林慧純，胡祥娜，禹紹周

（深圳市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗(yàn)檢測(cè)中心，廣東 深圳 518040）

殺撲磷（Methidathion）是一種廣譜的有機(jī)磷殺蟲劑，具有觸殺、胃毒和滲透作用，能滲入植物組織內(nèi)，對(duì)咀嚼式和刺吸式口器害蟲均有殺滅效力，尤其對(duì)防治介殼蟲有特效，同時(shí)對(duì)螨類也有一定的控制作用[1]。殺撲磷是高毒農(nóng)藥，日本對(duì)殺撲磷在蔬菜中的限量為0.1 mg/kg，美國(guó)已停止了殺撲磷登記[2]。在國(guó)內(nèi)，殺撲磷農(nóng)藥價(jià)格便宜，使用范圍比較廣泛，農(nóng)業(yè)部監(jiān)測(cè)已把殺撲磷作為必檢項(xiàng)目，在日常監(jiān)測(cè)中，殺撲磷的檢出率也比較高。目前常用的檢測(cè)方法有氣相色譜法[3-4]和氣相色譜-質(zhì)譜法[5-6]，但這兩種方法都存在一定的缺陷，氣相色譜法需要其他輔助手段進(jìn)行定性，氣相色譜-質(zhì)譜法會(huì)出現(xiàn)基質(zhì)干擾，常出現(xiàn)假陽性。因此，筆者嘗試用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蔬菜中的殺撲磷農(nóng)藥殘留，此方法能有效排除基質(zhì)干擾，提高靈敏度，定性準(zhǔn)確，定量能滿足殘留限量的要求。

1 材料與方法

1.1 材料

選用三種比較有代表性的蔬菜：茄子（茄果類蔬菜）；結(jié)球甘藍(lán)（甘藍(lán)類蔬菜）；奶白菜（綠葉類蔬菜）。其中，茄果類蔬菜本底相對(duì)比較干凈；甘藍(lán)類蔬菜屬于含硫蔬菜，容易對(duì)分析目標(biāo)物產(chǎn)生干擾；綠葉類蔬菜的葉綠素含量高，其色素干擾極大的增加了分析的難度。這三類蔬菜具有不同性質(zhì)，如果能從這三類蔬菜的檢測(cè)分析中獲得滿意的回收率結(jié)果，那么將會(huì)解決絕大多數(shù)蔬菜的檢測(cè)分析問題。

1.2 儀器設(shè)備與試劑

氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（Agilent 7890A-7000QQQ）、MassHunter工作站；勻漿機(jī)（IKA ULTRA TURRAX T25，IKA公司）；氮吹儀（N-EVAP Nitrogen Evaporation System Models 112，Organomation Associates.Inc.，美國(guó)）；食品攪碎機(jī)（PHILIPS HR 1724）旋渦混合器（姜堰市康健醫(yī)療器具有限公司）。殺撲磷標(biāo)準(zhǔn)品（農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所）；二氯甲烷、甲醇、丙酮均為色譜純。

1.3 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取25.0 g試樣放入錐形瓶中，加入50.0 mL乙腈，勻漿機(jī)高速勻漿2 min，用濾紙過濾，濾液用5～7 g氯化鈉鹽析，室溫下靜止30 min，使乙腈相和水相分層，吸取10.00 mL乙腈溶液用氮吹儀蒸發(fā)至近干，加入2 mL二氯甲烷-甲醇（95∶5，V/V），待凈化。將此溶液上樣于預(yù)先用5 mL二氯甲烷-甲醇（95∶5，V/V）條件化的石墨炭黑氨基固相萃取小柱，以 10 mL 二氯甲烷-甲醇（95∶5，V/V）分 3次淋洗，收集淋洗液，用氮吹儀蒸發(fā)至近干，用丙酮準(zhǔn)確定容至5.00 mL，過0.2 μm濾膜后進(jìn)行測(cè)定。

1.4 儀器檢測(cè)條件

色譜柱 HP-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；載氣氦氣（He）；流速1.0 mL/min；進(jìn)樣口溫度 250℃；不分流進(jìn)樣；離子源（EI）；碰撞氣體N2，淬滅氣體He，離子源溫度 230℃；四極桿溫度 150℃；加熱器溫度 280℃；升溫程序 90℃（15℃/min）～280℃（保持10 min）。多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）參數(shù)：母離子（m/z）為145，定量子離子（m/z）為 85.1，碰撞能量為 5 V；定性子離子（m/z）為58.1，碰撞能量為10 V。選擇離子監(jiān)測(cè)（SIM）參數(shù)：定量離子（m/z）為 145，定性離子（m/z）為157，302。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性關(guān)系和方法檢出限

