李大偉
平菇、香菇、金針菇、雞腿蘑、口蘑、滑子菇等蘑菇均為傳統(tǒng)的食料之一,向來以“味道鮮美,營養(yǎng)豐富”著稱。近些年來,蘑菇需求量越來越大,全國每年消費蘑菇千萬噸,隨之廣大蘑菇種植戶的種植熱情愈發(fā)高漲,但如果無菌操作及空氣消毒方法不當,易導(dǎo)致蘑菇品相不好或產(chǎn)量偏低,造成經(jīng)濟效益低下。
對蘑菇而言,除要求培養(yǎng)的菌類以外的微生物都統(tǒng)稱為雜菌,在蘑菇生長過程中一旦感染雜菌,雜菌就會迅速繁殖,與蘑菇爭奪養(yǎng)料和空間,甚至分泌毒素或寄生在蘑菇上,影響蘑菇的正常生長發(fā)育,從而給生產(chǎn)上造成經(jīng)濟損失。因此,在蘑菇的制種和栽培中,應(yīng)保證菌種優(yōu)良純正無雜,并且在接種過程中要樹立嚴格的無菌觀念,掌握和運用消毒、滅菌技術(shù),嚴防雜菌污染,以此降低微生物對蘑菇正常生長發(fā)育的影響。
由于蘑菇種類的不同,對培養(yǎng)基質(zhì)、工具、環(huán)境中的無菌程度要求也不同。因此,可以根據(jù)生產(chǎn)情況選用不同的方法,如滅菌、消毒、防腐等。
滅菌是指在一定范圍內(nèi)用物理或化學(xué)的方法,徹底殺滅物料、容器、用具和空氣中的一切微生物,包括微生物的營養(yǎng)體和休眠體,使物料成為無菌狀態(tài)。消毒是采用物理或化學(xué)的方法,殺滅或清除基質(zhì)中、物體表面及環(huán)境中的部分微生物。除菌是一種機械方法(如過濾、離心分離、動態(tài)殺菌技術(shù)等),除去液體或氣體中微生物的方法。防腐是用來防止或抑制微生物生長繁殖的技術(shù),是一個抑菌過程。殺菌泛指殺死微生物菌體,通常不包括芽孢,有這種作用的藥劑稱為殺菌劑。
消毒滅菌是排除雜菌干擾,為蘑菇創(chuàng)造潔凈生長環(huán)境的重要保證,也是蘑菇生產(chǎn)中的一項基本技術(shù),是蘑菇生產(chǎn)成敗的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
1.無菌操作環(huán)節(jié)
接種室應(yīng)保持清潔,用煤粉酚皂液擦洗臺面及墻壁,定期用乳酸或甲醛熏蒸。每次使用前,均應(yīng)用紫外燈滅菌;使用過程中,采用動態(tài)殺菌機,此機器在工人上班時開機,過程中持續(xù)殺菌不允許關(guān)機,工人下班后同步關(guān)機,對人體無害處的同時,時時在線滅殺空氣中的霉菌、枯草桿菌、沙門氏菌等雜菌。
進入接種室前,應(yīng)先做好個人衛(wèi)生工作。在緩沖間內(nèi)要更換工作鞋帽、工作衣、戴口罩。工作衣、工作鞋、口罩只準在接種室內(nèi)使用,不應(yīng)穿到其他地方去,并要定期更換、消毒。
接種的試管、三角瓶等應(yīng)做好標記,注明培養(yǎng)基、菌種的名稱、日期。移入接種室內(nèi)的所有物品,均須在緩沖室用70%酒精擦試干凈。
接種前,雙手采用自動感應(yīng)消毒器對手部消毒,建議采用75%醫(yī)用酒精作為消毒介質(zhì)。流程為:“感應(yīng)給皂機洗手→水龍頭沖洗→感應(yīng)式烘干→感應(yīng)式手消毒”;以首次殺菌后時間計算,以后每隔60~90分鐘對手部重新消毒一次,阻隔手部細菌的滋生及繁衍。
培養(yǎng)箱及接種工具應(yīng)經(jīng)常清潔消毒;操作過程不離開酒精燈火焰;棉塞不亂放;接種工具使用前后均需火焰滅菌。
2.接種室的空氣消毒方法
2.1紫外線消毒法 其殺菌機理是當其作用于生物體時,可導(dǎo)致細胞內(nèi)核酸和酶發(fā)生光化學(xué)反應(yīng),而使細胞死亡。另外,紫外線還可使空氣中的氧氣產(chǎn)生臭氧,臭氧具有殺菌作用。但對真菌效果差,只起輔助消毒作用,還需配合藥物使用。由于紫外線對人體有傷害作用,不應(yīng)在開啟紫外燈的情況下工作。
2.2臭氧發(fā)生器消毒法 能高效、快速殺滅空氣中和物體表面的各種微生物,接種成功率可達97%以上。同時具有性能穩(wěn)定、操作簡單、耗電小的特點,但對人體有傷害,不應(yīng)在有人的情況下工作。
2.3動態(tài)空氣消毒機對車間內(nèi)的空氣進行消毒,保證食品安全。該消毒技術(shù)對車間消毒時,人可同時在車間內(nèi)工作,對人體沒有任何危害,同時使受控環(huán)境保持在“無菌無塵”標準。
2.4甲醛和高錳酸鉀熏蒸消毒法 使用方法是每m3空間用8~10mL 40%甲醛和5~7g高錳酸鉀,先將高錳酸鉀倒入陶瓷或玻璃容器內(nèi),再加入甲醛。加入甲醛后人立即離開,密閉房間消毒時20~30分鐘。
3.接種室無菌程度檢查方法
取無菌的營養(yǎng)瓊脂平板,在接種室內(nèi)臺上和臺下各放一套,把皿蓋打開15分鐘,然后蓋好,倒置37℃恒溫培養(yǎng)24~28小時,如果每個皿內(nèi)菌落不超過4個,則可以認為無菌程度良好,若菌落很多,則應(yīng)對接種室進一步滅菌。