寧 鵬

（青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院動物醫(yī)學(xué)系，青海 西寧 810016）

衰老是生物體在生命周期中隨年齡增長而發(fā)生的全身組織、器官功能減退和穩(wěn)態(tài)下降的過程。隨著衰老的發(fā)生，動物表現(xiàn)出生產(chǎn)性能下降，抵抗力下降，血液中一些酶的活性降低等情況[1]。

谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）是機(jī)體內(nèi)廣泛存在的一種重要過氧化物分解酶，它在細(xì)胞內(nèi)能夠清除過氧化物，使其分解成對機(jī)體無害的水，阻斷脂質(zhì)過氧化鏈鎖反應(yīng)，從而起到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的作用。谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）含量降低，將會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)過氧化物堆積，細(xì)胞受損，動物機(jī)體出現(xiàn)一系列病理性反應(yīng)，如抵抗力下降、免疫力下降、機(jī)體代謝障礙等[2－5]，從而加速動物機(jī)體的衰老。因此，谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）含量變化與機(jī)體的衰老有密切的關(guān)系 。

本試驗(yàn)通過建立小鼠亞急性衰老模型，觀察中藥復(fù)方對亞急性衰老小鼠部分組織中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）活性的影響，從而研究中藥復(fù)方的抗氧化作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 中藥復(fù)方 將當(dāng)歸40g，川芎40g，桃仁20 g，紅花20g，益母草60g，炮姜20g，甘草15g，過濾出的藥液在電爐上濃縮至500mL，再加紅糖100 g，黃酒50mL，牦牛胎盤粉20g。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)動物 昆明種小鼠60只，6周齡～8周齡，雌雄各半，由青海省實(shí)驗(yàn)動物中心提供。

1.1.3 試劑 D－半乳糖，上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司產(chǎn)品，批號：080711；GSH－Px試劑盒（批號：091231），蛋白定量測試盒（批號：091231），均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)動物分組及處理 小鼠常規(guī)飼養(yǎng)3d，觀察無異常，備用。將小鼠隨機(jī)分為D－半乳糖藥物組、D－半乳糖對照組和對照組，每組20只；D－半乳糖藥物組和D－半乳糖對照組小鼠每天背部皮下注射D－半乳糖0.15mL，對照組注射生理鹽水0.2mL；D－半乳糖藥物組每日口腔灌服中藥復(fù)方0.2mL，D－半乳糖對照組和對照組灌服生理鹽水0.2mL，給藥前分別稱取各組小鼠體重，15d后再分別稱取各組小鼠體重，然后脫頸椎處死所有小鼠，取心肌、肝臟、脾臟、肺臟和腎臟備用。

1.2.2 組織勻漿的制備 取小鼠的心肌、肝臟、脾臟、肺臟和腎臟各0.3g，制成100g／L組織勻漿備用。

1.2.3 GSH－Px活性的測定 按照試劑盒說明分別測定小鼠心肌、肝臟、脾臟、肺臟和腎臟中GSHPx活力。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ˉX±SD）表示，使用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果

2.1 中藥復(fù)方對衰老小鼠體重的影響

15d后D－半乳糖藥物組和對照組與D－半乳糖對照組相比差異顯著（P＜0.05），各組小鼠體重變化結(jié)果見表1。

2.2 中藥復(fù)方對衰老小鼠部分組織中GSH－Px活性的影響

和D－半乳糖對照組相比，中藥復(fù)方能夠顯著提高小鼠肝臟、腎臟中谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）的活性（P＜0.05），極顯著的提高肺臟、心肌和脾臟中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）的活性（P＜0.01）。中藥復(fù)方對衰老小鼠部分組織中GSH－Px活性的影響見表2。

