;根皮及根心材顏色依照數(shù)碼相片以Photoshop進(jìn)行顏色分析，獲取相應(yīng)的RGB值。

莖表刺毛密度測定及量化方法:采集部分莖段，通過測定莖段的直徑和長度，計(jì)算得到其表面積，另外利用解剖鏡計(jì)數(shù)刺毛數(shù)量，而后計(jì)算得到刺毛密度。

產(chǎn)量指標(biāo)的測定方法:以條草干重和甘草酸絕對含量做為產(chǎn)量指標(biāo)。條草干重為地下部分去掉橫生莖、細(xì)小須根的主根重量，即與一般的甘草商品藥材規(guī)格相似;甘草酸絕對含量為單株甘草條草所產(chǎn)的全部甘草酸。

質(zhì)量指標(biāo)測定方法:以蘆頭直徑和甘草酸相對含量做為質(zhì)量指標(biāo)。蘆頭直徑以游標(biāo)卡尺進(jìn)行測量;甘草酸相對含量以HPLC法測定。

1．2．3 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS10．0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行不同樣本甘草各參數(shù)的聚類分析和方差分析。

2 結(jié)果

2．1 甘草變異類型劃分

以所有的形態(tài)指標(biāo)的量化測量結(jié)果、甘草酸相對含量、甘草酸絕對含量等共計(jì)40項(xiàng)指標(biāo)為聚類參數(shù)，進(jìn)行聚類分析及單因素方差分析，結(jié)果見圖1、表1，蘆頭直徑、條草干重、甘草酸相對含量是甘草的質(zhì)量指標(biāo)和產(chǎn)量指標(biāo)均有顯著差異，且不同類間差異最為顯著，共10項(xiàng)指標(biāo)差異顯著，因此，初步判斷甘草具有7個變異類型。

圖1 39個甘草變異個體的聚類結(jié)果

表1 不同聚類結(jié)果類別間甘草形態(tài)特征、藥材產(chǎn)量及質(zhì)量差異顯著性分析

2．2 甘草變異類型的形態(tài)特征與命名

根據(jù)差異顯著的形態(tài)特征莖皮顏色、根皮顏色、莖表刺毛密度對7個變異類型進(jìn)行命名，可分為綠莖褐色根密度毛、綠莖棕色根稀刺毛、綠莖褐色根中刺毛、紅莖棕色根中刺毛、紅莖褐色根密刺毛、紅莖磚紅色根中刺毛、紅莖褐色根稀刺毛類型7個類型。

2．3 不同甘草變異類型的藥材產(chǎn)量與質(zhì)量比較

不同甘草變異類型的甘草酸絕對含量、相對含量、蘆頭直徑、條草干重重測定結(jié)果見表2。由表2可知，1)綠莖棕色根稀刺毛類型的甘草酸絕對含量和條草干重均為最高，綠莖棕色根稀刺毛類型為潛在的高產(chǎn)變異類型。2)綠莖棕色根稀刺毛類型的甘草酸相對含量和蘆頭直徑均為最高，所以綠莖棕色根稀刺毛類型為潛在的優(yōu)質(zhì)變異類型。由此可知，莖棕色根稀刺毛類型的產(chǎn)量、質(zhì)量均為最高。

表2 各變異類型的藥材產(chǎn)量與質(zhì)量評價

3 討論

在測量38項(xiàng)形態(tài)特征指標(biāo)中，有7項(xiàng)差異達(dá)到極顯著水平(P＜0.01或P＜0.05)，9項(xiàng)差異達(dá)到極顯著水平(P＜0.1);測定的4項(xiàng)藥材質(zhì)量、產(chǎn)量指標(biāo)中，有3項(xiàng)差異達(dá)到極顯著水平(P＜0.01)，1項(xiàng)差異達(dá)到顯著水平(P＜0.05)。由此證明，變異確實(shí)存在，可以劃分類型。根據(jù)差異顯著的形態(tài)特征莖皮顏色、根皮顏色、莖表刺毛密度可分為7個變異類型，分別為綠莖褐色根密度毛、綠莖棕色根稀刺毛、綠莖褐色根中刺毛、紅莖棕色根中刺毛、紅莖褐色根密刺毛、紅莖磚紅色根中刺毛、紅莖褐色根稀刺毛類型，其中綠莖棕色根稀刺毛類型的4項(xiàng)指標(biāo)均為最高，是潛在的優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)變異類型。

［1］魏勝利，王文全．我國中西部地區(qū)甘草資源及其可持續(xù)利用的研究［J］．中國中藥雜志，2003．28(3):202 －206．

［2］李成義，馬艷茹，魏學(xué)明，等．甘肅道地藥材甘草商品質(zhì)量研究［J］．西部中醫(yī)藥，2012，25(3):6 －8．

［3］李成義，馬艷茹，魏學(xué)明，等．甘肅道地藥材甘草的資源狀況分析［J］．西部中醫(yī)藥，2011，24(7):8 －10．

［4］王文全，吳慶豐．我國的甘草資源與甘草栽培技術(shù)［J］．中藥研究與信息，2001，3(12):18 －20．

［5］陳秀華，魏勝利．種質(zhì)資源與中藥材質(zhì)量［J］．中藥研究與信息，2003，5(4):11 －14．

［6］王敬民．中藥現(xiàn)代化與藥用植物優(yōu)良品種選育［J］．中藥研究與信息，2000，2(12):14 －15．

［7］楊全，魏勝利，王文全．甘草群體形態(tài)變異類型研究［J］．亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2009，5(2):34－36．