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摘 要:培養(yǎng)基是微生物檢驗(yàn)中不可或缺的關(guān)鍵部分,培養(yǎng)基質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響整個(gè)微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量?，F(xiàn)階段,由于我國(guó)在微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基的質(zhì)量方面還沒(méi)有形成一個(gè)較為統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),這在一定程度上影響了檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。為此,必須采取有效的措施提高培養(yǎng)基的質(zhì)量,進(jìn)而確保微生物檢測(cè)質(zhì)量?；诖它c(diǎn),本文就提高微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量的相關(guān)研究進(jìn)行淺談。

關(guān)鍵詞:微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量配制

中圖分類號(hào):TS207.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1674-098X(2012)07(c)-0001-01

1 提高檢驗(yàn)人員綜合素質(zhì)

微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量與檢驗(yàn)人員的素質(zhì)息息相關(guān),并對(duì)其素質(zhì)提出了高要求。首先,檢驗(yàn)人員必須接受過(guò)微生物檢驗(yàn)方面的專業(yè)基礎(chǔ)教育,具備全面的理論知識(shí)和實(shí)踐技能,擁有較強(qiáng)的主觀判斷分析能力,在崗前培訓(xùn)合格的基礎(chǔ)上方可上崗操作;其次,檢驗(yàn)人員應(yīng)當(dāng)定期參加培訓(xùn)、進(jìn)修學(xué)習(xí)、學(xué)術(shù)交流等活動(dòng),積極學(xué)習(xí)質(zhì)量保證體系、計(jì)量學(xué)等與微生物檢驗(yàn)相關(guān)的學(xué)科領(lǐng)域知識(shí),不斷更新自身的知識(shí)體系。檢驗(yàn)人員還應(yīng)當(dāng)掌握國(guó)家最新的微生物檢驗(yàn)方法和標(biāo)準(zhǔn),參與編制檢測(cè)程序和儀器操作程序,參與各類盲樣測(cè)試和水平測(cè)試,增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力,以滿足微生物檢測(cè)對(duì)檢驗(yàn)人員提出的高要求;再次,應(yīng)強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部管理,落實(shí)定期考核制度,實(shí)驗(yàn)室主管人員應(yīng)對(duì)檢驗(yàn)人員的知識(shí)水平、檢驗(yàn)技能和標(biāo)準(zhǔn)熟練程度進(jìn)行全面考核,結(jié)合檢驗(yàn)人員的工作態(tài)度和工作責(zé)任感考評(píng),將其作為評(píng)價(jià)檢驗(yàn)人員綜合素質(zhì)的重要依據(jù)。

2 嚴(yán)把培養(yǎng)基的購(gòu)入關(guān)和驗(yàn)收關(guān)

在培養(yǎng)基的購(gòu)入階段,應(yīng)確保微生物檢驗(yàn)中所使用的干粉培養(yǎng)基、試劑和藥物等,必須優(yōu)選專業(yè)、誠(chéng)信、服務(wù)優(yōu)質(zhì)的生產(chǎn)廠家作為供應(yīng)商。在確認(rèn)該生產(chǎn)廠家通過(guò)了質(zhì)量管理體系認(rèn)證的基礎(chǔ)上購(gòu)入培養(yǎng)基,認(rèn)真檢測(cè)商品質(zhì)量,使其符合國(guó)家規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。此外,培養(yǎng)基還應(yīng)當(dāng)具備齊全的信息資料,如培養(yǎng)基的生產(chǎn)編號(hào)、具體名稱、成分清單、儲(chǔ)存條件、使用前的pH值、有效期等,以便于使用培養(yǎng)基時(shí)能夠準(zhǔn)確記錄數(shù)據(jù)、比較分析數(shù)據(jù);在培養(yǎng)基的驗(yàn)收階段,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)配備專人檢驗(yàn)商品質(zhì)量,認(rèn)真核對(duì)生產(chǎn)廠家的相關(guān)商品資料信息,查看培養(yǎng)基的規(guī)格數(shù)量、生產(chǎn)批號(hào)、商品名稱、保質(zhì)期、外觀質(zhì)感是否在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)。檢驗(yàn)驗(yàn)收人員必須對(duì)每一批次的商品均進(jìn)行嚴(yán)格的培養(yǎng)基質(zhì)量檢測(cè)工作,嚴(yán)禁未經(jīng)驗(yàn)收合格的培養(yǎng)基進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室中使用。

