鄧藻鏞,程全芬
玉竹為百合科植物玉竹的根莖,含有生物堿,強(qiáng)心甙,多糖類,黏液質(zhì),維生素A等物質(zhì)。玉竹的干燥根莖性平、味甘,具有養(yǎng)陰、潤燥、生津止渴、清熱潤膚等功效,有強(qiáng)心、擴(kuò)張血管、降血糖、降血脂和抗腫瘤等作用。自古以來,民間用玉竹作食療就十分普遍,這些藥膳中有的用于外感風(fēng)熱而發(fā)熱咳嗽、咽痛口渴,呼吸系統(tǒng)疾病的患者如慢性支氣管炎、慢性肺病、肺結(jié)核等炎癥,有的用于冠心病、血管硬化、高血脂、高血壓等疾病。由此可見,玉竹可能有抗感染、抗凝等多重作用,但對其機(jī)制尚缺乏研究。本研究以大鼠實(shí)驗(yàn)性血栓形成為指標(biāo)研究玉竹水提物的抗血栓作用,并探討其可能的作用機(jī)制。
1.1 藥品與試劑 玉竹購于四川省中藥材有限責(zé)任公司,取玉竹加適量水煮沸1h,重復(fù)煎煮3次,濾液合并后濃縮成1ml相當(dāng)于0.5g生藥的液體,將濃縮液放于4℃冰箱備用。血漿血栓烷B2(TXB2)和6-酮 -前列腺素 F1α(6-keto-PGF1α)放射免疫分析測定試劑盒均購自北京市福瑞生物工程公司。
1.2 實(shí)動物物 SD大鼠,雄性,體質(zhì)量230~260g,由四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。
1.3 實(shí)驗(yàn)方法
1.3.1 大鼠動-靜脈旁路血栓形成模型的建立及藥物處理將30只大鼠隨機(jī)分成3組,每組10只,即血栓模型組、玉竹處理組、正常對照組。玉竹處理組灌胃給藥,1次/d,給藥容積為2.5g/kg,連續(xù)給藥12d,血栓模型組和正常對照組給予等量蒸餾水。末次給藥后1h,參照文獻(xiàn)[1]的方法制成動-靜脈旁路血栓形成模型,即將大鼠腹腔注射10%水合氯醛(按0.35g/kg)麻醉,于仰臥位固定后分離右側(cè)頸總動脈和左側(cè)頸外靜脈。將三段聚乙烯管相連,一端插入右頸總動脈,另一端插入左頸外靜脈,中間段長10cm,放入一根長為8cm的7號手術(shù)線 (已稱重),管內(nèi)注滿2.5U/ml肝素0.9%氯化鈉溶液,建立動靜脈旁路。20min后取下套管,取出絲線,在濕潤的濾紙上滾動,去除多余浮血,置已稱重的硫酸紙上稱濕重。
1.3.2 血栓濕重和干重的測量 血栓濕重由總重量減去絲線干重表示。將血栓放入烘箱內(nèi)60℃烘烤1h至恒重,冷卻稱重得血栓干重。
1.3.3 血漿TXB2和6-keto-PGF1α的含量測定 腹主動脈取血,嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作并檢測血漿TXB2和6-keto-PGF1α的含量。
1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析,計量資料以 ()表示,組間比較采用t檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 血栓濕重和干重的測量結(jié)果 玉竹處理組血栓濕重和干重的重量明顯低于血栓模型組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P<0.01,見表1)。
2.2 血漿TXB2和6-keto-PGF1α的含量測定結(jié)果 玉竹處理組血漿TXB2的含量明顯低于血栓模型組,血漿6-keto-PGF1α的含量明顯高于血栓模型組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義 (P<0.01,見表2)。
血栓形成是冠心病、腦卒中、動脈粥樣硬化等致殘和致死率高的心腦血管疾病的病理學(xué)基礎(chǔ)。血栓形成過程涉及異常的血管內(nèi)膜表面,血小板及激活的凝血因子之間的相互作用。本實(shí)驗(yàn)采用的大鼠動-靜脈旁路血栓形成法制備的血栓是血栓形成的“經(jīng)典過程”,能較好地模擬血管阻塞性血栓形成和血小板黏附性血栓形成,反應(yīng)自然的病理過程。實(shí)驗(yàn)中絲線上形成的血栓主要由血小板形成[2]。
研究表明,血栓烷A2(TXA2)和前列腺素I2(PGI2)是機(jī)體內(nèi)調(diào)節(jié)血小板聚集的一對生物活性物質(zhì),二者的平衡對維持血液流動性和保證生理止血功能具有重要意義。TXA2有促進(jìn)血小板聚集、誘發(fā)血栓形成的作用[3],但TXA2在體內(nèi)極不穩(wěn)定,t1/2僅為37s[4],迅速降解為無活性的TXB2。與TXA2作用相反,PGI2與血小板膜表面的特異受體結(jié)合,激活腺苷酸環(huán)化酶,引起血小板內(nèi)c-AMP增高,抑制血小板黏附聚集,但其t1/2僅為2min,迅速降解為穩(wěn)定型6-keto-PGF1α。因此,TXB2和6-keto-PGF1α的檢測可以間接反映血液中TXA2和PGI2的變化情況。
本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,玉竹水提物對大鼠動-靜脈旁路血栓形成有明顯抑制作用,可以明顯降低血漿中TXB2的含量,升高6-keto-PGF1α的含量,可恢復(fù)二者的失衡情況。由此推測玉竹水提物的抗血栓作用機(jī)制可能與抑制血小板的聚集有關(guān),確切的機(jī)制有待進(jìn)一步探討。
表1 玉竹水提物對大鼠血栓形成的影響 (,n=10,mg/cm)Table 1 The effect of the extract of Polygonatum odoratum on thrombus formation in rats
表1 玉竹水提物對大鼠血栓形成的影響 (,n=10,mg/cm)Table 1 The effect of the extract of Polygonatum odoratum on thrombus formation in rats
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表2 玉竹水提物對血漿TXB2和6-keto-PGF1α的影響 (,n=10,pg/ml)Table 2 The effect of the extract of Polygonatum odoratum on the levels of TXB2 and 6-keto-PGF1α
表2 玉竹水提物對血漿TXB2和6-keto-PGF1α的影響 (,n=10,pg/ml)Table 2 The effect of the extract of Polygonatum odoratum on the levels of TXB2 and 6-keto-PGF1α
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3 王新德,趙雅度.神經(jīng)病學(xué) [M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2001:146-154.
4 許文玉,王偉,劉蕾,等.慢性心肌缺血血瘀征模型小型豬TXB2、6-keto-PGF1α與心功能的變化及其相關(guān)性研究[J].吉林中醫(yī)藥,2008,28(1):62.