馬宏偉 謝輝

紅細(xì)胞意外抗體鑒定在輸血安全中的重要作用

馬宏偉 謝輝

目的檢測(cè)分析患者血清中紅細(xì)胞意外抗體的特異性和分布。方法使用鹽水介質(zhì)法、聚乙二醇間接抗球蛋白法和微柱凝膠法對(duì)患者血清進(jìn)行意外抗體特異性鑒定。結(jié)果149例患者標(biāo)本中，57例僅存在自身抗體，88例僅存在同種抗體，4例同時(shí)存在自身抗體和同種抗體。同種抗體包括5個(gè)血型系統(tǒng)，分別為Rh系統(tǒng)(77.1%)、MNS系統(tǒng)(16.3%)、Lewis系統(tǒng)(3.3%)、P系統(tǒng)(2.2%)和Duffy系統(tǒng)(1.1%)。Rh系統(tǒng)抗體分布為:抗-E(39.4%)、抗-cE(29.7%)、抗-D(12.7%)、抗-Ce(5.6%)、抗-DC(4.2%)、抗-C(4.2%)、抗-e(2.8%)和抗-c(1.4%)。結(jié)論意外抗體的鑒定有助于患者獲得相容性血液，保障臨床輸血安全有效。

血型;意外抗體;抗體鑒定;輸血安全

輸血前檢測(cè)的目的是選擇與患者相配合的血液，避免發(fā) 生溶血性輸血反應(yīng)，達(dá)到輸血治療的效果。意外抗體是指除天然發(fā)生的抗A、抗B以外的其他紅細(xì)胞抗體，主要包括同種抗體和自身抗體兩大類［1］。意外抗體鑒定是輸血前檢測(cè)的重要內(nèi)容，通過檢出有臨床意義的抗體，對(duì)解決疑難交叉配血、確保輸血安全具有重要意義。我們對(duì)輸血前149例抗體篩選陽性的標(biāo)本進(jìn)行了抗體特異性鑒定，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 2010年6月至2011年6月送檢的抗體篩選陽性和疑難交叉配血標(biāo)本149例，其中男44例，女105例。

1.2 主要試劑和儀器 抗-A、抗-B、ABO標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞、紅細(xì)胞血型抗體篩選細(xì)胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)、抗-M、抗P1、2-巰基乙醇(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司);抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e、抗-Lea、抗-Fya、試劑譜細(xì)胞、聚乙二醇(PEG)、抗球蛋白試劑(美國(guó)Immucor公司);微柱凝膠檢測(cè)卡、免疫微柱孵育器、卡式離心機(jī)(長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司);血型血清學(xué)專用離心機(jī)(日本Kubota公司);電熱恒溫水溫箱(上海醫(yī)療器械廠)。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本的處理 輸血前3 d內(nèi)采集的患者靜脈血液5 ml，EDTA充分抗凝避免纖維蛋白干擾，離心分離血漿和紅細(xì)胞，用生理鹽水制備3%的紅細(xì)胞懸液。

1.3.2 抗體鑒定 參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》［2］，采用鹽水介質(zhì)試驗(yàn)進(jìn)行患者IgM抗體的鑒定，采用PEG間接抗球蛋白試驗(yàn)和微柱凝膠試驗(yàn)進(jìn)行IgG抗體的鑒定，根據(jù)16個(gè)譜細(xì)胞和患者自身細(xì)胞的反應(yīng)格局確定抗體特異性，同時(shí)檢測(cè)患者紅細(xì)胞上相應(yīng)抗原，證實(shí)意外抗體的特異性。

2 結(jié)果

2.1 意外抗體分布 149例患者標(biāo)本中，僅存在自身抗體的標(biāo)本57例，占38.2%;僅存在同種抗體的標(biāo)本88例，占59.1%;同時(shí)存在自身抗體和同種抗體的標(biāo)本均為Rh系統(tǒng)特異性抗體，共4例，占2.7%。57例僅存在自身抗體的標(biāo)本中，有抗體特異性的標(biāo)本3例，占5.3%，其余抗體未檢出特異性。存在同種抗體的92例標(biāo)本中，抗體包括5個(gè)血型系統(tǒng)，Rh系統(tǒng)71例，占77.1%;MNS系統(tǒng)15例，占16.3%; Lewis系統(tǒng)3例，占3.3%;P系統(tǒng)2例，占2.2%;Duffy系統(tǒng)1例，占1.1%。存在同種抗體的患者中，79例存在輸血史和/或妊娠史，占85.9%。

2.2 Rh血型系統(tǒng)抗體分布 71例Rh系統(tǒng)同種抗體中，抗-E 28例，占39.4%;抗-cE 21例，占29.7%;抗-D 9例，占12.7%;抗-Ce 4例，占5.6%;抗-DC 3例，占4.2%;抗-C 3例，占4.2%;抗-e 2例，占2.8%;抗-c 1例，占1.4%。

3 討論

臨床輸血工作中，獲得相容性血液是保證輸血治療效果的關(guān)鍵。輸血前實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的主要內(nèi)容包括ABO及RhD血型鑒定、交叉配血試驗(yàn)及意外抗體檢測(cè)，通過輸血前檢測(cè)避免不相容血液的輸注，使輸入患者體內(nèi)的紅細(xì)胞存活期符合預(yù)期，從而達(dá)到輸血治療的目的［3］。由于研究對(duì)象、研究范圍以及使用檢測(cè)方法的不同，意外抗體在人群中的比例為0.17% ～9.48%不等［4，5］。隨著輸血醫(yī)學(xué)的發(fā)展，已經(jīng)有很多檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用于意外抗體鑒定。聚乙二醇能夠促使抗原抗體分子更加接近，從而增強(qiáng)意外抗體的檢出。微柱凝膠方法通過應(yīng)用分子篩作用的凝膠介質(zhì)，極大地提高了檢測(cè)靈敏度。我們同時(shí)采用PEG間接抗球蛋白法和微柱凝膠法進(jìn)行抗體鑒定，確保了檢測(cè)結(jié)果的可靠性。

