王雪松 李常國
(遼寧省食品藥品檢驗(yàn)所,沈陽 110023)
肺炎是指肺組織發(fā)生的急性滲出性炎癥,為呼吸系統(tǒng)的一種常見疾病。它可以是原發(fā)的獨(dú)立性疾病,也可以是其他疾病的并發(fā)癥。按照病因,可將肺炎分為細(xì)菌性肺炎,病毒性肺炎,霉形體性肺炎,立克次氏體性肺炎、霉菌性肺炎、寄生蟲性肺炎、中毒性肺炎和吸入性肺炎等。迄今所知,引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物呼吸器官疾病的細(xì)菌性和支原體性病原體約達(dá)20種。引起豚鼠肺炎的主要是支氣管敗血波氏桿菌感染,本病在豚鼠群中呈季節(jié)性流行。秋、冬、春季為其流行期,發(fā)病也較多,而夏季幾乎無病例。另外,飼養(yǎng)密度過高、營養(yǎng)不良、通風(fēng)不暢等是引起本病惡化的原因【1】。按病因分類,可針對不同病因及時(shí)進(jìn)行相應(yīng)治療。但在肺炎患畜的疾病治療之前便迅速確定病因,目前尚有困難。按病因累及的部位和病變范圍大小,可將肺炎分為大葉性肺炎、小葉性肺炎(支氣管性肺炎),融合性肺炎和間質(zhì)性肺炎。按炎性滲出物的性質(zhì),可將肺炎分為漿液性、卡他性、纖維素性、化膿性、出血性和壞疽性肺炎等。大葉性肺炎常見于某些傳染病,引起大葉性肺炎的病原微生物主要侵入途徑是氣源性的,經(jīng)呼吸道感染,沿支氣管樹擴(kuò)散,侵入肺泡引起肺炎。有些致病菌是呼吸道內(nèi)的條件性致病菌,受寒感冒、過度疲勞、長途運(yùn)輸、飼養(yǎng)管理不當(dāng)、吸入刺激性氣體、免疫功能低下時(shí),呼吸道的凈化功能及肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬能力下降,肺泡內(nèi)細(xì)菌繁殖,引起大葉性肺炎。由于大葉性肺炎病變范圍廣,使肺呼吸面積明顯減少,動(dòng)物出現(xiàn)嚴(yán)重的呼吸困難。動(dòng)脈血氧含量減少,動(dòng)物出現(xiàn)缺氧,對生命威脅很大,動(dòng)物常常因缺氧、呼吸困難而死亡。大葉性肺炎是以肺泡內(nèi)滲出大量纖維素為特征的急性炎癥。所以,通常又稱之為纖維素性肺炎。此型肺炎常侵犯一個(gè)大葉、一側(cè)肺臟或全肺,肺組織發(fā)生大面積廣泛實(shí)變。從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類來看,豚鼠的肺炎發(fā)病率和嚴(yán)重程度均高于大鼠和小鼠,肺炎在實(shí)驗(yàn)用豚鼠中的發(fā)病率與飼養(yǎng)環(huán)境和季節(jié)因素密切相關(guān)【2】。
1.1.1 病料 普通級動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室新引進(jìn)豚鼠50只,死亡22只。
1.1.2 試劑 量筒1000ml、無水乙醇、95%乙醇、二甲苯(含量為99%)、切片石蠟(熔點(diǎn)56℃~58℃)、固定液、蘇木素液、1%鹽酸、蒸餾水、0.5%伊紅、蓋玻片
1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 剪子、中鑷子、小鑷子、濾紙、止血鉗、解剖板,毛刷,五官科鑷子,染片架、切片機(jī)、冷臺(tái)、載玻片,攤片機(jī)、烘片機(jī)、包埋機(jī)、全自動(dòng)脫水機(jī)、顯微鏡
1.1.4 配置病理切片制作所需試劑
固定液制備:磷酸二氫鈉4 g(帶結(jié)晶水稱取5.2 g);磷酸氫二鈉6.5 g(帶結(jié)晶水稱取16.4 g),40%甲醛100 ml,加蒸餾水至1 000 ml。
蘇木素液制備:蘇木素 10 g,無水乙醇 100 ml,硫酸鋁鉀200 g,蒸餾水 2 000 ml,
氧化汞 5 g。先將蘇木素溶于無水乙醇中,另將硫酸鋁鉀加溫溶于蒸餾水中,待硫酸鋁鉀全部溶解后,再將蘇木素乙醇溶液加在一起,混合煮沸,再將氧化汞放入溶液中用玻璃棒攪拌,此時(shí)液體為深紫色,馬上把燒杯放入流動(dòng)冷水中,使液體立即冷卻,隔日過濾。
1%鹽酸制備:鹽酸(含量36.4%)5 ml,70%乙醇495 ml。
0.5%伊紅制備:伊紅2.5 g,80%乙醇500 ml。
1.2.1 臨床觀察 豚鼠表現(xiàn)精神不振,食欲減退,被毛粗亂,呼吸急促,頻率增加,嚴(yán)重者呈混合性呼吸困難,咳嗽,有漿液性、黏液性鼻液,連續(xù)一周對有明顯癥狀的豚鼠通過肛溫測得體溫范圍在39.7℃~42.1℃,發(fā)生了持續(xù)性高熱,呈稽留熱型(豚鼠平均正常體溫38.6℃[3])陸續(xù)出現(xiàn)死亡,鼻孔與口腔中流出鐵銹色或暗紅色液體。
1.2.2 剖檢變化 外部觀察,皮下檢查,暴露腹腔,胸腔剖開,用小鑷子剪下肺臟,剝離其周圍的結(jié)締組織。
1.2.3 病理學(xué)診斷 取材固定;脫水透明;浸蠟包埋;切片貼片;修整展片;H.E染色。
病變肺葉腫大,重量增加,呈暗紅色,病變肺葉質(zhì)實(shí),切面稍有干燥,呈粗糙顆粒狀,有漿液-纖維素性滲出物蓄積覆蓋胸腔內(nèi),胸腔內(nèi)含有大量淡黃色纖維素凝塊的滲出液。纖維素性肺炎常并發(fā)纖維素性胸膜炎,纖維素機(jī)化時(shí)造成胸膜粘連,肺組織壞死液化。
圖2 病變肺葉呈暗紅色,粗糙顆粒狀
肺泡壁毛細(xì)血管顯著擴(kuò)張充血,肺泡腔內(nèi)充滿大量漿液-纖維素性滲出物,呈透明粉紅色,肺泡腔中紅細(xì)胞大部分溶解消失,淋巴管中充滿大量炎性滲出物,整個(gè)肺組織呈現(xiàn)大量增生。
圖3 肺泡腔內(nèi)充滿大量漿液-纖維素性滲出物
3.1 本實(shí)驗(yàn)對一起疑似豚鼠大葉性肺炎的患病豚鼠進(jìn)行臨床觀察,剖檢診斷,初步確診為豚鼠大葉性肺炎疾病。
3.2 在臨床診斷的基礎(chǔ)上又進(jìn)行了病理組織學(xué)診斷,通過對患病豚鼠的肺臟等臟器進(jìn)行病理組織學(xué)觀察檢測結(jié)果表明,具備典型的豚鼠大葉性肺炎疾病的病理組織學(xué)變化。