趙光平 （山東省臨朐縣畜牧局 262600）

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中藥抗流感病毒機(jī)制的研究進(jìn)展

趙光平 （山東省臨朐縣畜牧局 262600）

流感病毒是引起急性呼吸道傳染病的主要病原體，是造成人類(lèi)與動(dòng)物死亡的重要病因之一。2009年許多國(guó)家暴發(fā)了H1N1流感病毒，使得數(shù)以萬(wàn)計(jì)的人民感染，并帶來(lái)了世界性的經(jīng)濟(jì)損失，引起了人群的恐慌。目前國(guó)際上預(yù)防與治療流感的主要措施是疫苗接種和抗病毒化學(xué)藥物治療。臨床上應(yīng)用的抗病毒藥物一般設(shè)計(jì)為作用于病毒的蛋白質(zhì)，這些藥物的特異性較強(qiáng)，其作用靶點(diǎn)多為病毒復(fù)制過(guò)程中的關(guān)鍵酶，抗病毒譜較窄，同時(shí)又由于病毒只能在活細(xì)胞生長(zhǎng)、流感病毒的亞型變異速度快，而疫苗研究和生產(chǎn)速度較慢，使得化學(xué)藥物和流感病毒疫苗難以發(fā)揮其最佳預(yù)防和治療效果，因此科學(xué)家們正尋找廣譜抗病毒的藥物應(yīng)對(duì)突發(fā)性病毒。

中草藥為天然藥物，含有生物堿、多糖等多種有效生物活性物質(zhì)，能發(fā)揮合成藥物不能達(dá)到的手性結(jié)構(gòu)藥效，具有抗病毒譜廣、毒副作用小，無(wú)環(huán)境污染等優(yōu)點(diǎn)，并且中草藥還含有礦物質(zhì)，維生素及未知的營(yíng)養(yǎng)因子，同時(shí)起到了預(yù)防、治療和營(yíng)養(yǎng)的多重作用。我國(guó)中草藥資源豐富，價(jià)格低廉，有利于我們研究中藥的抗病毒藥效。近年來(lái)有關(guān)抗流感病毒中藥的研究日益增多，用現(xiàn)代中藥藥理研究方法篩選出了一些具有發(fā)展前景的單味中藥和中藥有效成分，以及中藥復(fù)方制劑中草藥，但其機(jī)制的研究還有待完善，本文就近幾年中藥抗流感病毒的作用機(jī)制研究進(jìn)行綜述，以便中獸醫(yī)研究工作者進(jìn)行查找及借鑒，為中獸醫(yī)學(xué)的研究做出貢獻(xiàn)。

1 流感病毒的結(jié)構(gòu)與致病機(jī)制

流感病毒屬于正黏病毒科病毒，為分節(jié)段的負(fù)鏈RNA病毒。依據(jù)其核蛋白(NP)抗原性的差異分成A、B、C三型，分別在基因組結(jié)構(gòu)、多肽組成、感染性和致病性等方面存在差異，其中以甲型流感病毒危害最大。流感病毒的基因組分節(jié)段，易發(fā)生基因重配，即不同來(lái)源的流感病毒基因節(jié)段包被在一起形成新的毒粒[1]。血凝素(H)與神經(jīng)氨酸酶(N)是甲型流感病毒重要的2種抗原，由于發(fā)生抗原漂移或轉(zhuǎn)移，HA有16種抗原亞型(H1-H16)，NA有9種抗原亞型(N1-N9)[2]。流感病毒通過(guò)HA突起(主要為HA1)與宿主細(xì)胞表面多糖受體上的唾液酸結(jié)合，從而使病毒吸附于易感細(xì)胞表面。唾液酸通常與受體糖鏈N末端倒數(shù)第二個(gè)糖——主要是半乳糖(Gal)以α2，3或α2, 6糖苷鍵連接[3]。組織上的唾液酸受體類(lèi)型在人和不同動(dòng)物分布有差異。1983年，Rogers等研究結(jié)果顯示，人源和豬源流感病毒偏嗜結(jié)合SAα2,6Gal，禽源病毒偏嗜結(jié)合SAα2,3Gal。病毒與宿主結(jié)合被吞入飲泡，形成胞內(nèi)流感病毒侵入宿主細(xì)胞。目前為廣大學(xué)者接受的致病機(jī)理主要有如下幾種[4]：①流感病毒誘導(dǎo)宿主細(xì)胞產(chǎn)生凋亡是其致細(xì)胞病變的重要機(jī)理之一；②病毒感染后對(duì)細(xì)胞造成的氧化應(yīng)激損傷也是學(xué)者普遍接受的致病機(jī)理；③細(xì)胞因子風(fēng)暴學(xué)說(shuō)等其他學(xué)術(shù)學(xué)說(shuō)和理論。

