邢德剛 董艷芬 梁燕玲 鄧樹泳 張 琰 (廣東藥學院生理學教研室，廣東 廣州 510006)

臨床上很多疾病伴有胃腸動力障礙〔1〕，很多中藥對胃腸道活動具有明顯的調(diào)節(jié)作用，其中，半夏瀉心湯被廣泛運用于治療消化道疾病，尤其是對胃病的療效卓著。以往的臨床應用表明，該方不僅對胃腸運動障礙性疾病，如功能性消化不良、糖尿病胃輕癱有治療作用〔2，3〕，對胃腸運動亢進性疾病如腸易激惹綜合征也有治療作用〔4〕。有實驗研究認為其無論對在體胃腸運動還是離體胃腸運動均具有雙向調(diào)節(jié)作用〔5〕，但也有研究認為半夏瀉心湯全方對胃運動只有興奮性作用〔6〕;有研究認為對胃腸運動的作用是當胃運動障礙時半夏瀉心湯促進胃運動，胃腸功能亢進時抑制胃腸運動〔7，8〕。本實驗用急性分離的大鼠胃竇環(huán)行平滑肌肌條，觀察半夏瀉心湯對大鼠胃竇環(huán)行平滑肌自發(fā)性收縮的影響，并分析其作用機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 健康SD大鼠 (廣州省醫(yī)學實驗動物中心提供)，體重200～250 g，雌雄不限。共分為空白對照組與不同濃度半夏瀉心湯實驗組7組，每組8例。

1.1.2 藥物制備 半夏瀉心湯由半夏55.78 g、黃芩、干姜、人參、炙甘草各46.875 g、黃連15.625 g、大棗42 g組成，依照人單位體重生藥量求得豚鼠單位體重生藥量，擴大10倍。以蒸餾水煎煮30 min，提取2次。再合并煎液，分別制備成1%(含生藥0.01 g/ml)、10%(含生藥0.10 g/ml)、30%(含生藥0.30 g/ml)、50%(含生藥0.50 g/ml)、70%(含生藥0.70 g/ml)和100%(含生藥1 g/ml)濃度的水煎液，冰箱中備用。

1.2 方法 動物實驗前禁食24 h，飲水不限。實驗時猛擊大鼠頭部致昏，迅速取出其全胃。沿胃小彎打開胃，在Krebs液中漂洗干凈。去除其黏膜層，平行于胃竇環(huán)形肌纖維走向切取肌條 (10 mm×1.5 mm)，將其固定于恒溫灌流槽內(nèi)(37℃)，用Krebs液連續(xù)灌流，并持續(xù)通入95%O2和5%CO2混合氧，利用生物信號處理系統(tǒng)記錄胃竇環(huán)行平滑肌自發(fā)性收縮活動。在1 g的前負荷下溫育。用37℃新鮮的Krebs液持續(xù)灌流，孵育60 min左右，當穩(wěn)定的自發(fā)性收縮出現(xiàn)后開始實驗，每次加入0.05 ml實驗用藥液，描記給藥前后各3 min胃竇環(huán)行平滑肌的收縮曲線。

1.3 統(tǒng)計學分析 計算給藥前后3 min胃竇平滑肌自發(fā)性活動效應，單位時間曲線下面積積分 (/min)=(選擇區(qū)曲線下面積積分/選擇區(qū)時間)×60。在選定時間內(nèi)肌條的收縮效應值=(給藥時單位時間下面積積分－給藥前單位時間曲線下面積積分)/給藥前單位時間曲線下面積積分×100%。在選定時間內(nèi)肌條的舒張效應值=(給藥前單位時間曲線下面積積分－給藥時單位時間下面積積分)/給藥前單位時間曲線下面積積分×100%。所有統(tǒng)計數(shù)據(jù)用±s表示。數(shù)據(jù)比較采用同體對照t檢驗，利用統(tǒng)計分析軟件SPSS12.0分析。

2 結(jié)果

2.1 不同濃度半夏瀉心湯對大鼠胃竇肌條節(jié)律性收縮的影響

1%半夏瀉心湯組對肌條收縮活動無影響，10%、30%、50%、70%和100%半夏瀉心湯組都先明顯增強肌條收縮幅度和收縮頻率 (P＜0.01)，而后又明顯減弱肌條收縮幅度和頻率 (P＜0.01)，呈劑量依賴性。當濃度達到100%時肌條先是不完全強直收縮，然后完全抑制，灌流沖洗藥物作用后自發(fā)性活動恢復。見表1，圖1。

2.2 M型、N型膽堿能受體阻斷劑對半夏瀉心湯效應的影響用濃度10－6mol/L的M型膽堿能受體阻斷劑阿托品與50%半夏瀉心湯同時孵育肌條，50%半夏瀉心湯對肌條的收縮活動仍有明顯增強和抑制收縮效應，與單獨50%半夏瀉心湯組的效應相同。表明阿托品不影響半夏瀉心湯對肌條的雙向性作用。用濃度10－6mol/L的N型膽堿能受體阻斷劑六烴季胺與50%半夏瀉心湯同時孵育肌條，與單獨50%半夏瀉心湯組的效應相同。表明六烴季胺不影響半夏瀉心湯對肌條的作用。見表2。

