劉 浩 張 龍 張宗山

（1 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)，農(nóng)業(yè)部害蟲生物防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193；2 寧夏農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所，寧夏植物病蟲害防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，寧夏銀川 750002）

枸杞蚜蟲（Aphissp.）屬同翅目蚜科，是枸杞結(jié)果期的主要害蟲。近年來(lái)，隨著寧夏枸杞產(chǎn)業(yè)的逐年發(fā)展，2010年種植面積已突破46 666.7 hm2，總產(chǎn)量占全國(guó)產(chǎn)量的50%（李東梅，2011），而生產(chǎn)中枸杞蚜蟲造成枸杞落蕾率穩(wěn)定在50 %以下，經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重（楊芳 等，2002）。在枸杞蚜蟲防治中，可采用的方法很多（陳濤，1995），其中化學(xué)藥劑（王金富 等，2010）使用面積最大、防效較好，但是會(huì)殺傷益蟲，造成害蟲產(chǎn)生抗藥性和農(nóng)藥殘留安全隱患；植物源農(nóng)藥（李鋒 等，2005；金陽(yáng) 等，2008；劉奎 等，2010；左玲霞 等，2010；陳學(xué)文，2011）制備成本高且防效不穩(wěn)定；捕食性昆蟲（關(guān)曉慶，2011）種群難以穩(wěn)定，造成防效不穩(wěn)定；使用蟲生真菌防治害蟲（劉彩玲和馮明光，1998；桂富榮 等，2005）作為方便易得、環(huán)境友好、無(wú)殘留的防治方法得到越來(lái)越多的研究和應(yīng)用。曾有蠟蚧輪枝菌（Verticillium lecanii）對(duì)麥無(wú)網(wǎng)長(zhǎng)管蚜、菜縊管蚜的室內(nèi)毒力測(cè)定報(bào)道（耿銳梅 等，2004；袁盛勇 等，2007），尚未見使用蠟蚧輪枝菌或其他蟲生真菌防治枸杞蚜蟲的相關(guān)報(bào)道，本試驗(yàn)參考前人室內(nèi)毒力測(cè)定常用方法開展相關(guān)研究，以期為寧夏枸杞蚜蟲無(wú)公害防治提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

供試4 株蠟蚧輪枝菌菌株的來(lái)源：1 號(hào)、2 號(hào)由中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)提供，3 號(hào)由福建農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供，4 號(hào)由云南農(nóng)業(yè)大學(xué)提供。

1.1 不同藥劑對(duì)蠟蚧輪枝菌生長(zhǎng)的影響

試驗(yàn)于2009年9~10月在寧夏農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所試驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，供試藥劑及濃度見表1。

表1 供試藥劑及濃度

將蠟蚧輪枝菌菌株分生孢子加無(wú)菌水制成孢子懸浮液，孢子濃度為1.0×106個(gè)·mL-1，取1 mL孢子懸浮液涂布PDA 培養(yǎng)基，置25 ℃培養(yǎng)10 d，待用。

選取枸杞生產(chǎn)中常用的4 種殺菌劑和4 殺蟲劑，根據(jù)生產(chǎn)使用選擇中間濃度。在PDA 培養(yǎng)基中加入定量藥劑，配制成所需濃度，倒皿制成含藥平板。用7 mm 打孔器取培養(yǎng)好的新鮮菌落置于含藥平板中央，于25 ℃下培養(yǎng)7 d，十字交叉法測(cè)定菌落直徑，計(jì)算菌絲生長(zhǎng)抑制率。3 次重復(fù)，設(shè)不含藥培養(yǎng)基為空白對(duì)照。

抑制率（%）=（對(duì)照平皿菌落直徑-加藥平皿菌落直徑）/對(duì)照平皿菌落直徑×100%

1.2 蠟蚧輪枝菌對(duì)枸杞蚜蟲致病力的測(cè)定

供試枸杞蚜蟲：在寧夏農(nóng)林科學(xué)院枸杞工程中心試驗(yàn)基地栽培的寧杞1 號(hào)枸杞上采集蚜蟲，帶回試驗(yàn)室備用。

供試孢子液的配制：用0.003 mol·L-1的磷酸二氫鉀緩沖液收集已經(jīng)在PDA 培養(yǎng)基培養(yǎng)好的蠟蚧輪枝菌分生孢子，經(jīng)過濾后，用含1%吐溫20 的無(wú)菌水分別配成1×108、1×107、1×106、1×105、1×104個(gè)·mL-1的孢子懸浮液各50 mL 備用（孢子萌發(fā)率95%以上）。3 次重復(fù)，用含1%吐溫20 的無(wú)菌水作空白對(duì)照。

