王慶敏，唐 瑛，時粉周，沈 俊，劉秋紅，戴圣龍

哺乳動物近日節(jié)律的研究進展

王慶敏，唐 瑛，時粉周，沈 俊，劉秋紅，戴圣龍

近日節(jié)律是一種以近似24 h為周期的節(jié)律，起著調(diào)控機體生命活動的作用。它主要依賴中樞振蕩器、外周振蕩器和外界的因素來共同維持其正常運行。在外界環(huán)境因素(導引因子)的影響下，近日節(jié)律能夠被重新設(shè)置，使哺乳動物自身機體活動與外界同步、處于最佳狀態(tài)。這些導引因子包括光、食物、社會因子、某些化學物質(zhì)(如褪黑素、激素等)。本文綜述了這一進展，并展望導引近日節(jié)律在各領(lǐng)域應用的前景。

近日節(jié)律;導引因子;哺乳動物

人類經(jīng)過長時間、大量的科學實驗與觀察證實，隨著漫長的空間、時間和物質(zhì)的不斷演化，地球上的生物體在適應這種演化的過程中，從單個細胞到高等動植物以及人類自身，均存在著按照一定規(guī)律運行的、周期性的生命活動現(xiàn)象，這種生命活動現(xiàn)象經(jīng)過大量的實驗研究證明是明顯的節(jié)律性活動，稱為生物節(jié)律。根據(jù)周期的長短，生物節(jié)律可分為近日節(jié)律(又稱晝夜節(jié)律，circadian rhythm)、超日節(jié)律(ultradian rhythm)和亞日節(jié)律(infradian rhythm)。近日節(jié)律通常是指周期在24 h左右的生物節(jié)律。

近日節(jié)律是內(nèi)源性的，它是生物體在進化過程中為抵御自然環(huán)境，如射線、氣溫、光照等周期變化的影響，而逐漸形成機體內(nèi)在的生物節(jié)律，并表現(xiàn)出與自然環(huán)境的周期性變化相似。人體的許多生命活動，如睡眠與覺醒、饑餓與口渴、血壓、心臟收縮次數(shù)、體溫、激素水平、免疫系統(tǒng)的活動等都隨著白天和黑夜的交替而發(fā)生著變化，呈現(xiàn)出固有的近日節(jié)律現(xiàn)象。近日節(jié)律的破壞會導致機體功能紊亂及疾病發(fā)生，如紊亂的近日節(jié)律會增加女性乳腺癌的發(fā)病危險。有些節(jié)律一旦遭到破壞，生命就要停止。

1 哺乳動物近日節(jié)律生物學基礎(chǔ)

近日節(jié)律是生物體生命活動的固有屬性和內(nèi)在規(guī)律?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)機體具有產(chǎn)生調(diào)控近日節(jié)律的系統(tǒng)和機制。這一系統(tǒng)的核心是一組能自律地產(chǎn)生震蕩信號的腦內(nèi)結(jié)構(gòu)，即震蕩器(oscillator)［1］。其中起主導作用的是起搏器(pace-maker)。震蕩器通過特定的感受器和感覺傳入通路，接受環(huán)境授時因子(zeitgeber)的導引作用，使其與環(huán)境節(jié)律同步;同時，它發(fā)出震蕩信號(周期性變化的神經(jīng)信號或體液因素)去影響其他各生理機能系統(tǒng)，使它們的活動按一定的節(jié)律進行。