2009年從感染甲型流感的美國(guó)病人身上獲得并分離得到的病毒基因序列后，研究[5-7]表明這種病毒基因組由禽流感、豬流感和人流感病毒基因混合而成，是一種新型的甲型H1N1流感病毒。該病毒既有甲型流感病毒的共有特征，也有其特殊性。

2 中藥抗流感病毒的作用機(jī)制

2.1 直接抑制病毒 現(xiàn)代藥理研究表明，一些單味中草藥抑制或殺滅病毒的作用主要表現(xiàn)在阻斷病毒繁殖過(guò)程中的吸附、穿入、復(fù)制、成熟的某一環(huán)節(jié)，從而達(dá)到抗病毒的目的。目前對(duì)中草藥抗流感病毒的機(jī)理研究比較清楚的成分有兩類(lèi)：一是多酚類(lèi)物質(zhì)，證明其可以抑制流感病毒蛋白質(zhì)和RNA合成，同時(shí)也可抑制流感病毒的吸附作用；另一類(lèi)是黃酮類(lèi)物質(zhì)，其機(jī)理是抑制流感病毒唾液酸酶的活性和膜融合作用。

代表藥物有：連翹，金銀花，大青葉，黃連，黃芩，魚(yú)腥草等。永井隆之[8]認(rèn)為，黃芩根中分離出的黃酮成分F36(5, 7, 4’-三羥基-8-甲氧基黃酮/異黃芩素-8-甲醚)可較強(qiáng)地抑制小鼠感染流感病毒( IFV)及明顯阻礙IFV對(duì)小鼠的致死活性，對(duì)IFV的唾液酸酶有特異的抑制活性，并抑制IFV的膜融合及脫殼。Nagai[9]發(fā)現(xiàn)，黃芩黃酮F36抗流感病毒A(H3N2 )、B的作用機(jī)制，部分是通過(guò)抑制病毒膜與病毒感染周期前期紅細(xì)胞漿質(zhì)/溶酶體膜溶合，從而抑制其增殖、B病毒在基質(zhì)中釋放及其與脂質(zhì)體結(jié)合及在肺中的增殖的。胡興昌等[10]用丙酮脫脂提取板藍(lán)根生藥的凝集素，分別測(cè)定各樣品的血凝活性，用45.3 mg/ml的樣品對(duì)流感病毒進(jìn)行體外抑制試驗(yàn)，結(jié)果表明板藍(lán)根凝集素對(duì)流感病毒具有顯著的直接殺滅作用和預(yù)防作用以及較好的治療作用，抑制流感病毒的效果與板藍(lán)根凝集素血凝活性的高低有關(guān)。Ahmad[11]等對(duì)分自一種海洋細(xì)菌Pseudomonas sp.的氨基葡聚糖進(jìn)行其硫酸鹽衍生物合成研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，具有L-谷氨酸的多糖硫酸化后對(duì)流感病毒A具有抗病毒活性，而對(duì)流感病毒B無(wú)活性，且其活性與目前美國(guó)臨床治療流感病A的病毒唑(ribavirin)相當(dāng)。

2.2 間接抑制病毒 中草藥具有免疫促進(jìn)作用，如黃芪、黨參、靈芝、白術(shù)、當(dāng)歸、熟地、白芍、淫羊藿、菟絲子、肉蓯蓉、肉桂、枸杞子、吳茱萸、黃芩、黃連、魚(yú)腥草、川芎、紅花、丹參等，這些中草藥能提高機(jī)體的防御功能，從而使機(jī)體達(dá)到“正氣存內(nèi)，邪不可干”的作用。如多種中藥具有增加外周血中多核白細(xì)胞的數(shù)量，加強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)功能，增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞(NKC)和LAK細(xì)胞活性，延緩病毒引起的細(xì)胞病變，對(duì)細(xì)胞免疫功能的雙向調(diào)節(jié)，增強(qiáng)體液免疫，對(duì)補(bǔ)體系統(tǒng)的影響或誘生干擾素等細(xì)胞因子的作用。