將健康、個(gè)體大小基本一致的無(wú)翅成蚜，連同枸杞葉一同浸入配制好的蠟蚧輪枝菌分生孢子懸浮液中，2 s 后迅速取出；將處理過的蚜蟲連同枸杞葉放入鋪有潮濕濾紙的培養(yǎng)皿中，另放入新鮮枸杞葉片飼養(yǎng)；培養(yǎng)皿用帶有小孔的保鮮膜覆蓋，每個(gè)處理3 次重復(fù)。將各處理置于24 ℃、光照為晝/夜=12 h/12 h 的人工氣候箱中，每天記錄死亡蟲數(shù)，保濕蚜蟲尸體觀察蟲體長(zhǎng)菌層情況，并保持枸杞葉片新鮮，連續(xù)觀察7 d。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用DPS 軟件進(jìn)行處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同藥劑對(duì)蠟蚧輪枝菌生長(zhǎng)的影響

測(cè)量不同蠟蚧輪枝菌菌株在含藥培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)直徑，統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表2。

表2 不同藥劑對(duì)蠟蚧輪枝菌生長(zhǎng)的影響

從表2 可以看出，4 種殺菌劑對(duì)1 號(hào)、2 號(hào)、3 號(hào)蠟蚧輪枝菌菌株生長(zhǎng)的抑制率均高于4 種殺蟲劑，其中75%百菌清WP、40%腈菌唑WP、10%苯醚甲環(huán)唑WG 對(duì)1 號(hào)、2 號(hào)、3 號(hào)蠟蚧輪枝菌菌株生長(zhǎng)的抑制率均高于50%醚菌酯WG，差異達(dá)極顯著水平。

4 種殺蟲劑對(duì)1 號(hào)蠟蚧輪枝菌菌株生長(zhǎng)的抑制率差異達(dá)顯著水平，0.5%印楝素EC、0.38%苦參堿SL、0.5%藜蘆堿SL 對(duì)1 號(hào)蠟蚧輪枝菌菌株生長(zhǎng)的抑制率顯著高于20%啶蟲醚WP。說(shuō)明殺菌劑中的醚菌酯和殺蟲劑中的啶蟲醚對(duì)1 號(hào)蠟蚧輪枝菌較安全。

4 種殺蟲劑中0.5%印楝素EC、0.38%苦參堿SL 對(duì)2 號(hào)蠟蚧輪枝菌的抑制率高于20%啶蟲醚WP 和0.5%藜蘆堿SL，差異達(dá)極顯著水平。說(shuō)明殺菌劑中的醚菌酯和殺蟲劑中的啶蟲醚、藜蘆堿對(duì)2 號(hào)蠟蚧輪枝菌較安全。

4 種殺蟲劑中0.5%印楝素EC、0.38%苦參堿SL、0.5%藜蘆堿SL 對(duì)3 號(hào)蠟蚧輪枝菌的抑制率無(wú)顯著差異，但均極顯著高于20%啶蟲醚WP。說(shuō)明殺菌劑中的醚菌酯和殺蟲劑中的啶蟲醚對(duì)3號(hào)蠟蚧輪枝菌較安全。

不同殺菌劑對(duì)4 號(hào)蠟蚧輪枝菌的抑制率差異達(dá)極顯著水平，50%醚菌酯WG 的抑制率最低，為24.68%；殺蟲劑中20%啶蟲醚WP 對(duì)4 號(hào)蠟蚧輪枝菌的抑制率最低，為3.52%。說(shuō)明殺菌劑中的醚菌酯和殺蟲劑中的啶蟲醚對(duì)4 號(hào)蠟蚧輪枝菌較安全。通過對(duì)4 株蠟蚧輪枝菌菌株在含殺菌劑和殺蟲劑培養(yǎng)基中生長(zhǎng)情況的分析，說(shuō)明殺菌劑中的醚菌酯和殺蟲劑中的啶蟲醚對(duì)4 株蠟蚧輪枝菌較安全。

表3 不同濃度蠟蚧輪枝菌對(duì)枸杞蚜蟲的致死機(jī)率

2.2 蠟蚧輪枝菌對(duì)枸杞蚜蟲致病力測(cè)定

2.2.1 4株蠟蚧輪枝菌菌株對(duì)枸杞蚜蟲的室內(nèi)濃度毒力測(cè)定 由表3、4 可知，不同蠟蚧輪枝菌對(duì)枸杞蚜蟲的室內(nèi)濃度毒力致死機(jī)率值和致死中濃度不同，其中1 號(hào)蠟蚧輪枝菌的致死機(jī)率值最高，為5.61（孢子濃度為1.0×108個(gè)·mL-1），LD50為1.8×105個(gè)·mL-1，表現(xiàn)最好。

