馬 萍 聶慶東 殷 敏

1.清華大學(xué)醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京100084；2.清華大學(xué)玉泉醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京100049

淋病是目前較流行的性傳播疾病（sexually transmitted disease，STD）之一，約占全球STD 病例的3/4，在我國亦呈逐步蔓延之勢，嚴(yán)重威脅人群健康[1-2]。淋病奈瑟菌（neisseria gonorrhoeae，NG）是淋病的病原體。目前實(shí)驗(yàn)室對淋病檢測方法多種多樣，筆者對來自臨床100 例可疑標(biāo)本分別進(jìn)行分泌物培養(yǎng)法、分泌物直接涂片法、尿液淋球菌快速檢測，分析各自的陽性率及臨床實(shí)用性，以期為基層醫(yī)院臨床提供準(zhǔn)確可靠的診斷依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 資料來源

選取筆者所在醫(yī)院2008 年3 月～2011 年11 月收治的臨床100 例疑似淋球菌感染患者，均有尿頻、尿急、尿痛、有膿性分泌物溢出等癥狀。均在未使用任何藥物前或停藥3 d 后采集2 份分泌物標(biāo)本、1 份尿液標(biāo)本進(jìn)行檢測。

1.2 試劑

1.2.1 分泌物培養(yǎng)法 巧克力平板培養(yǎng)基購自天津市金章科技發(fā)展有限公司。

1.2.2 分泌物直接涂片法 選用購自珠海貝索生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的快速革蘭染色液。

1.2.3 尿液淋球菌快速檢測 選用鄭州安圖綠科生物工程有限公司生產(chǎn)的淋球菌檢測試劑盒。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本采集 由門診醫(yī)生進(jìn)行分泌物標(biāo)本采集，以一次性拭子采集男性患者尿道內(nèi)2 ～4 cm 處膿性分泌物、女性患者宮頸口內(nèi)側(cè)0.5 ～1.0 cm 處分泌物黏液，取2 份標(biāo)本分別均勻涂片采用革蘭染色后（染色過程詳見試劑說明書）鏡檢，鏡檢找到白細(xì)胞內(nèi)有腎形革蘭陰性雙球菌者為陽性。另1 份標(biāo)本置于無菌試管內(nèi)，保溫及時(shí)送檢，接種于巧克力平板，在5%CO2環(huán)境下培養(yǎng)24 ～48 h，根據(jù)菌落形態(tài)用氧化酶進(jìn)行鑒定，并且涂片鏡檢為革蘭陰性雙球菌者為陽性。

1.3.2 標(biāo)本檢測 用一次性尿杯采集初段尿標(biāo)本，1 h 內(nèi)檢測完畢。取2 mL 標(biāo)本加入反應(yīng)試管內(nèi)，垂直滴加3 滴試劑，塞緊管塞，輕輕搖勻。放置5 min 后（輕度患者可延至10 min），再輕輕搖勻1 次（若已產(chǎn)生氣泡不必再搖），觀察反應(yīng)管內(nèi)尿液上部氣泡形成情況，20 min 后結(jié)果無效。若液面上部形成一層白氣泡或液面上層管壁形成一圈細(xì)小的白氣泡者判讀為陽性。

2 結(jié)果

100 例可疑標(biāo)本中，分泌物培養(yǎng)陽性結(jié)果35 例、陽性率35%；分泌物直接涂片法找到革蘭陰性雙球菌（細(xì)胞內(nèi)）39例、陽性率39%；尿液淋病快速檢測陽性結(jié)果44 例、陽性率44%。培養(yǎng)法一直被世界衛(wèi)生組織推薦為用于診斷NG 感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”[3]，用直接涂片法、尿液淋球菌快速檢測法與培養(yǎng)法進(jìn)行比較，得出直接涂片法、尿液淋球菌快速檢測法與培養(yǎng)法的符合率分別是96%、91%。見表1。

