王仁翠 (山東省諸城市舜王畜牧獸醫(yī)管理站 262233)
豬旋毛蟲(chóng)病是由旋毛線(xiàn)蟲(chóng)(Trichinella spiralis)引起的人畜共患的寄生蟲(chóng)病,流行于哺乳類(lèi)動(dòng)物間,人因生吃或半熟食含旋毛蟲(chóng)包囊的豬肉等而感染。主要臨床表現(xiàn)為胃腸道癥狀、發(fā)熱、肌痛、水腫和血嗜酸粒細(xì)胞增多等。本文對(duì)豬旋毛蟲(chóng)病的危害及診斷作了簡(jiǎn)單介紹。
旋毛蟲(chóng)為一種很小的、前細(xì)后粗的白色小線(xiàn)蟲(chóng),雄蟲(chóng)長(zhǎng) 1.4~16mm,雌蟲(chóng)長(zhǎng)3~4mm,肉眼勉強(qiáng)可以看到。寄生在小腸的腸壁上。它的生活史特點(diǎn)是:同一動(dòng)物既是終宿主,又是中間宿主。當(dāng)人或動(dòng)物吃了含有旋毛蟲(chóng)幼蟲(chóng)包囊的肉后,包囊被消化,幼蟲(chóng)逸出鉆入十二指腸和空腸的粘膜內(nèi),約經(jīng)1.5~3d即發(fā)育為成蟲(chóng),交配后,雄蟲(chóng)死亡,雌蟲(chóng)鉆入腸腺或黏膜下淋巴間隙中產(chǎn)幼蟲(chóng)。大部分幼蟲(chóng)隨血流散布到全身。橫紋肌是旋毛蟲(chóng)幼蟲(chóng)最適宜的寄生部位。剛進(jìn)入肌纖維的幼蟲(chóng)是直的,隨后迅速發(fā)育增大,逐漸卷曲并形成包囊。犬體內(nèi)的包囊呈圓形,大小為0.25~0.3mm×0.4mm,眼觀呈白色針尖狀。包囊內(nèi)含有囊液和1~2條卷曲的幼蟲(chóng),個(gè)別可達(dá)6~7條。包囊在數(shù)月或1~2年內(nèi)開(kāi)始鈣化,鈣化包囊的幼蟲(chóng)仍能存活數(shù)年。
輕度感染者常無(wú)癥狀,重度感染者其臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣。典型臨床表現(xiàn)為感染48h后有胃腸道癥狀,以后出現(xiàn)發(fā)熱、水腫及明顯的肌肉疼痛為本病的三大特征。
1.3 病程
1.3.1 潛伏期 潛伏期長(zhǎng)短隨幼蟲(chóng)侵入數(shù)量多少和人體免疫力的強(qiáng)弱而異。最短的僅為12h,最長(zhǎng)的46d。多數(shù)在7~14d。
1.3.2 小腸侵入期 自食入包囊至幼蟲(chóng)在小腸黏膜發(fā)育為成蟲(chóng)的這一時(shí)期。主要病變是小腸黏膜炎癥。在潛伏期過(guò)后,病人可出現(xiàn)腹痛、惡心、嘔吐、腹瀉和食欲減退等。腹痛主要在上腹部及臍周,呈隱痛或燒灼樣痛。腹瀉每日數(shù)次,稀便或水樣便,無(wú)里急后重感。本期癥狀持續(xù)1周左右。
1.3.3 幼蟲(chóng)移行期 指幼蟲(chóng)產(chǎn)出后,隨血液循環(huán)到達(dá)全身各部,最后到達(dá)并寄宿肌肉組織。主要臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、肌痛及水腫。發(fā)熱多在38~40℃,可高達(dá)41℃,伴有畏寒、頭痛、出汗和虛弱無(wú)力。全身性肌肉痛為本病的突出特點(diǎn),腓腸肌和四肢肌肉更明顯,病人因疼痛而不敢活動(dòng)。嚴(yán)重病人可有咀嚼、吞咽和言語(yǔ)障礙及聲音嘶啞,呼吸和眼球活動(dòng)時(shí)均感疼痛。水腫先從眼瞼及顏面開(kāi)始,以后可擴(kuò)展至四肢,嚴(yán)重病人可有腹水、胸水及心包積液,同時(shí)也可出現(xiàn)肺炎、心肌炎、腦膜炎等癥狀,個(gè)別嚴(yán)重者可致死亡。部分病人可有蕁麻疹和過(guò)敏性皮疹等表現(xiàn)。此期持續(xù)2周至2個(gè)月左右。
1.3.4 包囊形成期 包囊形成期指幼蟲(chóng)最終在骨骼肌中形成包囊這一時(shí)期。此期急性癥狀(發(fā)熱、水腫)逐漸減退,但肌肉疼痛仍可持續(xù)數(shù)月,伴有消瘦、虛弱及肌肉硬結(jié)等表現(xiàn)。