2.2.2 4株蠟蚧輪枝菌菌株對(duì)枸杞蚜蟲的室內(nèi)時(shí)間毒力測(cè)定 由表5、6 可知，不同蠟蚧輪枝菌對(duì)枸杞蚜蟲的室內(nèi)時(shí)間毒力致死機(jī)率值及致死中時(shí)間不同，其中1 號(hào)蠟蚧輪枝菌致死機(jī)率值為6.41（7 d），致死中時(shí)間最短，為4.89 d，在4 株菌株中表現(xiàn)最好。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)中，通過對(duì)蠟蚧輪枝菌菌株在含藥培養(yǎng)基中生長(zhǎng)情況的檢測(cè)可知，殺菌劑中的醚菌酯和殺蟲劑中的啶蟲醚對(duì)4 株蠟蚧輪枝菌較安全；室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果，1 號(hào)蠟蚧輪枝菌菌株的致死中濃度為1.8×105個(gè)·mL-1，致死中時(shí)間為4.89 d，表現(xiàn)最好。而醚菌酯和啶蟲醚也正是當(dāng)前生產(chǎn)中使用較多的殺菌劑及殺蟲劑，今后可將殺菌劑與殺蟲劑結(jié)合開展田間防治研究，以期取得更好地防治效果。

表4 不同蠟蚧輪枝菌對(duì)枸杞蚜蟲的致死中濃度

表5 不同處理時(shí)間蠟蚧輪枝菌對(duì)枸杞蚜蟲的致死機(jī)率

表6 不同蠟蚧輪枝菌對(duì)枸杞蚜蟲的致死中時(shí)間

陳濤．1995．有害生物的微生物防治原理和技術(shù)．武漢：湖北科學(xué)技術(shù)出版社：273-291．

陳學(xué)文．2011．辣椒堿對(duì)枸杞蚜蟲的毒性研究．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，39（19）：11488-11491．

耿銳梅，楊美林，周天雄．2004．蠟蚧輪枝菌對(duì)麥無(wú)網(wǎng)長(zhǎng)管蚜的室內(nèi)毒力測(cè)定．云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，19（2）：174-176．

關(guān)曉慶．2011．異色瓢蟲對(duì)枸杞蚜蟲的捕食功能反應(yīng)及選擇．湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，50（12）：2442-2445．

桂富榮，李亞紅，李正躍．2005．不同溫度下新蚜蟲癘霉對(duì)桃蚜的毒力測(cè)定．植物保護(hù)，31（3）：61-64．

金陽(yáng)，沈銘高，徐景華，沈國(guó)軍．2008．芹源素對(duì)小菜蛾和小白菜蚜蟲的防治效果．中國(guó)蔬菜，（4）：32-33．

李東梅．2011．中國(guó)枸杞館盛裝開館．寧夏日?qǐng)?bào)，2011-09-26．

李鋒，孫海霞，焦恩寧，田建華，王文國(guó)，安巍，石志剛．2005．綠穎和敵死蟲對(duì)枸杞蚜蟲的防治效果．中國(guó)蔬菜，（9）：27-28．

劉彩玲，馮明光．1998．安徽蟲瘟霉對(duì)桃蚜的生物測(cè)定與時(shí)間-劑量效應(yīng)分析．菌物系統(tǒng)，17（4）：361-366．

劉奎，許江，林上統(tǒng)，關(guān)義甫，盧輝，鐘義海．2010．防治豇豆蚜蟲和美洲斑潛蠅的田間藥效試驗(yàn)．中國(guó)蔬菜，（6）：63-66．

王金富，馬孝林，鄧景麗，王建國(guó)．2010．7 種化學(xué)藥劑對(duì)枸杞蚜蟲的室內(nèi)毒力．西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，19（5）：105-107．

楊芳，李鋒，劉志強(qiáng)，劉炎棠，王剛．2002．枸杞蚜蟲為害枸杞花蕾防治指標(biāo)研究初報(bào)．寧夏農(nóng)林科技，（2）：20-21．

袁盛勇，孔瓊，田學(xué)軍，張虹，李河，伍蘇然，楊建梅．2007．蠟蚧輪枝茵MZ041024 菌株對(duì)菜縊管蚜的室內(nèi)毒力測(cè)定．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，35（15）：4553-4557．

左玲霞，謝曉鵬，楊敏麗．2010．野西瓜苗對(duì)枸杞蚜蟲的殺蟲活性研究．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，38（30）：16918-16919．