我們對(duì)149例抗體篩選陽性的患者標(biāo)本進(jìn)行了抗體鑒定，檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)92例標(biāo)本中存在同種抗體，同種抗體分布的血型系統(tǒng)依次為Rh系統(tǒng)＞MNS系統(tǒng)＞Lewis系統(tǒng)＞P系統(tǒng)＞Duffy系統(tǒng)。Rh血型系統(tǒng)抗體比例高達(dá)77.1%，其次為MNS系統(tǒng)，比例達(dá)16.3%，其他系統(tǒng)抗體比例較低。在Rh血型系統(tǒng)的抗體中，各抗體的頻率依次為抗-E＞抗-cE＞抗-D＞抗-Ce＞抗-DC＞抗-C＞抗-e＞抗-c，其中抗-E和抗-cE的比例分別達(dá)到39.4%和29.7%，均高于抗-D 12.7%的比例。研究表明，我國(guó)同種意外抗體的發(fā)生主要集中在Rh血型系統(tǒng)，該系統(tǒng)中又以抗-E、抗-cE以及抗-D為主，目前RhD抗原檢測(cè)已經(jīng)作為輸血前血型檢測(cè)的常規(guī)內(nèi)容，建議對(duì)需要反復(fù)輸血的患者進(jìn)行E抗原檢測(cè)，降低抗-E產(chǎn)生的比例。同種抗體主要是由于妊娠或輸血等免疫刺激而產(chǎn)生，本研究中92例存在同種抗體的患者中有79例存在輸血史和/或妊娠史，占85.9%，因此對(duì)育齡女性要加強(qiáng)宣傳，盡量減少流產(chǎn)等引起的紅細(xì)胞同種免疫，同時(shí)對(duì)多次輸血的患者應(yīng)積極開展Rh表型的檢測(cè)，盡可能輸注表型配合的血液，減少同種抗體的發(fā)生。

患者血清中意外抗體的存在往往會(huì)對(duì)交叉配血造成影響，導(dǎo)致配血困難，影響患者治療。我們通過意外抗體鑒定盡可能檢出患者血清中存在的有臨床意義的抗體，進(jìn)一步檢查患者紅細(xì)胞表面相應(yīng)的抗原，證實(shí)意外同種抗體的特異性，根據(jù)抗體鑒定結(jié)果提前進(jìn)行備血，在供血者中篩選出相應(yīng)抗原陰性的血液，給患者提供相容性血液，解決疑難交叉配血問題，保障了患者的血液供應(yīng)和用血安全。

［1］ Pahuja S，Pujani M，Gupta SK，et al.Alloimmunization andred cellautoimmunization in multitransfused thalassemics of Indian origin．Hematology，2010，15(3):174-177．

［2］ 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程．第3版．江蘇:東南大學(xué)出版社，2006:266-271．

［3］ Downes KA，Shulman IA.Pretransfusiontestingpractices in North America，2005-2010:an analysis of the College Of American Pathologists Interlaboratory Comparison Program J-survey data，2005-2010．Arch Pathol Lab Med，2012，136(3):294-300．

［4］ 吳擘颋，姚頂根，戎瑞明.住院患者紅細(xì)胞血型同種不規(guī)則抗體特征分析．中華醫(yī)學(xué)雜志，2011，91(24):1691-1693．

［5］ Gupta R，Singh DK，Singh B，et al.Alloimmunization to red cells in thalassemics:emerging problem and future strategies．Transfus Apher Sci，2011，45(2):167-170．

Im portanceof unexpected red cell antibody identification in clinicaltransfusion safety

MAHong-Wei，XIE Hui.Henan Red Cross Blood Center，Zhengzhou 450012，China;Zhengzhou people's hospital，Zhengzhou 450003，China

ObjectiveToinvestigatethespecificityanddistributionofunexpected antibodies in patients serum.MethodsUnexpected antibodies were identified using saline tube test，PEG indirect antiglobulin test and microcolumn gelagglutination assay.Results57 cases were found only with autoantibody，88 cases were found only with alloantibody，4 cases were found with autoantibody and alloantibody.The alloantibodies were found in 5 blood group systems including Rh(77.1%)、MNS(16.3%)、Lewis(3.3%)、P(2.2%)and Duffy (1.1%).Antibodies to Rh system included anti-E(39.4%)，anti-Ce(29.7%)，anti-D(12.7%)，anti-Ce (5.6%)，anti-DC(4.2%)，anti-C(4.2%)，anti-e(2.8%)and anti-c(1.4%).ConclusionIdentification of unexpected antibodies was help for obtaining compatible blood and improving transfusion safety．

Blood group;Unexpected antibody;Antibody identification;Transfusion safety

河南省衛(wèi)生科技創(chuàng)新人才工程專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)資助(項(xiàng)目編號(hào):2109901)

450012鄭州，河南省紅十字血液中心血型研究室(馬宏偉);鄭州人民醫(yī)院檢驗(yàn)科(謝輝)