趙光日

（廣州醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院，廣東 廣州 510095）

PCNA及Mina53表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌放射敏感性的關(guān)系

趙光日

（廣州醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院，廣東 廣州 510095）

本研究探討增殖細(xì)胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen，PCNA）與 Mina53在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)極其與放療患者療效的相關(guān)性，從而為早期預(yù)測(cè)非小細(xì)胞肺癌放療敏感性提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2009年1月至2010年1月我院收治的非小細(xì)胞肺癌患者共59例。男41例，女18例。年齡51－77歲，平均62.5±9.3歲。病理類型中鱗癌26例，腺癌28例，鱗腺癌3例，大細(xì)胞癌2例?；颊卟±矸制诎碪ICC1997年肺癌術(shù)后病理分期標(biāo)準(zhǔn)劃分：Ⅰ期23例，Ⅱ期19例，Ⅲ期17例。伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者21例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者38例。高分化13例，中分化31例，低分化15例。所有入選患者符合以下條件：1）無手術(shù)指征或者未接受過放療。3）患者經(jīng)臨床纖支氣管鏡或穿刺活檢證實(shí)為非小細(xì)胞肺癌。3）患者預(yù)計(jì)生存期＞3個(gè)月。

1.2 放療方法

放療設(shè)備：美國(guó)瓦里安公司，模擬機(jī)Acuity，計(jì)劃系統(tǒng)Eclipse，加速器Varian 23EX。對(duì)所有患者進(jìn)行C4-L2椎體下緣行螺旋CT增強(qiáng)掃描，確定肉眼腫瘤區(qū)以及周圍正常組織的范圍，再進(jìn)一步確定臨床靶區(qū)、計(jì)劃靶區(qū)以及需要保護(hù)的敏感器官。行常規(guī)分割放療，治療總劑量為60－70Gy／30－35f，6周完成放療。

1.3 免疫組化處理

所有切片來自于非小細(xì)胞肺癌患者行病理活檢后的標(biāo)本，福爾馬林固定后行石蠟包埋并制成4μm厚的切片。每份標(biāo)本分別行PCNA與Mina53蛋白免疫組化染色。鼠抗PCNA單克隆抗體購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)有限公司。鼠抗人Mina53單克隆抗體購(gòu)自美國(guó)Invitrogen公司?？乖⒉ㄐ迯?fù)后進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。PCNA與Mina53蛋白的表達(dá)均位于細(xì)胞核中，其中陽性細(xì)胞核為棕黃色。每例選取5個(gè)高倍視野，鏡下每視野中選取100個(gè)腫瘤細(xì)胞中的陽性細(xì)胞數(shù)，其中未見陽性細(xì)胞表示（－）、陽性細(xì)胞＜25%為（＋）、陽性細(xì)胞在25%～50%為（＋＋）、陽性細(xì)胞＞50%為（＋＋＋）。

1.4 療效評(píng)估

根據(jù)WHO的療效評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)，放療結(jié)束后1－2個(gè)月行胸部增強(qiáng)CT檢查腫瘤消退情況，分為完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、無變化（NR）以及病情進(jìn)展（PD），CR＋PR／總數(shù)＊100%為計(jì)算有效率。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0對(duì)59例非小細(xì)胞肺癌患者與放療敏感相關(guān)性進(jìn)行分析，資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示；資料采用卡方檢驗(yàn)和非參秩和Mann-Whitney U檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 非小細(xì)胞肺癌患者放療有效率

所有59例患者中CR12例（20.3%），PR22例（37.3%），NR16例（27.1%），PD9例（15.3%），其中患者總放療有效率為54.8%。見表1。

表1 非小細(xì)胞肺癌患者放療有效率

2.2 PCNA蛋白表達(dá)與放療療效的相關(guān)性

PCNA蛋白表達(dá)按照染色結(jié)果（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分組顯示，放療后患者有效率依次為27.3%、46.1%、64.7%、77.8%，組間對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。表示PCNA蛋白表達(dá)與放療療效呈正相關(guān)。見表2。

表2 PCNA蛋白表達(dá)與放療療效的相關(guān)性

2.3 Mina53蛋白表達(dá)與放療療效的相關(guān)性

Mina53蛋白表達(dá)與放療療效的相關(guān)性對(duì)比，患者按染色結(jié)果（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分組顯示，放療后患者有效率依次為83.3%、66.7%、42.8%、33.3%，組間對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。表示Mina53蛋白表達(dá)與放療療效呈負(fù)相關(guān)。見表3。