2.1.1 新鮮肉檢驗(yàn) (1)采樣。自胴體兩側(cè)的橫膈膜肌腳部各采樣一塊,記為一份肉樣,其質(zhì)量不少于50~100g,與胴體編成相同號(hào)碼。可從肋間肌、腰肌、咬肌、舌肌等處采樣。(2)目檢。撕去膈肌的肌膜,將膈肌肉纏在檢驗(yàn)者左手食指第二指節(jié)上,使肌纖維垂直于手指伸展方向,再將左手握成半握拳式,借助于拇指的第一節(jié)和中指的第二節(jié)將肉塊固定在食指上面,隨即使左手掌心轉(zhuǎn)向檢驗(yàn)者,右手拇指撥動(dòng)肌纖維,在充足的光線(xiàn)下,仔細(xì)視檢肉樣的表面有無(wú)針尖大半透明乳白色或灰白色隆起的小點(diǎn)。檢完一面后再將膈肌翻轉(zhuǎn),用同樣方法檢驗(yàn)膈肌的另一面。凡發(fā)現(xiàn)白色小點(diǎn)可懷疑為蟲(chóng)體。(3)壓片。放置夾壓玻片:將旋毛蟲(chóng)夾壓玻片放在檢驗(yàn)臺(tái)的邊沿,靠近檢驗(yàn)者;剪取小肉樣:用剪刀順肌纖維方向,按隨機(jī)采樣的要求,自肉上剪取燕麥粒大小的肉樣24粒,使肉粒均勻地在玻片上排成一排(或用載玻片,每片12粒);壓片:將另一夾壓片重迭在放有肉粒的夾壓片上,并旋動(dòng)螺絲。使肉粒壓成薄片。(4)鏡撿。將制好的壓片放在低倍顯微鏡下,從壓片一端的邊沿開(kāi)始觀察,直到另一端為止。(5)判定標(biāo)準(zhǔn)。沒(méi)有形成包囊期的旋毛蟲(chóng):在肌纖維之間呈直桿狀或逐漸蜷曲狀態(tài),或蟲(chóng)體被擠于壓出的肌漿中。包囊形成期的旋毛蟲(chóng):在淡薔薇色背景上,可看到發(fā)光透明的圓形或橢圓形物,囊中央是蜷曲的蟲(chóng)體。成熟的包囊位于相鄰肌細(xì)胞所形成的梭形肌腔內(nèi)。鈣化的旋毛蟲(chóng):在包囊內(nèi)可見(jiàn)數(shù)量不等、濃淡不均的黑色鈣化物,或可見(jiàn)到模糊不清的蟲(chóng)體,此時(shí)啟開(kāi)壓玻片,向肉片稍加10%的鹽酸溶液,待1~2min后,再行觀察。機(jī)化的旋毛蟲(chóng):此時(shí)壓玻片啟開(kāi)平放桌上,滴加數(shù)滴甘油透明劑于肉片上,待肉片變得透明時(shí),再覆蓋夾壓玻片,置低倍鏡下觀察,蟲(chóng)體被肉芽組織包圍、變大,形成紡錘形、橢圓形或圓形的肉芽腫。被包圍的蟲(chóng)體結(jié)構(gòu)完整或破碎,乃至完全消失。
2.1.2 凍肉的檢驗(yàn) (1)壓片。(2)染色:在肉片上滴加1~2滴美藍(lán)或鹽酸水溶液,浸漬1min,蓋上夾壓玻片。(3)鏡檢:美藍(lán)染色法:肌纖維呈淡青色,脂肪組織不著染或周?chē)叩?。旋毛蟲(chóng)包囊呈淡紫色、薔薇色或藍(lán)色。蟲(chóng)體完全不著染。鹽酸透明法:肌纖維呈淡灰色且透明,包囊膨大具有明顯輪廓,蟲(chóng)體清楚。
2.2.1 采樣 部位:采集胴體橫膈肌腳和舌肌。方法:去除脂肪、肌膜或腱膜。數(shù)量:每頭豬取1個(gè)肉樣(100g),再?gòu)拿總€(gè)肉樣上剪取1g小樣,集中100個(gè)小樣(個(gè)別旋毛蟲(chóng)病高發(fā)地區(qū)以15~20個(gè)小樣為一組)進(jìn)行檢驗(yàn)。
2.2.2 絞碎肉樣 將100個(gè)肉樣(重100g)放入組織搗碎機(jī)內(nèi)以2000r/min,搗碎時(shí)間30~60s,以無(wú)肉眼可見(jiàn)細(xì)碎肉塊為度。
2.2.3 加溫?cái)嚢?將已絞碎的肉樣放入置有消化液的燒杯中,肉樣與消化液的比例為1∶20,置燒杯于加熱磁力攪拌器上,啟動(dòng)開(kāi)關(guān),消化液逐漸攪成一漩渦,液溫控制在40~43℃之間,加溫?cái)嚢?0~60min,以無(wú)肉眼可見(jiàn)沉淀物為度。
2.2.4 過(guò)濾 取80目的篩子,置于漏斗上。漏斗下再接一分液漏斗,將加溫后的消化液徐徐倒入籃子。濾液濾入分液漏斗中,待濾干后,棄去篩子上的殘?jiān)?/p>
2.2.5 沉淀 濾液在分液漏斗內(nèi)沉淀10~20min,旋毛蟲(chóng)逐漸沉到底層,此時(shí)輕輕分幾次放出底層沉淀物于凹面皿中。
2.2.6 漂洗 沿凹面皿邊緣,用帶乳頭的10ml吸管徐徐加入37℃溫自來(lái)水,然后沉淀1~2min,并輕輕沿凹面皿邊緣再再輕輕多次吸出其中的液體如此反復(fù)多次,加入或吸出凹面皿中的液體均以不沖起其沉淀物為度,直至沉淀于凹面皿中心的沉淀物上清透明(或用量筒自然沉淀,反復(fù)吸取上清的方法進(jìn)行漂洗)。
2.2.7 鏡檢 將帶有沉淀物的凹面皿放入倒置顯微鏡或在80~100倍的普通顯微鏡下調(diào)節(jié)好光源,將凹面皿左右或來(lái)回晃動(dòng),鏡下捕捉蟲(chóng)體、包囊等,發(fā)現(xiàn)蟲(chóng)體時(shí)再對(duì)這一樣品采用分組消化法進(jìn)一步復(fù)檢(或壓片鏡檢),直到確定病豬為止。