將殺撲磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋至 1、0.4、0.1、0.05、0.02 mg/kg，按照1.4的儀器條件進(jìn)行測(cè)定，以殺撲磷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)作圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線可得線性回歸方程為y=679 230 x+153 08，相關(guān)系數(shù) r=0.992 6。

用信噪比S/N=3來計(jì)算方法的檢出限，將峰面積換算成殺撲磷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，得出殺撲磷的最低檢出限為0.001 8 mg/kg。

2.2 分析方法的準(zhǔn)確度

分別稱取一定量的茄子、結(jié)球甘藍(lán)、奶白菜空白樣品，準(zhǔn)確加入三個(gè)質(zhì)量分?jǐn)?shù)水平的殺撲磷標(biāo)樣，每個(gè)水平做三個(gè)平行樣，按照1.3和1.4的方法進(jìn)行測(cè)定，通過外標(biāo)法定量，標(biāo)樣采用對(duì)應(yīng)的樣品基質(zhì)溶液配制，得到相應(yīng)水平的平均回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，回收率在92.2%～109.3%之間，RSD在1.1%～7.3%范圍內(nèi)，詳見表1。

表1 三種蔬菜中殺撲磷的回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（%）

2.3 分析方法的精密度

分別在茄子、結(jié)球甘藍(lán)、奶白菜空白樣品中添加0.1 mg/kg水平的殺撲磷標(biāo)樣，經(jīng)前處理后定量重復(fù)測(cè)定6次，RSD值（n=6）分別為3.8%、4.2%、3.2%。

2.4 氣相色譜-質(zhì)譜法與氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法比較

圖1為殺撲磷多反應(yīng)監(jiān)測(cè)下的質(zhì)譜圖。圖2為茄子、結(jié)球甘藍(lán)、奶白菜空白樣品添加0.4mg/kg殺撲磷的SIM選擇離子色譜圖。圖3為茄子、結(jié)球甘藍(lán)、奶白菜空白樣品添加0.02 mg/kg殺撲磷的MRM定量離子（145.0 m/z>85.1 m/z）色譜圖。

圖1 殺撲磷多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）質(zhì)譜圖

由圖1～圖3可知，氣相色譜-質(zhì)譜法按照國(guó)標(biāo)方法[4]，選擇定量離子145 m/z，定性離子157 m/z、302 m/z，這三個(gè)離子都受到基質(zhì)不同程度的干擾，即使在0.4 mg/kg的質(zhì)量分?jǐn)?shù)水平下也得不到好的峰型，嚴(yán)重影響定性與定量，甚至?xí)霈F(xiàn)假陽性，達(dá)不到標(biāo)準(zhǔn)要求；氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法則沒有這方面問題，添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)水平為0.02 mg/kg的殺撲磷時(shí)，茄子和結(jié)球甘藍(lán)完全沒有干擾峰，奶白菜在11.173 min有一干擾峰，但對(duì)檢測(cè)結(jié)果沒有影響。

圖2 添加殺撲磷（0.4 mg/kg）的SIM選擇離子色譜圖

圖3 添加殺撲磷（0.02 mg/kg）的MRM子離子（145.0>85.1）色譜圖

3 討論

GC-MS/MS可從干擾嚴(yán)重的質(zhì)譜中抽取有用數(shù)據(jù)，大大提高質(zhì)譜檢測(cè)的選擇性，使譜圖獲得較平穩(wěn)的基線，因此，即使在較低質(zhì)量分?jǐn)?shù)水平下，也能獲得較高的信噪比，從而使檢測(cè)靈敏度大大提高。采用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)蔬菜中殺撲磷農(nóng)藥殘留，能夠有效排除基質(zhì)干擾，方法具有高靈敏度、定性準(zhǔn)確、定性定量檢測(cè)一次完成的特點(diǎn)，定量可滿足殘留限量的檢測(cè)要求。

[1]劉書麗.殺介殼蟲特效藥——?dú)淞譡J].農(nóng)藥市場(chǎng)信息，2006，（19）：35.

[2]美國(guó)停止殺蟲劑殺撲磷登記[J].浙江化工，2010，41（6）：37.

[3]NY/T761-2008，蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定[S].

[4]焦琳娟.動(dòng)態(tài)液相微萃取—?dú)庀嗌V法檢測(cè)蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（18）：11022-11023，11064.

[5]GB/T19648-2006，水果和蔬菜中500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法[S].

[6]王 瑞，林敏霞，吳 淳，等.氣相色譜——質(zhì)譜法測(cè)定黃瓜中的啶蟲脒農(nóng)藥殘留[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（31）：17538-17539.