宋根苗， 蔣家珍， 邱立紅

（農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥化學(xué)與應(yīng)用技術(shù)重點開放實驗室，中國農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院，北京 100193）

噻霉酮（benziothiazolinone，BIT），化學(xué)名稱1，2苯并異噻唑啉－3－酮，屬于有機雜環(huán)類噻唑啉酮殺菌劑［1］，為國內(nèi)創(chuàng)制品種。研究表明噻霉酮對蘋果腐 爛 病 ［Valsaceratosperma （Tode et Fr.）Maire］［2］、柑橘潰瘍病［Xanthomonascitri（Hasse）Dowson］［3］、炭疽?。跜olletotrichumgloeosprioides（Peng）］［4］、番茄細菌性病害［5］有良好的防治效果。苯醚甲環(huán)唑（difenoconazole）屬三唑類殺菌劑，是甾醇脫甲基化抑制劑，廣譜、高效、持效期長，具有良好的內(nèi)吸、熏蒸和鏟除作用，葉面處理或種子處理均具有很強的預(yù)防和治療作用［6］。

初步研究發(fā)現(xiàn)，噻霉酮與苯醚甲環(huán)唑混用能明顯提高其對蔬菜葉斑病的防治效果。為了進一步研究開發(fā)噻霉酮與苯醚甲環(huán)唑的應(yīng)用潛力，提高其對不同病原菌的防治效果，筆者測定了這兩種藥劑混配對黃瓜菌核病菌等4種重要農(nóng)業(yè)病原菌的聯(lián)合毒力，旨在明確兩者不同比例混配對4種病原菌的增效作用，篩選出最佳配比，為兩種藥劑的實際混配應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

96%苯醚甲環(huán)唑（A）原藥（difenoconazole，TC），由北京東旺農(nóng)藥廠生產(chǎn)；80%噻霉酮（B）原藥（benziothiazolinone，TC），由上海農(nóng)藥研究所提供。

1.2 供試菌株

棉花立枯病菌（Rhizoctoniasolani）、黃瓜菌核病菌（Sclerotiniasclerotiorum）為筆者所在實驗室保存菌株，番茄早疫病菌（Alternariasolani）和辣椒炭疽病菌（Colletotrichumcapsici）為中國農(nóng)業(yè)大學(xué)植保系劉西莉教授惠贈。試驗前，菌種移入PDA平板培養(yǎng)基中，置于25℃條件下培養(yǎng)48h，活化待用。

1.3 供試培養(yǎng)基

PDA培養(yǎng)基，參照方中達的方法配制［7］。

1.4 試驗方法

1.4.1 單劑抑制作用測定

采用生長速率法進行測定［8］。在預(yù)備試驗的基礎(chǔ)上，將苯醚甲環(huán)唑和噻霉酮分別配成5～8個濃度梯度，向直徑為9cm的培養(yǎng)皿內(nèi)注入1mL不同濃度梯度的待測藥液，然后注入5mL（55～65℃）PDA培養(yǎng)基并搖勻，鋪成一均勻平面，以不含藥培養(yǎng)基為對照。每個處理3次重復(fù)。于培養(yǎng)基平面接種直徑為0.7cm的菌餅（有菌絲一面朝下），置于28℃條件下恒溫培養(yǎng)。待菌絲長至5cm以上，用十字交叉法測量菌落直徑，并計算生長抑制率［9］，并利用Excel求出毒力回歸曲線、EC50值及相關(guān)系數(shù)R。

1.4.2 混劑聯(lián)合毒力測定

根據(jù)單劑毒力測定結(jié)果，以單劑苯醚甲環(huán)唑（A）和噻霉酮（B）的有效中濃度為基礎(chǔ)，按質(zhì)量配比1∶1，1∶2，1∶3，1∶4，1∶5，5∶1，1∶10，10∶1進行藥劑配制，對各個配比的藥劑設(shè)定5～8個濃度梯度，按生長速率法進行測定［8］并求出毒力回歸曲線、EC50值及相關(guān)系數(shù)R。根據(jù)單劑和混劑的EC50值計算共毒系數(shù)（CTC），共毒系數(shù)明顯大于120表示增效作用；大于80但是小于120為相加作用；小于等于80為拮抗作用［10－13］。

2 結(jié)果與分析

2.1 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)S瓜菌核病菌的增效作用

由表1可知，苯醚甲環(huán)唑（A）和噻霉酮（B）對黃瓜菌核病菌的EC50分別是1.035 6mg／L和30.227 3mg／L。在藥劑混配中，當(dāng)A∶B＝1∶1時，共毒系數(shù)是89.29，表明兩種藥劑以1∶1混用時，對黃瓜菌核病菌為相加作用；但當(dāng)苯醚甲環(huán)唑和噻霉酮混配比例為1∶2，1∶3，1∶4，1∶5，5∶1，1∶10，10∶1時，共毒系數(shù)均大于120，表現(xiàn)出增效作用。尤其當(dāng)A∶B＝1∶10時，共毒系數(shù)最大，為519.11，表明苯醚甲環(huán)唑和噻霉酮以1∶10的比例混合使用時對黃瓜菌核病菌的增效作用最明顯。