李艷華等[12]在探討自行研制的由黃芪等組成的復(fù)方中藥對(duì)禽流感病毒的抑制作用等指標(biāo)時(shí)，體外試驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)方中藥不僅對(duì)禽流感病毒有直接滅活作用，而且對(duì)吸附于細(xì)胞表面和進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的禽流感病毒都有抑制作用；該復(fù)方中藥不僅安全、而且能增強(qiáng)雞的體液免疫、細(xì)胞免疫功能、增加免疫器官指數(shù)。體內(nèi)試驗(yàn)表明，該復(fù)方中藥能延長(zhǎng)雞的平均死亡時(shí)間，預(yù)防效果強(qiáng)于治療效果。郭惠等[13]通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)魚(yú)腥草能夠抗流感病毒誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，有很好的抗病毒作用。Utsunomiya等[14]甘草皂苷可以提高流感病毒感染小鼠生存率，延長(zhǎng)生存時(shí)間，降低肺病毒滴度；但體外實(shí)驗(yàn)表明，甘草皂苷對(duì)于病毒生存和復(fù)制無(wú)影響。從甘草皂苷治療的病毒感染小鼠體內(nèi)分離脾T細(xì)胞轉(zhuǎn)輸給病毒感染小鼠，可增加生存率；當(dāng)甘草皂苷與抗IFN-γ單克隆抗體同用時(shí)，不顯示抗病毒作用。提示甘草皂苷保護(hù)小鼠流感病毒感染是通過(guò)刺激T細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ起作用的。

另外，隨著對(duì)自由基氧化損害認(rèn)識(shí)的不斷深入，對(duì)自由基清除劑的研究也得到了迅速發(fā)展。有研究表明自由基在傳染病的發(fā)生發(fā)展中也起了重要作用，中藥的抗氧化活性，單味藥如屬于補(bǔ)益藥的人參、黨參、首烏、當(dāng)歸、黃芪等，屬于清熱藥的苦瓜、綠茶、穿心蓮、黃芩、山豆根、馬齒莧、菊花等；復(fù)方中藥如清宮壽桃丸、壽星寶、山海丹對(duì)氧自由基有直接清除作用，清解靈、大承氣湯、金水寶膠囊、六味地黃湯、益氣活血液等能直接提高SOD活性，因此具有抗病毒抗氧化的活性。

李生等[15]分析禽流感病毒與微血管內(nèi)皮細(xì)胞相關(guān)性以及傳統(tǒng)中醫(yī)藥與微血管內(nèi)皮細(xì)胞的關(guān)系，提出中藥防治禽流感的機(jī)理，即通過(guò)保護(hù)微血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的途徑來(lái)防治禽流感，為進(jìn)一步預(yù)防和治療疾病提供一種新的思路。方素萍等[16]研究證實(shí)，黃連解毒湯含藥血清能抑制中性粒細(xì)胞與微血管內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，從而起到保護(hù)微血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用。

3 結(jié)語(yǔ)

由上綜述可以看出，經(jīng)過(guò)研究表明許多中藥不僅具有直接抑制病毒的作用，而且具有間接抑制病毒的作用。在防治流感方面，很多中藥方劑有較好的療效。但目前還沒(méi)有一個(gè)作用機(jī)制相對(duì)明確，能夠廣泛應(yīng)用于臨床的理想方劑，其主要原因還是缺乏中藥的基礎(chǔ)研究，開(kāi)發(fā)的藥物也很難得到推廣。因此，闡明中藥及方劑的作用機(jī)理，構(gòu)建中藥有效成分方劑以進(jìn)一步提高療效，是迫切需要解決的問(wèn)題。

同時(shí)，筆者在這里也想指出，現(xiàn)在畜牧業(yè)上出現(xiàn)了疾病的主癥不明顯，但其引起的并發(fā)癥致死率強(qiáng)等難以治愈的現(xiàn)象。中藥則在此時(shí)體現(xiàn)了許多優(yōu)點(diǎn):如抗病毒同時(shí)，許多藥物兼有解熱、抗炎等作用，對(duì)病毒引起的感染具有多重作用，如縮短發(fā)熱的時(shí)間、控制炎癥的擴(kuò)散、促進(jìn)炎癥的吸收等，即多途徑、多方位起作用；部分藥物還能增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，阻止病毒進(jìn)入細(xì)胞組織，治療其引起的并發(fā)癥；中藥一般很少傷害正常組織細(xì)胞，毒副作用較??；由于中藥采取的是個(gè)體化的治療，對(duì)病情更具有針對(duì)性。正是由于這種治療過(guò)程中中藥有效成分的多元化，病毒難以對(duì)其產(chǎn)生抗藥性，使得中藥在治療病毒感染性疾病方面具有明顯的優(yōu)勢(shì)，臨床使用前景廣闊。

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（2012–06–07）

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