3 提高培養(yǎng)基的配制質(zhì)量

在進(jìn)行培養(yǎng)基配制的過(guò)程中,為了有效地提高培養(yǎng)基的質(zhì)量,應(yīng)采取如下措施:其一,必須使用清潔、干凈的玻璃容器作為培養(yǎng)基配制容器,嚴(yán)禁使用金屬類容器,并確保玻璃容器的體積應(yīng)大于復(fù)水后培養(yǎng)基體積的2倍以上。在培養(yǎng)基水化時(shí)為了防止離子混入培養(yǎng)基中,應(yīng)當(dāng)杜絕使用鐵鍋或銅鍋,以確保微生物正常生長(zhǎng)。同時(shí),若使用新玻璃瓶,應(yīng)防止其在加熱的過(guò)程中產(chǎn)生堿性物質(zhì),從而導(dǎo)致培養(yǎng)基的pH值變化;其二,培養(yǎng)基的配制用水應(yīng)盡可能選擇蒸餾水或是符合要求的水,這樣有助于排除測(cè)試條件下影響及抑制微生物生長(zhǎng)的物質(zhì)。嚴(yán)禁使用受污染的去離子水和自來(lái)水,其原因在于即使去離子水經(jīng)過(guò)除菌過(guò)濾,也必然含有影響微生物生長(zhǎng)的物質(zhì),而自來(lái)水中含有抗菌物質(zhì),如氯等。在進(jìn)行培養(yǎng)基水化時(shí),應(yīng)當(dāng)在玻璃容器中逐漸加入1/3的水量,經(jīng)過(guò)震搖后,繼續(xù)加入剩余水量,利用水的沖力將附著于玻璃容器壁的培養(yǎng)基粉沖入水中;其三,培養(yǎng)基稱重時(shí)必須使用專用角匙,以防止因交叉污染而造成檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確。由于培養(yǎng)基具有易潮性,在吸潮后會(huì)導(dǎo)致其自身酸化,從而對(duì)培養(yǎng)基的pH值產(chǎn)生影響,所以應(yīng)選擇在濕度較低的實(shí)驗(yàn)室取培養(yǎng)基進(jìn)行稱重。稱重時(shí)切忌不能吸入粉末,尤其是選擇性培養(yǎng)基,干粉培養(yǎng)基必須遵循生產(chǎn)廠家的說(shuō)明資料進(jìn)行準(zhǔn)確配置;其四,當(dāng)培養(yǎng)基完全溶解冷卻之后,應(yīng)當(dāng)對(duì)其進(jìn)行pH值測(cè)定,如有必要時(shí)可做適當(dāng)調(diào)整。通常情況下,使用個(gè)別成分制備而成的培養(yǎng)基,除有特殊要求外,培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)滅菌處理以后并冷卻至25℃時(shí),其pH值的變化范圍不允許超過(guò)0.2個(gè)單位。在進(jìn)行調(diào)整時(shí),可采用濃度為40g/L的氫氧化鈉溶液或濃度為36.5g/L的鹽酸溶液;其五,如果對(duì)試驗(yàn)結(jié)果有所懷疑時(shí),那么可以在相同的條件下,對(duì)新舊批號(hào)的培養(yǎng)基進(jìn)行同時(shí)試驗(yàn)比對(duì),以此來(lái)找出原因;其六,對(duì)于一些生化鑒定中常用的培養(yǎng)基以及用于選擇性鑒定的培養(yǎng)基,必須嚴(yán)格遵照規(guī)定的方法進(jìn)行配制,以確保培養(yǎng)基質(zhì)量符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。同時(shí),在培養(yǎng)基配置完成后,應(yīng)對(duì)其外觀進(jìn)行檢查,看培養(yǎng)基的顏色是否正常,若是液體培養(yǎng)基應(yīng)檢查其是否澄清,有無(wú)沉淀及渾濁。

4 做好培養(yǎng)基的滅菌和保存

培養(yǎng)基在配制完成后,必須嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求的溫度和時(shí)間對(duì)其進(jìn)行滅菌處理,應(yīng)盡可能做到既確保滅菌效果又不損傷培養(yǎng)基的有效成分。需要注意的是,采用的滅菌程序應(yīng)經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的化學(xué)及生物驗(yàn)證。培養(yǎng)基在經(jīng)過(guò)滅菌處理以后,斜面固體類的培養(yǎng)基應(yīng)當(dāng)擺放成斜面,其長(zhǎng)度應(yīng)控制在試管長(zhǎng)度的1/2處左右;如果配制的是半固體狀培養(yǎng)基,那么應(yīng)使其垂直并冷凝成半固體狀的深層瓊脂,當(dāng)培養(yǎng)基完全凝固以后,應(yīng)在試管上注明培養(yǎng)基的配制日期及名稱,然后將其放置在避光、干燥及冷藏處進(jìn)行保存待用。除有標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定及特殊要求外,一般的基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基可存放在4℃的冰箱內(nèi),保存的最長(zhǎng)期限不得超過(guò)90天,若是在溫度為20℃以下的室內(nèi),最長(zhǎng)保存期限不得超過(guò)30天,這樣能夠確保培養(yǎng)基的成分不發(fā)生改變。此外,對(duì)于生化鑒定及選擇性分離鑒定這兩種培養(yǎng)基,必須嚴(yán)格遵照產(chǎn)品說(shuō)明進(jìn)行使用,如無(wú)特殊情況,應(yīng)盡量當(dāng)天配制當(dāng)天使用,在避光、冷藏處最長(zhǎng)保存時(shí)間不得超過(guò)3天。

5 結(jié)語(yǔ)

總而言之,微生物檢驗(yàn)是一項(xiàng)較為復(fù)雜且系統(tǒng)的工作,影響檢驗(yàn)結(jié)果的因素相對(duì)較多,其中培養(yǎng)基的質(zhì)量所占的比重最大。為了能夠進(jìn)一步提高微生物的檢驗(yàn)質(zhì)量,要求檢驗(yàn)人員應(yīng)采取積極有效地措施,不斷提高培養(yǎng)基的整體質(zhì)量。只有這樣,才能真正確保微生物檢測(cè)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。

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