1.1 中樞振蕩器

不同種屬的生物，其中樞起搏器結(jié)構(gòu)及震蕩機制不盡相同。對于哺乳類動物節(jié)律的組成和機能原理，Moore等提出多震蕩器系統(tǒng)假說(multiple oscillator system，MOS)，認為哺乳類動物的生物節(jié)律是由多級震蕩器的協(xié)同作用所產(chǎn)生和調(diào)制的，并指出視交叉上核(SCN)是此震蕩器的重要成分，稱為主震蕩器［2-3］。該處的神經(jīng)元中一組與生物節(jié)律有關(guān)的基因(稱為近日鐘基因)在自身表達調(diào)控形成一個自激振蕩的環(huán)路而不斷的自激振蕩下去，這種自激振蕩過程完成一個周期大約要24 h，形成了近日節(jié)律，然后通過傳出途徑將這種自激振蕩產(chǎn)生的近日節(jié)律傳導出去，形成機體各種生物變量(如行為、生理、代謝等生物變量)的近日節(jié)律。環(huán)境中的各種授時因子需要通過它的耦聯(lián)作用才能產(chǎn)生致同步作用。在體和離體實驗均已證實SCN神經(jīng)元呈周期約為24 h的晝夜性變化。光信號和某些化學物質(zhì)(如褪黑素等)可導引SCN的節(jié)律性活動。因此，SCN又稱為節(jié)律的“中樞起搏點”。

1.2 松果體(pineal gland，PG)

PG是近日節(jié)律的神經(jīng)內(nèi)分泌轉(zhuǎn)換器，主要通過PG細胞合成和分泌的褪黑素(melatonin，Me1)參與近日節(jié)律調(diào)控［4-5］。由于存在視交叉上核(SCN)-室旁核-PG的纖維通路，Mel的合成在SCN的調(diào)控下呈現(xiàn)明顯的晝低夜高節(jié)律性。Mel經(jīng)循環(huán)通路到達身體各個部位，與 Mel受體結(jié)合后，才能有效調(diào)節(jié)24 h時相效應。Mel可分布于包括SCN在內(nèi)的廣大范圍的中樞神經(jīng)系統(tǒng)、視網(wǎng)膜、副淚腺、腸道、肝、腎、脾、性腺、胸腺、外周血細胞等，它不僅參與調(diào)節(jié)這些器官系統(tǒng)的功能，同時將外界光照周期信號更為有效地以近日節(jié)律的形式輸送到體內(nèi)各個組織和器官，所以PG被認為是神經(jīng)內(nèi)分泌轉(zhuǎn)換器。而Mel又可通過SCN中Mel受體反過來作用于SCN，從而調(diào)節(jié)機體的近日節(jié)律。所以Mel被稱為內(nèi)源性的授時因子。PG中Mel的表達呈晝低夜高的趨勢，該表達趨勢可能與其內(nèi)的鐘基因(Clock、NAT、Per等)調(diào)控有關(guān)。

2 近日節(jié)律導引的研究

在自然環(huán)境調(diào)節(jié)下，生物體的活動性總是與環(huán)境變化相同步，兩者間形成固定的聯(lián)系。近日節(jié)律雖然是內(nèi)源性產(chǎn)生的，但受環(huán)境因素的影響。研究表明，光照、溫度、飲食、社會因素、多種化學物質(zhì)(如激素、維生素、氨基酸、血清等)對近日節(jié)律都具有重新調(diào)節(jié)設(shè)置的作用［6-8］。當機體受到環(huán)境中某些因素的刺激時，近日節(jié)律會發(fā)生一定的變化，主要是節(jié)律相位轉(zhuǎn)移，表現(xiàn)為超前或滯后。機體節(jié)律因外界環(huán)境刺激而發(fā)生的相位改變，稱為相位反應。刺激因子性質(zhì)不同，影響相位反應的方向(超前或遲后)和大小(相位移動的時間長短)不同。