表1 衰老小鼠給藥前后體重變化Table1 Weight changes before and after administrat in aging mice

3 討論

以D－半乳糖制備亞急性衰老模型的方法是目前經(jīng)常選用的建模方法[6]，該模型使機(jī)體細(xì)胞內(nèi)半乳糖濃度增高，在醛糖還原酶催化下還原成半乳糖醇，這種物質(zhì)不能被細(xì)胞進(jìn)一步代謝而堆積體內(nèi)影響正常滲透壓，導(dǎo)致細(xì)胞代謝紊亂，破壞機(jī)體抗氧化防御系統(tǒng)使自由基積聚，導(dǎo)致衰老[7－8]。在衰老機(jī)制研究中[9－10]，超氧自由基學(xué)說已受到廣泛的關(guān)注，動物衰老的過程中體內(nèi)超氧自由基含量不斷增多，自身的抗氧化系統(tǒng)活性降低是主要原因之一。

GSH－Px是機(jī)體內(nèi)廣泛存在的一種重要的催化分解過氧化氫（H2O2）的酶，它的活性升高能夠降低脂類過氧化物的形成，分解過多的過氧化物，減輕組織細(xì)胞過氧化損傷，起到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整性的作用[11]。

表2 中藥復(fù)方對衰老小鼠GSH－Px活性的影響Table2 The effect of traditional Chinese medicine compound on the activity of GSH－Px

GSH－Px活性降低機(jī)體清除自由基代謝產(chǎn)物的能力的下降，標(biāo)志著機(jī)體衰老的加快和老年疾病的增多。因此，小鼠機(jī)體內(nèi)GSH－Px活性的高低，可作為衡量該制劑抗氧化功能的重要指標(biāo)之一[12]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，中藥復(fù)方能提高小鼠組織中GSH－Px的活性，具有較強(qiáng)的抗氧化和抗衰老的作用。

[1]陳執(zhí)中.新的衰老分子機(jī)制與抗衰老新藥的研發(fā)[J].食品與藥品，2011，13（7）：283－285.

[2]陳 勉，朱希強(qiáng).超氧化物歧化酶在醫(yī)藥臨床上的研究和應(yīng)用食品與藥品，食品與藥品，2009，11（9）：44－47.

[3]王樹人.自由基與疾病：病理生理學(xué)[M].北京：北京人民衛(wèi)生出版社，2004：94.

[4]修曉娜，史遠(yuǎn)剛，關(guān)偉軍，等.自由基與人類衰老[J].中華現(xiàn)代中醫(yī)學(xué)雜志，2008，4（2）：108－112.

[5]歐陽昌漢，吳基良，李立中.黃芩甙對大鼠心肌缺血再灌注所致脂質(zhì)過氧化損傷的保護(hù)作用[J].咸寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2001，15（1）：32－34.

[6]徐云鳳，趙 雨，張 惠，等.人參蛋白對小鼠的耐缺氧及抗氧化 作用[J].食品科技，2012，37（3）：79－82.

[7]胡 斌，申學(xué)林，朱秋勁.含抗氧化成分的牛肉料對模型小鼠抗衰老的作用[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（7）：165－168.

[8]吳 驍，王 光，李 彥，等.黃芪注射液對D－半乳糖所致衰老小鼠的免疫、衰老和血脂指標(biāo)的影響[J].實(shí)驗(yàn)動物科學(xué)，2011，28（6）：7－9.

[9]李文楚，章 羽，陳芳艷.超氧化物歧化酶研究及應(yīng)用概況[J].廣東蠶業(yè)，2008，42（1）：45－49.

[10]崔云華，王曉玲，劉 晴，等.丹參酸乙的抗氧化作用對大鼠肝星狀細(xì)胞增生的影響[J].世界華人消化雜志，2002，10（3）：317－319.

[11]宋麗霞，敖長金，藺婷娟，等.沙蔥多糖對肉羊抗氧化能力的影響[J].中國畜牧雜質(zhì)，2012，48（1）：56－58.

[12]印大中.衰老奧秘研究最新進(jìn)展：自由基氧化－非酶糖基化衰老學(xué)說[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2005，14（1）：7－10.