劉興旺 譚北平 艾慶輝

（1.廣東恒興飼料實(shí)業(yè)股份有限公司，廣東湛江524094；2.廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院水生經(jīng)濟(jì)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料研究室，廣東湛江524088；3.中國海洋大學(xué)教育部海水養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東青島266003）

磷是魚類維持正常生理功能必需的礦物元素，是魚類骨骼、鱗片、核酸及細(xì)胞膜的重要構(gòu)成元素之一[1]。由于天然水體中磷含量較低，飼料磷成為滿足魚類磷需求的主要來源[2]。飼料中可利用磷不足會導(dǎo)致缺乏癥，主要包括生長受阻及骨骼礦化異常等[3]。魚類磷需求量研究的報(bào)道不同，可利用磷的需求量在0.3%～0.9%之間[4]。當(dāng)前，大多數(shù)商業(yè)飼料中的磷含量能夠滿足水生動(dòng)物的磷需求。但是飼料中磷過量會導(dǎo)致魚類磷排泄增加，影響水環(huán)境生態(tài)系統(tǒng)的平衡。因此，人們迫切希望盡量降低飼料中的磷含量，使飼料中的磷既能滿足魚類的最大生長需要又能減少魚類的磷排泄，從而達(dá)到保護(hù)水環(huán)境的目的。軍曹魚（Rachycentron canadum）是我國南方地區(qū)重要的海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖品種。近年來，關(guān)于軍曹魚營養(yǎng)生理的研究已多有報(bào)道[5]。周萌等以初始體重22.1 g的軍曹魚為研究對象進(jìn)行了30 d的攝食生長試驗(yàn)，得到軍曹魚幼魚飼料中總磷的適宜需要量為0.88%左右[6]。然而，軍曹魚對可利用磷的需求量還不清楚。本研究以軍曹魚為研究對象，通過梯度試驗(yàn)法確定其飼料中可利用磷的適宜水平，以期為軍曹魚專用配合飼料的開發(fā)提供更多理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

以魚粉、豆粕、酪蛋白為蛋白源配制基礎(chǔ)飼料，分別在每千克基礎(chǔ)飼料中添加0、0.75%、1.51%、2.26%和3.02%的Ca(H2PO4)2，配制成5種等氮、等能的飼料，使飼料中的可利用磷的含量分別為0.62%(日糧1)、0.98%(日糧 2)、1.1%(日糧 3)、1.33%(日糧 4)和 1.71%(日糧5)（見表1）。所有原料粉碎粒度均過320 μm篩網(wǎng)，用F(Ⅱ)-26雙螺桿制粒機(jī)加工制成硬顆粒飼料(2.5 mm×3.0 mm)，60℃烘干后保存于-20℃冰柜中備用。另外，日糧1和日糧2中分別添加0.01%的Y2O3，用來測定磷的消化率。

表1 試驗(yàn)飼料配方及營養(yǎng)成分（%干物質(zhì)）

1.2 飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖試驗(yàn)在廣東恒興飼料實(shí)業(yè)股份有限公司863國家海水養(yǎng)殖種子工程實(shí)驗(yàn)基地進(jìn)行，海水為常流水，每桶(300 L)進(jìn)水量為1.0 L/min。養(yǎng)殖期間水溫為(31.0±0.5)°C，鹽度為32.5‰～34.6‰，溶氧維持在7 mg/l左右。選擇大小均勻[(1.80±0.30)g]、體格健壯的軍曹魚幼魚，隨機(jī)分配于15個(gè)養(yǎng)殖桶中(每個(gè)處理組設(shè)3個(gè)重復(fù)),每桶20尾試驗(yàn)魚。每天早晚投餌2次(9：00、16：00),表觀飽食投喂。飼養(yǎng)試驗(yàn)共進(jìn)行8周。試驗(yàn)過程中，用日糧1和日糧2分別投喂另外2桶魚[40尾/桶、平均體重為（6.2±0.51）g]以測定基礎(chǔ)飼料和磷酸二氫鈣中磷的利用率。投喂15 d后，參照Austreng[7]的方法在投喂3 h后收集糞便。糞便樣品冷凍后在-20℃冰箱內(nèi)儲存。

1.3 樣品收集及化學(xué)分析

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，停止喂食24 h，分別稱量每桶魚體總重并記錄魚體個(gè)數(shù)，計(jì)算每桶軍曹魚的平均體重。每桶取5尾魚用于體常規(guī)分析。魚體和飼料常規(guī)成分分析均采用AOAC[8]的方法。其中，水分的測定為105℃烘干恒重法(24 h)；粗蛋白的測定為凱氏定氮法，采用瑞典TECATOR公司1030型蛋白質(zhì)自動(dòng)分析儀；粗脂肪的測定為索氏抽提法；粗灰分的測定為箱式電阻爐550℃灼燒法(16 h)。飼料、糞便中的YO及飼料、糞便和魚體組織中磷的含量采用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀（ICP-OES;VISTA-MPX,VARIAN,USA）測定。

1.4 計(jì)算與統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)飼料磷的表觀消化率（D）參照以下公式計(jì)算：