2.1 近日節(jié)律導引機制研究

近年來研究發(fā)現(xiàn)，環(huán)境授時因子對近日節(jié)律的導引作用是通過兩種不同的方式實現(xiàn)的，一種是環(huán)境授時因子(如光暗周期等時間信息)通過視網(wǎng)膜的非成像感光系統(tǒng)—晝夜光感受系統(tǒng)，感受明暗周期光信號變化，并經(jīng)視網(wǎng)膜丘腦下部束(RHT)途徑作用于SCN，而對內(nèi)源性節(jié)律產(chǎn)生導引作用，這一模式稱為視網(wǎng)膜光性傳感模式(retinal photo transduction，RP)，通過這一途徑發(fā)揮導引作用的授時因子稱為光性授時因子。這一模式對內(nèi)源性節(jié)律導引的特點是光信息在受試者主觀夜間(subjective night)起作用，在夜間的前半期引起相位滯后，而在后半期引起相位超前。其傳入途徑是視網(wǎng)膜丘腦下部束(Pd-IT)，該束影響SCN的遞質(zhì)被認為是興奮性氨基酸谷胺酸、天門冬胺酸。光周期是影響近日節(jié)律基因表達進而調(diào)控生物節(jié)律的主要環(huán)境因子，它們對生物鐘基因表達的調(diào)控機制存在著保守性和特異性。

另一種模式是視網(wǎng)膜外的非光性時間信息，如社會因素、視網(wǎng)膜外的光刺激、食物、社會因子、藥物、特定的行為活動等，對SCN的作用可能是通過視網(wǎng)膜外的途徑而實現(xiàn)，這種模式稱為視網(wǎng)膜外光傳感模式(extraocular photo transduction，EP)，這一途徑可能是經(jīng)神經(jīng)和體液光受體傳導(humoral photoreceports，HP)而實現(xiàn)的，外側(cè)膝狀體間小葉(intergeniculate leaftlet，IGL)在EP模式中的神經(jīng)傳導中起重要作用，IGL通過膝丘束(genicu lohypothalamic tract，GHT)作用于SCN。這一模式對內(nèi)源性節(jié)律導引作用與RP模式剛好相反，其作用主要在白天，在受試者主觀白天(subjective day)引起相位超前作用，在夜間，特別是在后半夜引起相位滯后。

2.2 近日節(jié)律的導引研究

2.2.1 光信息導引節(jié)律的研究

早在19世紀50年代，Pittendrigh就發(fā)現(xiàn)果蠅羽化在持續(xù)黑暗中沒有明顯的節(jié)律，然而，其節(jié)律可以被光誘導。通過單個短暫的脈沖光照，果蠅羽化出現(xiàn)明顯的節(jié)律。這是最早的有關(guān)光照調(diào)節(jié)近日節(jié)律的研究。隨后Pittendrigh和De-Coursey等測定了動物近日節(jié)律對光照刺激相位反應，并作出了相位反應曲線，其相位反應的模式為在主觀白天，對光線沒有明顯的反應，稱為不應區(qū);主觀夜間的早期給予光刺激可引起相位滯后，在主觀夜間的后期給予光刺激則引起相位超前。Lewy和他的同事們證明了明亮的白光在夜間能夠抑制人體Mel的分泌，使夜間人體Mel的水平與日間持平從而可以調(diào)節(jié)人體的近日節(jié)律，他們通過該原理來治療季節(jié)性情緒紊亂癥。后來，研究發(fā)現(xiàn)不同的光照波長可以對Mel合成產(chǎn)生不同的影響，短波光源相對于長波光源更容易影響人體的近日節(jié)律。Wright等［9］用不同波長的LED的光源與標準光源分別對健康志愿者進行夜間2 h的光照，次日收集唾液標本，觀察其夜間唾液中Mel分泌的水平及時相變化。結(jié)果顯示，光刺激下可出現(xiàn)顯著的Mel分泌抑制，藍/綠LED光源產(chǎn)生最大抑制，這表明不同波長的光對近日節(jié)律的影響效果不同。

