周 麗 溫納相 宋永峰 周 全 魯俊鵬

（廣東溫氏食品集團(tuán)有限公司 廣東 新興 527400）

番鴨呼腸孤病毒病近幾年該病在本市的流行勢態(tài)日趨嚴(yán)重，已成為危害養(yǎng)鴨業(yè)發(fā)展的疫病之一。番鴨呼腸孤病毒（muscovy duck reovirus，MDRV）是由呼腸孤病毒科正呼腸孤病毒屬番鴨呼腸孤病毒引起的一種急性傳染病。1997年以來，在我國南方等地流行。臨床上以軟腳為主要癥狀，以肝和脾表面有大量灰白色壞死點(diǎn)為主要病理變化，發(fā)病日齡多為3～20日齡，以7～10日齡的雛鴨最為嚴(yán)重；發(fā)病率為30%～70%，死亡率為30%～90%，病愈鴨成為僵鴨[1，2]。

目前對該病感染雛番鴨后的病理變化方面的研究不多。因此，本研究為雛鴨感染番鴨呼腸孤病毒的致病機(jī)制及探討該病的防制措施提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 病毒 本室分離鑒定和保存的番鴨呼腸孤病毒強(qiáng)毒。

1.2 試驗(yàn)動物 1日齡非免疫雛番鴨30只，由廣東溫氏云城公司提供。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 30只雛鴨隨機(jī)分為感染組（A）和對照組（B）各15只。其中A組雛鴨于5日齡經(jīng)肌肉注射番鴨呼腸孤病毒強(qiáng)毒病毒液0.5Ml/只；B組雛鴨給予相同劑量0.01mol/L的無菌PBS。隔離飼養(yǎng)，連續(xù)觀察20d，詳細(xì)記錄試驗(yàn)動物的臨床及病理變化，并與自然發(fā)病死亡番鴨進(jìn)行對比。發(fā)病死亡前雛鴨快速采取心、肝、肺、腎、腦、胰腺、脾、腔上囊、十二指腸、空腸、回腸和盲腸，經(jīng)10%中性福爾馬林溶液固定48h后，修切成2～3mm厚組織塊，經(jīng)過流水沖洗，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，常規(guī)石蠟包埋，制成4μm切片，HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察。

2 結(jié)果

2.1 臨床癥狀 5日齡雛番鴨肌肉注射MDRV分離株第3天后開始出現(xiàn)堆積、排白綠色稀糞，趾關(guān)節(jié)和跗關(guān)節(jié)周圍紅腫。第4天開始出現(xiàn)死亡，持續(xù)5～11d，死亡率達(dá)95%；對照組無明顯臨床表現(xiàn)。

2.2 病理剖檢 病死番鴨主要病變?yōu)椋焊闻K、脾臟腫大呈深褐色，表面有大量針尖大的白色壞死點(diǎn)；心臟出現(xiàn)纖維素性心包炎，腎腫大，色澤變淡并有出血，外觀呈斑駁狀。

2.3 病理組織學(xué)變化 肝臟：肝細(xì)胞顆粒變性、水泡變性、部分壞死呈空泡狀；中小淋巴細(xì)胞、網(wǎng)狀細(xì)胞在靜脈周圍浸潤，匯管區(qū)、在肝小葉內(nèi)局灶性增生；門管區(qū)動脈內(nèi)皮增生，肌層透明變性；肝細(xì)胞壞死處有淋巴細(xì)胞集聚。脾臟：大量脾小體中心溶解壞死；脾小體壞死團(tuán)塊周邊殘存細(xì)胞腫脹、呈空泡；淋巴細(xì)胞核碎裂、邊集，并見核分裂相狀鞘動脈周圍、淋巴小結(jié)內(nèi)淋巴細(xì)胞大量流失，剩余網(wǎng)狀細(xì)胞。心臟：纖維素性心外膜炎。腎臟：腎小管上皮細(xì)胞顆粒變性、水泡變性、細(xì)胞壞死；腎小管間散在淋巴細(xì)胞和紅細(xì)胞。腸道、肺臟、小腦和大腦未發(fā)現(xiàn)異常。法氏囊：髓質(zhì)區(qū)淋巴細(xì)胞壞死崩解；皮質(zhì)區(qū)有嗜中性粒細(xì)胞浸潤。

3 討論

（1）MDRV感染很可能是首先影響感染雛鴨的免疫系統(tǒng)，進(jìn)而誘發(fā)多器官的自身免疫性反應(yīng)，免疫器官的病理性損傷導(dǎo)致機(jī)體免疫功能下降呈現(xiàn)嚴(yán)重的免疫抑制，從而引發(fā)全身各器官組織的損傷，最終可能導(dǎo)致感染雛鴨的死亡[3，4]。（2）MDRV毒力變化較大，不同地方分離到的毒株導(dǎo)致的臨床癥狀和大體病變也不同，大體病變較明顯的主要在肝臟和脾臟。發(fā)病番鴨臨床上表現(xiàn)為精神萎靡，擁擠成群，食欲下降，羽毛蓬松、直立且無光澤，呼吸急促，跛行，糞便呈綠色或白色，腳軟，生長緩慢，易激發(fā)混合感染[5，6]。（3）MDRV引起的病理組織學(xué)變化具有診斷價值。此次病理組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，MDRV的主要病變在肝臟、脾臟、心臟、法氏囊和腎臟等組織局灶性壞死，壞死灶中心是細(xì)胞碎片，灶內(nèi)及外圍均有吞噬細(xì)胞和淋巴樣細(xì)胞分布，其中以肝、脾尤為顯著，肝組織和脾白髓結(jié)構(gòu)遭到嚴(yán)重破壞；肝細(xì)胞、心肌纖維和腎小管上皮細(xì)胞顆粒變性；法氏囊淋巴細(xì)胞變性和壞死。說明MDRV對鴨的免疫系統(tǒng)具有較強(qiáng)的破壞作用[7，8]。本研究結(jié)果表明，MDRV有一定的抗原相關(guān)性，對番鴨組織器官或細(xì)胞的親嗜性出現(xiàn)了明顯改變，在導(dǎo)致宿主多部位感染的同時，也使肝、脾組織細(xì)胞大量死亡；肝、脾組織結(jié)構(gòu)和免疫功能受到嚴(yán)重影響[9]。（4）MDRV的診斷有時非常不典型，應(yīng)當(dāng)綜合多種因素進(jìn)行診斷。如該場的免疫程序、免疫方法、生產(chǎn)記錄、病史、臨床癥狀和大體剖檢病理變化等作出初步診斷。有條件，應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步血清學(xué)、病理組織學(xué)、分子生物學(xué)等手段進(jìn)行確診[10]。