表1 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)S瓜菌核病菌的增效作用測定結(jié)果

2.2 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)γ藁⒖莶【脑鲂ё饔?/h3>

由表2可知，苯醚甲環(huán)唑（A）和噻霉酮（B）對棉花立 枯 病 菌 的 EC50分 別 是1.211 2mg／L 和30.626 7mg／L。在藥劑混配中，當(dāng) A∶B＝1∶1時，共毒系數(shù)為109.37，表明兩種藥劑以1：1混用時，對棉花立枯病菌為相加作用；但當(dāng)苯醚甲環(huán)唑和噻霉酮混配比例為1∶2，1∶3，1∶4，1∶5，5∶1，1∶10，10∶1時，共毒系數(shù)均大于120，表現(xiàn)出增效作用。而當(dāng)A∶B＝1∶5時，共毒系數(shù)最大，為219.42，表明增效作用最明顯。

表2 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)γ藁⒖莶【脑鲂ё饔脺y定結(jié)果

2.3 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)Ψ言缫卟【脑鲂ё饔?/h3>

表3數(shù)據(jù)顯示，苯醚甲環(huán)唑（A）和噻霉酮（B）對番茄早疫病菌的EC50分別是0.650 9mg／L和20.887 0mg／L。在藥劑混配中，當(dāng) A∶B＝1∶3時，共毒系數(shù)為107.63，表明兩種藥劑以1∶3混用時，對番茄早疫病菌為相加作用；但當(dāng)苯醚甲環(huán)唑和噻霉酮配比為1∶1，1∶2，1∶4，1∶5，5∶1，1∶10時，共毒系數(shù)均大于120，均表現(xiàn)出增效作用。當(dāng)A∶B＝1∶5時，共毒系數(shù)最大，為190.71，表明增效作用明顯。

表3 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)Ψ言缫卟【脑鲂ё饔脺y定結(jié)果

2.4 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)苯诽烤也【脑鲂ё饔?/h3>

由表4可知，苯醚甲環(huán)唑（A）和噻霉酮（B）對辣椒炭 疽 病 菌 的 EC50分 別 是0.742 3mg／L 和43.514 6mg／L。在藥劑混配中，A∶B＝1∶3時共毒系數(shù)為91.39，表明兩種藥劑以1∶3混用時，對辣椒炭疽病菌為相加作用；但當(dāng)苯醚甲環(huán)唑和噻霉酮混配比例為1∶1，1∶2，1∶4，1∶5，5∶1，1∶10，10∶1時，共毒系數(shù)均大于120，表現(xiàn)出明顯的增效作用。當(dāng)A∶B＝1∶2時，共毒系數(shù)最大，為230.66，表明苯醚甲環(huán)唑和噻霉酮以1∶2混用時對辣椒炭疽病菌的增效作用最明顯。

表4 噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑?qū)苯诽烤也【脑鲂ё饔脺y定結(jié)果

續(xù)表4

3 討論

大量研究表明，使用復(fù)配殺菌劑可以達到比殺菌劑單用更好的防治效果，可減少病原菌產(chǎn)生抗藥性的風(fēng)險，還可以大大降低開發(fā)新型殺菌劑的難度［14－18］。目前有關(guān)苯醚甲環(huán)唑與其他殺菌劑的復(fù)配已有不少報道，如苯醚甲環(huán)唑和丙環(huán)唑復(fù)配對水稻紋枯?。≧hizoctoniasolaniKühn）增效［16］、苯醚甲環(huán)唑與嘧菌酯聯(lián)合使用可顯著提高其對馬鈴薯早疫病菌［Alternariasolani（Ellis et Martin）Jones et Grout］的防治效果［17］，多菌靈與苯醚甲環(huán)唑混用對葡萄褐斑?。≒seudocercosporavitis）［18］有明顯增效作用。但噻霉酮與其他殺菌劑聯(lián)合使用的研究報道則很少。

本研究結(jié)果表明，噻霉酮單獨使用對黃瓜菌核病菌、棉花立枯病菌、番茄早疫病菌和辣椒炭疽病菌的毒力比較低，但當(dāng)噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑按適當(dāng)比例混合使用后，毒力明顯增加，對上述4種不同病原菌均表現(xiàn)很好的增效作用。針對不同病原菌，藥劑混用的最佳配比不同。當(dāng)苯醚甲環(huán)唑∶噻霉酮＝1∶2時，兩者混用對辣椒炭疽病菌的增效作用最好；當(dāng)苯醚甲環(huán)唑∶噻霉酮＝1∶5時，兩者混用對棉花立枯病菌和番茄早疫病菌的增效作用最好；當(dāng)苯醚甲環(huán)唑∶噻霉酮＝1∶10時，兩者混用對黃瓜菌核病菌的增效作用最好。噻霉酮與苯醚甲環(huán)唑之間的增效作用，可能與兩者作用機理密切相關(guān)。據(jù)報道，噻霉酮主要破壞病菌細胞核結(jié)構(gòu)，干擾病菌細胞的新陳代謝，使其生理紊亂，最終導(dǎo)致死亡［19］。苯醚甲環(huán)唑則通過抑制病菌細胞麥角甾醇的生物合成而破壞細胞膜的正常功能，使病菌死亡［6］。兩者混合使用，可能增加了藥劑對病菌的作用位點和作用途徑，從而提高了對病菌的毒力。劉學(xué)敏和李立軍曾指出，不同殺菌劑混合后能否產(chǎn)生增效作用，取決于混劑中各個成分的比例及其作用方式和機制［20］，本研究進一步證實了這一觀點。

噻霉酮與苯醚甲環(huán)唑復(fù)配使用，可明顯提高藥劑的毒力，從而可降低噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑的應(yīng)用成本，并有可能延緩病原菌抗藥性的發(fā)生，延長噻霉酮和苯醚甲環(huán)唑的使用壽命。但兩者復(fù)配后在田間對不同病害的實際防治效果如何，還有待進一步深入研究。

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