人體在近日節(jié)律的生理變化中，體溫的變化是一個重要的方面。在夜間睡眠時人的核心溫度下降，而在白天覺醒時體溫則升高，研究者也常常通過檢測體溫來間接反映近日節(jié)律的變化。Morita和Tokura［10］的實驗表明：人體在夜間睡眠前暴露于高色溫光源，能明顯抑制夜間體溫的下降和Mel分泌的升高，而同樣照度的低色溫的紅光抑制作用不明顯，這說明不同的光源色溫對近日節(jié)律的影響是不同的。在國外，利用光刺激來調(diào)節(jié)民航飛行員的近日節(jié)律、提高警覺性，從而來保障飛行任務的完成。美國科學家也利用光刺激來調(diào)節(jié)機體睡眠和近日節(jié)律，打算將該措施應用于調(diào)節(jié)太空中宇航員的生物節(jié)律。

2.2.2 非光信息導引節(jié)律的研究

近10余年來時間生物學在非光性相位轉(zhuǎn)移方面研究進展很大，人們發(fā)現(xiàn)一些藥物、食物、社會因子、某些新異的環(huán)境、特定的行為活動等刺激都能導引節(jié)律相位的轉(zhuǎn)移［6-8］，其位相響應曲線(PRC)與光性轉(zhuǎn)移迥然有別，主要表現(xiàn)為在受試對象主觀白天引起相位超前作用，在夜間，特別是后半夜呈現(xiàn)相位滯后。其中對于5-HT1A/7受體亞型激動劑82-OHDPAT的研究較為成熟，Shibata等［11］證實82-OHDPAT導引的相位反應與經(jīng)典光性反應模式截然不同，呈典型的非光性反應，表現(xiàn)為在主觀白天中午引起相位超前，在主觀夜間的后期引起相位滯后。是目前常用于研究非光性授時因子的經(jīng)典藥物。我國研究者開展了用針刺來調(diào)節(jié)近日節(jié)律的研究，魏焦祿等［12］的研究表明針刺是一種授時因子，可以引起金黃地鼠近日節(jié)律的相位改變，于CT6、CT9電針導引金黃地鼠自發(fā)活動相位超前，而在CT18、CT21則使其相位遲后，其余時相點無明顯相位轉(zhuǎn)移作用。

3 展望

采用各種導引因子來導引人體的近日節(jié)律有著廣闊的應用前景，如應用在：時差綜合癥;輪班工作;抑郁癥;季節(jié)性情感障礙;特殊職業(yè)節(jié)律的導引，如航空航天專業(yè)、潛艇專業(yè)領(lǐng)域、航海領(lǐng)域(如長航)等。在特殊職業(yè)中進行節(jié)律的導引，主要目的在于通過節(jié)律的調(diào)節(jié)使機體內(nèi)部的節(jié)律與工作環(huán)境同步，從而保持人體的作業(yè)效率。

分子生物學的誕生把生命科學和醫(yī)學從宏觀帶入了微觀世界，引起了生命科學的一場革命。在基礎(chǔ)理論研究方面，雖然目前近日節(jié)律的生物基礎(chǔ)已經(jīng)基本明確，但更深入的機制尚待進一步闡明，如在中樞振蕩器和外周振蕩器中的近日節(jié)律基因如何被調(diào)控、其中存在哪些信號傳導通路等。這些都需要依賴日新月異的分子生物學手段來實現(xiàn)。

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R338.5

A

1009-0754(2012)01-0061-03

海軍醫(yī)學研究所所基金(10HY51)

200433 上海，海軍醫(yī)學研究所航空醫(yī)學研究室(王慶敏、時粉周、沈俊、劉秋紅、戴圣龍)，實驗動物中心(唐瑛)

1.3 外周振蕩器

不僅下丘腦存在晝夜振蕩器，外周器官如肝、腎、淋巴結(jié)等均可表達一種或多種生物鐘基因，存在外周振蕩器。外周振蕩器自振蕩產(chǎn)生近日節(jié)律，但是外周的近日節(jié)律通常受中樞近日節(jié)律的調(diào)控而與中樞同步。

2011-04-08)

(本文編輯：林永麗)