表3 Mina53蛋白表達(dá)與放療療效的相關(guān)性

3 討論

PCNA是由Miyachi于1978年在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的血清中首次發(fā)現(xiàn)并命名，其因只存在于正常增殖細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞內(nèi)而得名。PCNA是一種36kDa的酸性無組蛋白細(xì)胞核多肽，其表達(dá)與細(xì)胞增殖周期密切相關(guān)，可以反映細(xì)胞增殖程度以及所處的周期，并用于對(duì)良惡性腫瘤鑒別及腫瘤惡性程度的評(píng)估［1］。既往研究表明PCNA指數(shù)與放療敏感性呈現(xiàn)正相關(guān)，本研究通過探討發(fā)現(xiàn)PCNA在非小細(xì)胞肺癌中免疫組化的陽性表達(dá)率與放療敏感性的相關(guān)性，研究結(jié)果顯示患者按染色結(jié)果（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分組顯示，放療后患者有效率分別為27.3%、46.1%、64.7%、77.8%。組間對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。表示PCNA蛋白表達(dá)與放療療效呈現(xiàn)正相關(guān)。其可能的原因在于PCNA增殖指數(shù)較高的腫瘤組織中進(jìn)入細(xì)胞增殖周期的腫瘤細(xì)胞數(shù)量較多，而此類進(jìn)入增殖周期的細(xì)胞對(duì)放療更加敏感。

Mina53是分子量為53KD的一個(gè)新基因，其表達(dá)由C-myc直接誘導(dǎo)［2，3］。研究報(bào)道，人類結(jié)腸癌、胃癌、食管癌、淋巴結(jié)瘤、肺癌以及腎細(xì)胞癌中均存在著 Mina53的表達(dá)［4］，譚小平等人［5］研究 Mina53在結(jié)腸癌中的表達(dá)及與各臨床病理特征和腫瘤增殖活性的關(guān)系中，運(yùn)用PCR分別檢測(cè)51例結(jié)腸癌、19例結(jié)腸腺瘤和20例正常結(jié)腸組織Mina53mRNA的表達(dá)，結(jié)果顯示結(jié)腸癌組織Mina53mRNA的表達(dá)明顯高于結(jié)腸腺瘤及正常結(jié)腸組織；而與腫瘤的組織分化程度、臨床分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均相關(guān)，表明Mina53的表達(dá)與腫瘤的惡性程度密切相關(guān)。而Mina53與非小細(xì)胞肺癌放療敏感性的相關(guān)性研究國(guó)內(nèi)外并未涉及，本研究Mina53蛋白表達(dá)與放療療效的相關(guān)性對(duì)比中，患者按染色結(jié)果（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分組顯示，放療后患者有效率分別為83.3%、66.7%、42.8%、33.3%，組間對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。表示Mina53蛋白表達(dá)與放療療效呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)。

綜上所述，本研究探討了PCNA和Mina53蛋白在59例非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及其與放療療效的相關(guān)性。結(jié)果顯示PCNA蛋白表達(dá)的增加放療效果較好，Mina53蛋白表達(dá)的增強(qiáng)放療效果較差，PCNA和Mina53蛋白在預(yù)測(cè)非小細(xì)胞肺癌的放療療效中均有一定的作用，從而為非小細(xì)胞放療敏感性的早期診斷提供依據(jù)。

［1］Zhao Y，Li XJ，Sui X，et al.Expression and significance of PCNA and Caspase-3in the tissue of lung cancer［J］.Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi，2010，26（2）：154.

［2］Tsuneoka M，Koda Y，Soejima M，et al.A novel myc target gene，mina53，that is involved in cell proliferation［J］.J Biol Chem，2002，277（38）：35450.

［3］Fukahori S，Yano H，Tsuneoka M，et al.Immunohistochemical expressions of Cap-43and mina53proteins in neuroblastoma［J］.J Pediatr Surg，2007，42（11）：1831.

［4］Kazutoshi Komiya，Naoko Sueoka-Aragane，Akemi Sato，et al.Mina53，a novel c-Myc target gene，is frequently expressed in lung cancers and exerts oncogenic property in NIH／3T3cells［J］.Journal of Cancer Research and Clinical Oncology，2010，136（3）：465.

［5］譚小平，何長(zhǎng)華，朱燕妮，等.Mina53在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)意義及與腫瘤增殖的關(guān)系［J］.世界華人消化雜志，2011，4：421.

1007－4287（2012）02－0310－02

2011－06－20）