表1 直接涂片法、尿液淋球菌快速檢測法與培養(yǎng)法檢測結(jié)果比較（n）

3 討論

淋病是我國目前最常見的性傳播疾病之一。臨床主要表現(xiàn)為尿頻、尿急、尿痛。男性尿道口可見膿性分泌物，引起尿道炎；女性可表現(xiàn)為陰道分泌物增多，宮頸可見膿性分泌物，引起陰道炎、盆腔炎等。慢性感染者還可導(dǎo)致不育[4]。因此快速確診是治療和預(yù)防淋病的關(guān)鍵。筆者通過對臨床100 例可疑標(biāo)本分別進(jìn)行分泌物培養(yǎng)法、分泌物直接涂片法、尿液淋球菌快速檢測。結(jié)果顯示，培養(yǎng)法陽性率為35%，與國內(nèi)同期其他文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果[5-7]陽性率不是很一致，這可能與受檢人群及患者男女比例有關(guān)。培養(yǎng)法的陽性率并不是很高，這可能是因?yàn)镹G 是一種需要復(fù)雜營養(yǎng)的脆弱細(xì)菌，不耐受干燥和低溫，要在5%CO2且濕潤的環(huán)境下才有可能生長。而且需要盡快接種標(biāo)本，床旁接種最好，但臨床往往達(dá)不到這種要求。所以致使培養(yǎng)的陽性率并不是很高，尤其是女性患者易受很多雜菌的干擾，影響NG 的生長。涂片法的陽性率為39%，快速檢測的陽性率為44%，以培養(yǎng)法為參考方法與之相比較，該兩種方法陽性率均高于培養(yǎng)法，這可能與培養(yǎng)法條件要求比較高，有可能有陽性標(biāo)本在留取到接種過程中沒有存活有關(guān)。但該兩種方法與培養(yǎng)法的符合率均高于90%。其中快速檢測法的陽性率最高，這可能是由于快速法的原理是基于淋球菌具有一種特異性酶反應(yīng)測定系統(tǒng)，當(dāng)標(biāo)本中含有此酶時(shí)，就會發(fā)生生化反應(yīng)同時(shí)產(chǎn)生氣泡。正常情況下尿或分泌物中的雜菌產(chǎn)生此酶的活性很低不足以產(chǎn)生陽性反應(yīng)。但當(dāng)雜菌數(shù)量大大增加時(shí)，就可引起假陽性反應(yīng)。同時(shí)血尿和嚴(yán)重蛋白尿時(shí)也可影響結(jié)果判斷。特別是女性標(biāo)本，分泌物增多時(shí)會干擾快速檢測產(chǎn)生假陽性。直接涂片法與培養(yǎng)法的符合率很高，比快速檢測的陽性率略低一些，除了快速法的假陽性反應(yīng)干擾外，也可能與分泌物的取材部位和留取方法有關(guān)。

本研究檢測的陽性涂片標(biāo)本按照操作規(guī)程規(guī)定報(bào)告的都是在細(xì)胞內(nèi)找到革蘭陰性雙球菌。而也有文獻(xiàn)報(bào)道[8]，未找到細(xì)胞內(nèi)革蘭陰性雙球菌，細(xì)胞外找到的標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)也有53%的標(biāo)本培養(yǎng)為陽性結(jié)果。因此當(dāng)僅有胞外找到革蘭陰性雙球菌并不能完全排除淋球菌感染的可能，應(yīng)高度考慮。革蘭染色后鏡檢和淋病快速檢測法與培養(yǎng)法的符合率均在90%以上，且相對于培養(yǎng)法更簡便、快速。但存在一定的假陽性率和假陰性率，因此對于沒有培養(yǎng)條件的基層醫(yī)院而言聯(lián)合檢測分泌物涂片法和尿液淋球菌快速檢測法，可以互相彌補(bǔ)，以供臨床綜合診斷，提高淋球菌檢測的準(zhǔn)確率。

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