許 靜 趙海霞

細菌性角膜炎是由細菌感染引起的，以角膜上皮缺損及缺損區(qū)下角膜基質壞死為表現(xiàn)的化膿性角膜炎，是主要的致盲眼病之一〔1〕。造成角膜炎的細菌種類眾多，其中以微球菌科（主要是葡萄球菌屬和微球菌屬）、鏈球菌屬、假單胞菌屬及腸桿菌科為主，約87%的細菌性角膜炎是由上述4類細菌所致〔2-4〕。本病屬于中醫(yī)“凝脂翳”范疇，多因黑睛表層損傷，風熱邪毒乘隙襲入，若素有漏睛，邪毒已有蘊伏，或因臟腑蘊熱，火熱上攻，更易發(fā)病，為眼科疑難重病之一〔5〕。本文以兔為實驗模型，研究新制柴連湯煎劑配合抗生素滴眼液治療細菌性角膜炎的效果。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

健康無眼疾的成年新西蘭白兔40只（80只眼），體重2～3 kg，雌雄不限。采購自內蒙古醫(yī)學院附屬醫(yī)院動物實驗中心，實驗期間動物分籠飼養(yǎng)，環(huán)境良好，飲食正常。

1.2 實驗試劑

金黃色葡萄球菌菌種（ATCC25923），菌種濃度2.5×1010CFU/ml（購自南京便診生物有限公司，產品貨號：BKTW 23103）；熒光素染色條（購自山東博士倫福瑞達制藥有限公司，國藥準字H20093096）。

1.3 實驗藥品和主要儀器

中藥選擇新制柴連湯加減〔6-7〕：柴胡 10 g、黃芩10 g、黃連 5 g、 赤芍 10 g、蔓荊子 10 g、梔子 10 g、龍膽 5 g、木通 5 g、甘草 5 g、荊芥 5 g、防風 5 g、金銀花15 g、蒲公英 15 g、連翹 10 g、白芷 10 g（本院中藥房）。0.3%氧氟沙星滴眼液（山東博士倫福瑞達制藥有限公司），0.3%妥布霉素滴眼液（安徽華源醫(yī)藥股份有限公司），0.5%丁卡因滴眼液（本院）。YZ2手持眼科裂隙燈（河北康明醫(yī)療器械貿易有限公司）。

1.4 動物模型的制備

實驗兔予耳緣靜脈注射鹽酸氯氨酮（0.2 ml/kg）麻醉，眼部予0.5%丁卡因滴眼液表面麻醉，待角膜反射消失后，置開瞼器開瞼，用4號半針頭將0.1 ml菌種濃度為2.5×1010CFU/ml的金黃色葡萄球菌菌液自角膜近中央處注入角膜實質層內，造成約4～5 mm的白色菌斑（造模成功的標志〔8-9〕）。所有實驗兔雙眼進行實驗。

1.5 分組處理

接種后的兔隨機分成2組：中藥治療組20只（40只眼），對照組20只（40只眼），分籠飼養(yǎng)。造模24 h后給藥。中藥治療組給予0.3%氧氟沙星滴眼液、0.3%妥布霉素滴眼液交替點眼，每天5～6次，每次1～2滴，同時給予新制柴連湯加減煎劑，取汁30ml，早晚分2次灌服〔10〕。對照組給予0.3%氧氟沙星滴眼液和0.3%妥布霉素滴眼液交替點眼，每天5～6次，每次1～2滴，同時取30 ml生理鹽水，早晚分2次灌服。

1.6 觀察指標與療效評價

于造模后24 h，以及治療后第3、9、14天進行裂隙燈檢查并做評分。采用McNeill[11]角膜病變程度分級方法記錄病變程度。0分：角膜實質層透明清晰，光澤無混濁；1分：角膜輕度水腫，虹膜紋理清晰可見。2分：角膜水腫，混濁，虹膜紋理仍可窺見；3分：角膜明顯混濁，但可見到瞳孔緣，角膜表面見少量散在飄浮膿液；4分：角膜嚴重混濁，前房結構無法窺見，前房及層間積膿。

療效標準：治療后第14天進行療效評價。參照《中醫(yī)病證診斷療效標準》〔12〕擬定療效標準。治愈：流淚畏光等癥狀消失，角膜潰瘍愈合，熒光素染色陰性。好轉：癥狀減輕，角膜潰瘍面變小變淺，熒光素染色縮?。?/3。無效：治療后病情無變化或加重。

1.7 統(tǒng)計學分析

采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行分析，角膜評分數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差表示，兩樣本均數(shù)比較用t檢驗，療效比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 2組治療前后角膜評分比較

造模24 h及治療后第3天，2組角膜評分接近，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。治療后第9天和第14天，中藥治療組角膜評分均小于對照組，2組差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）（表 1）。