D(%)=[1-(YD×PF)/(YF×PD)]×100。

式中：YD——飼料中Y2O3的濃度；

PF——糞便中磷的濃度；

YF——糞便中Y2O3濃度；

PD——飼料中磷的濃度。

磷酸二氫鈣的表觀消化率（Di）參照以下公式計(jì)算：

Di(%)=100×(P2×D2-P1×D1)/I。

式中：P2——含磷酸二氫鈣飼料中磷的濃度；

D2——含磷酸二氫鈣飼料中磷的表觀消化率；

P1——基礎(chǔ)飼料中磷的濃度；

D1——基礎(chǔ)飼料中磷的表觀消化率；

I——含磷酸二氫鈣飼料中無機(jī)磷的濃度。

采用單因素方差分析(ANOVA)，當(dāng)不同處理之間差異顯著(P＜0.05)時(shí)，用Tukey’s檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較分析。所有統(tǒng)計(jì)分析均在SPSS 11.0軟件中進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 磷的表觀消化率

基礎(chǔ)飼料(日糧1)和含有0.75%磷酸二氫鈣的飼料(日糧2)中磷的表觀消化率分別為62.68%和71.87%，由此計(jì)算出磷酸二氫鈣的表觀消化率為95.7%。通過計(jì)算，各處理組可利用磷的水平分別為0.62%(日糧1)、0.98%(日糧2)、1.1%(日糧3)、1.33%(日糧4)和1.71%(日糧 5)。

2.2 軍曹魚的體增重、特定生長率和飼料系數(shù)(見表2)

表2 軍曹魚的體增重、特定生長率和飼料系數(shù)

由表2可見，不同處理組試驗(yàn)魚的成活率在95%～100%，各組之間沒有出現(xiàn)顯著差異。軍曹魚的特定生長率在飼料總可利用磷水平高于0.62%(日糧1)后沒有顯著升高，但是當(dāng)飼料中可利用磷水平達(dá)到1.71%(日糧5)時(shí)，軍曹魚的特定生長率顯著低于日糧1組（P＜0.05）。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，飼料中較高的磷水平降低了軍曹魚的飼料利用率，可利用磷為1.33%(日糧4)和1.71%(日糧5)的處理組飼料系數(shù)顯著高于低磷處理組（日糧1組）（P＜0.05）。

2.3 魚體組成（見表3）

表3 試驗(yàn)魚魚體組成

由表3可知，魚體蛋白質(zhì)含量在14.84%到15.70%之間，水分在76.54%到77.70%之間，各處理組均未出現(xiàn)顯著差異；魚體的粗脂肪含量隨著磷水平的升高而降低，含量在4.32%到5.12%之間；相應(yīng)的，與脂肪含量負(fù)相關(guān)，各處理組魚體灰分隨著磷水平的升高而升高。經(jīng)過56 d的飼養(yǎng)試驗(yàn)后，軍曹魚魚體組織中磷的含量未出現(xiàn)顯著差異，雖然0.62%磷水平(日糧1)處理組相對較低。

3 討論

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，可利用磷水平從0.62%到1.33%之間各處理組軍曹魚特定生長率無顯著差異，表明飼料中0.62%的可利用磷（總磷0.99%）可滿足軍曹魚生長的需要，該結(jié)果與周萌等[6]得到的結(jié)果非常相近。此外，在鏡鯉(0.67%)[9]、黑線鱈(0.72%)[10]和翹嘴紅鲌(0.88%)[2]等魚類的研究中也得到相似的研究結(jié)果。飼料中磷需求量的差異主要受魚種、磷的形式、養(yǎng)殖系統(tǒng)、水溫及魚的生長速度等因素的影響[11]。在本研究中，當(dāng)飼料中可利用磷水平為1.71%時(shí)，軍曹魚的特定生長率與低磷處理組(日糧1組、日糧2組)相比顯著下降（P＜0.05）。在其他研究中也有相似的發(fā)現(xiàn)[12]，這可能是因?yàn)轱暳现羞^高的磷水平或不適宜的鈣磷比影響了其他礦物元素的利用所導(dǎo)致的，其具體生理機(jī)制還有待于進(jìn)一步的研究。

魚體灰分和磷水平經(jīng)常被用來作為評定魚類磷營養(yǎng)需求的指標(biāo)[1]。在本研究中，飼料磷水平影響了魚體的灰分含量。隨著飼料磷水平的升高，魚體灰分呈逐漸升高的趨勢，且1.71%可利用磷處理組魚體灰分顯著高于0.62%組（P＜0.05）。魚體磷含量也有相同的趨勢，雖然在統(tǒng)計(jì)上差異不顯著。這說明，以魚體灰分及磷水平為指標(biāo)時(shí)，軍曹魚飼料中適宜的可利用磷水平可能比0.62%要高。在太陽鱸[13]等魚類的研究中也得到相似的結(jié)果。這些研究顯示，骨骼及其他魚體組織具有儲存磷的能力，在磷攝入及磷沉積過程中調(diào)節(jié)磷含量變化來滿足最大生長的需要。

本研究結(jié)果顯示，隨著飼料中磷水平的升高，軍曹魚體脂肪呈逐漸降低的趨勢。在斑點(diǎn)叉尾鮰[14]、虹鱒[1]及花[15]等的研究中也都發(fā)現(xiàn)相似的現(xiàn)象。一般認(rèn)為這是因?yàn)榱兹狈?dǎo)致氧化磷酸化損傷，因?yàn)榱兹狈ο拗屏薚CA循環(huán)而使乙酰輔酶A積累的結(jié)果。

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