表1 不同濃度半夏瀉心湯對胃竇肌條自發(fā)性活動的影響(n=8，±s)

表1 不同濃度半夏瀉心湯對胃竇肌條自發(fā)性活動的影響(n=8，±s)

與1%濃度組比較:1)P＜0.01

組別 收縮效應 舒張效應1%濃度組3.53±2.75 2.32±2.37 10%濃度組 27.53±3.491) 16.32±2.551)30%濃度組 68.06±2.091) 38.32±3.761)50%濃度組 120.59±3.431) 68.32±2.811)70%濃度組 178.53±3.321) 87.32±2.901)100%濃度組 212.53±2.581) 98.32±3.121)

圖1 100%濃度組半夏瀉心湯對胃竇肌條自發(fā)性活動的影響

2.3 氨茶堿對半夏瀉心湯效應的影響 用濃度10－6mol/L氨茶堿與50%半夏瀉心湯同時孵育肌條，使肌條收縮效應與單獨半夏瀉心湯組相比有顯著性差異 (P＜0.01)，但氨茶堿組的舒張效應與單獨半夏瀉心湯組相比無顯著性差異。表明氨茶堿能抑制半夏瀉心湯增強胃竇肌條收縮的效應，但對半夏瀉心湯的增強胃竇肌條收縮效應之后對肌條的舒張效應沒有顯著的影響。見表2，圖2。

表2 幾種阻斷劑對50%濃度組半夏瀉心湯效應的影響(n=8，±s)

表2 幾種阻斷劑對50%濃度組半夏瀉心湯效應的影響(n=8，±s)

與50%濃度組比較:1)P＜0.01

組別 收縮效應 舒張效應50%濃度組120.53±2.09 48.32±3.75 50%濃度+阿托品組 128.92±3.54 50.28±2.74 50%濃度+六烴季胺組 132.13±3.15 46.33±3.37 50%濃度+氨茶堿組 76.64±2.521)50.18±2.83

圖2 50%濃度+氨茶堿組對胃竇環(huán)行平滑肌自發(fā)性活動的影響

3 討論

本結(jié)果表明半夏瀉心湯對大鼠胃竇環(huán)行平滑肌的自發(fā)性活動的雙向性效應可能與膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)受體水平無關(guān)，且氨茶堿能明顯抑制半夏瀉心湯的增強胃竇環(huán)行平滑肌收縮效應，但對半夏瀉心湯的增強胃竇環(huán)行平滑肌收縮效應之后對肌條的舒張效應沒有顯著的影響。氨茶堿通過減少cAMP分解提高細胞內(nèi)cAMP水平，半夏瀉心湯對大鼠胃竇環(huán)行平滑肌自發(fā)性活動的增強效應可能與cAMP途徑有關(guān)。前期研究發(fā)現(xiàn)，半夏瀉心湯含藥血清能提高胃平滑肌膜電位，通過G蛋白水平增加毒蕈堿電流，進而使平滑肌細胞收縮增強。因此，G蛋白與細胞內(nèi)cAMP都有可能參與半夏瀉心湯對胃竇環(huán)行平滑肌的自發(fā)性活動增強效應，但半夏瀉心湯增強胃竇肌條的自發(fā)性活動的舒張效應機制還有待進一步研究。

1 Horowitz M，Su YC，Rayne CK，et al.Gastroparesis:prevalence，clinical significance and treatment〔J〕.Can J Gastroenterol，2001;15(12):805-13.

2 王萬全.半夏瀉心湯加減治療小兒消化不良187例〔J〕.四川中醫(yī)，2010;28(8):94-5.

3 劉瑞云，徐 麗，趙鵬臺.半夏瀉心湯治療糖尿病性胃輕癱38例〔J〕.光明中醫(yī)，2008;23(7):969.

4 曾 勇，練雄珍，林樂泓.半夏瀉心湯治療腸易激惹綜合征臨床療效觀察〔J〕.中國醫(yī)藥導報，2009;6(19):127-8.

5 張 勝，吳春福，車 軼，等.半夏瀉心湯對小鼠胃排空的影響〔J〕.中藥藥理與臨床，2000;16(1):1-3.

6 李宇航，王慶國，牛 欣，等.半夏瀉心湯配伍意義的拆方研究-對大鼠離體胃底肌條收縮活動的影響〔J〕.北京中醫(yī)藥大學學報，2000;23(6):27-9.

7 麻春杰，米子良，云彩麟.半夏瀉心湯對實驗性大白鼠胃運動的影響〔J〕.實用中醫(yī)藥雜志，1996;(4):31-2.

8 陳立江，張 勝，吳春福，等.采用正交設(shè)計法拆方研究半夏瀉心湯對大鼠胃底條運動的雙向調(diào)節(jié)作用〔J〕.中藥藥理與臨床，2006;22(2):1-3.