表1 2組細菌性角膜炎兔不同時間角膜病變程度評分比較（±s）

表1 2組細菌性角膜炎兔不同時間角膜病變程度評分比較（±s）

注：與對照組比較，①P＜0.05（兩獨立樣本t檢驗）

不同時間點角膜病變程度評分造模后24 h治療第3天 治療第9天 治療第14天中藥治療組 40 3.1±0.72 2.9±0.63 1.86±0.79① 0.78±0.98①對照組 40 3.2±0.76 2.95±0.60 2.13±0.79 1.5±1.38組別 眼數(shù)/只

2.2 2組療效比較

中藥治療組：治愈32只眼，好轉6只眼，無效2只眼，總有效率95%；對照組：治愈28只眼，好轉4只眼，無效8只眼，總有效率80%，2組差異有統(tǒng)計學意義（χ2=4.114，P=0.044）。

3 討論

細菌性角膜炎是一種常見的嚴重威脅視力的角膜疾病，發(fā)病急、進展快、來勢猛、變化多端，如不能進行及時有效的治療，可發(fā)生角膜潰瘍穿孔，甚至眼內感染，最終眼球萎縮〔13〕。雖然廣譜抗菌藥物對細菌性角膜炎有較好的療效，但由于耐藥菌株逐年增多，臨床上細菌培養(yǎng)及藥敏試驗相對滯后，往往延誤治療，使感染得不到有效控制，導致病情進一步發(fā)展〔14〕。常見的致病菌中，葡萄球菌屬引起的細菌性角膜潰瘍較多，其中以表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌最為多見〔15〕。金黃色葡萄球菌在葡萄球菌屬中致病力最強，屬凝固酶陽性葡萄球菌，產生金黃色色素，能分解甘露醇，主要通過外毒素致病〔16-17〕；致病力取決于其產生毒素和酶的能力，也與入侵細菌的毒力和數(shù)量有關，可產生血漿凝固酶、溶血毒素、殺白細胞素等。金黃色葡萄球菌可見于正常結膜囊，在正常免疫情況下暫時存在，當角膜上皮有損傷或因其他疾病等原因使機體抵抗力降低時，可侵入角膜使局部感染。臨床癥狀一般為眼痛、畏光、異物感、結膜充血，分泌物增多等。角膜潰瘍多呈孤立的圓形或橢圓形，灰白或奶白色外觀，一般潰瘍比較淺表，與周圍正常組織的邊界比較清楚，水腫與浸潤程度較輕，可以引起輕中度的前房反應。

新制柴連湯出自清代黃耐庵編著的《眼科纂要》，為祛風清熱之良方，方中加入金銀花、蒲公英、白芷、連翹，則瀉火解毒效果更佳?！对瓩C啟微》認為“翳猶瘡也”，治療當以清熱解毒退翳醫(yī)瘡為法。本實驗中，根據(jù)角膜注射細菌的造模方法，應屬于凝脂翳病因中所講的黑睛表層損傷，風熱邪毒乘隙襲入；又因其發(fā)病時間短，病位較淺，依據(jù)中醫(yī)辨證論治，應為風熱表證，治宜驅風清熱解毒，故選用新制柴連湯加減方。

方中柴胡、防風、荊芥、蔓荊子祛風散邪止痛，黃連、黃芩、梔子、龍膽、蒲公英清肝瀉火退赤，苦寒清熱解毒，瀉三焦之火而解毒療瘡；赤芍配木通清熱活血、退赤止痛，與瘡家圣藥連翹合用，清熱解瘡毒效力更佳，且梔子具有降溫消炎止痛，止血等作用〔18〕；白芷、防風祛風散邪，退翳明目，取“火郁發(fā)之”之意，且白芷有較好的止痛、止淚作用，尚有療瘡之效〔19〕；甘草清熱解毒，調和諸藥。綜合全方，共奏瀉火解毒、疏風散熱利濕之功?，F(xiàn)代藥理研究表明，金銀花、蒲公英、黃連、黃芩、梔子、連翹、赤芍等具有抗病原體作用，對多種致病菌有抑制或殺滅作用，其中金銀花、黃連、黃芩、連翹等還具有抗毒素作用，白芷、防風、甘草亦具有抗菌作用〔20〕，金銀花、黃連、黃芩、連翹、甘草等具有調節(jié)免疫功能的作用。

本實驗的結果顯示，新制柴連湯加減煎劑配合抗生素滴眼液治療細菌性角膜炎，能有效緩解癥狀，并能有效促使炎癥反應減輕，相對單純抗生素治療，可以縮短潰瘍愈合時間，縮短病程，提高療效，其治療效果明顯優(yōu)于對照組。需要說明的是：①該方用于由火熱邪毒導致的風熱表證型的角結膜炎應該更為合適；②本實驗研究僅研究了針對金黃色葡萄球菌性角膜炎的效果，對于其它致病菌導致的角膜炎尚缺乏實驗依據(jù)；③方劑中的有效成分及殺菌抑菌的機理還不清楚。實驗中的不足，還有待于進一步地研究來完善。

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