劉光明

廣東省新興中藥學(xué)校，廣東 新興 527400

姜炭為姜科植物姜Zingiber officinale Rosc.的干燥根莖經(jīng)炒炭形成的炮制品。其性熱，辛味消失，守而不走，長(zhǎng)于止血溫經(jīng)，其溫經(jīng)作用弱于炮姜，是中醫(yī)治療出血證的常用藥物，可用于各種虛寒性出血且出血較急、量較多者［1]?！吨袊?guó)藥典》2010年版一部炮制通則附錄ⅡD項(xiàng)及《全國(guó)中藥炮制規(guī)范》中姜炭的炮制方法均為傳統(tǒng)炒炭法。該法為手工操作，器具敝開(kāi)，原藥氣味散失大，所用“武火”、“中火”、“文火”等“火候”無(wú)客觀的溫度參考，完全依靠個(gè)人經(jīng)驗(yàn)判斷，各地姜炭的炮制程度及內(nèi)在質(zhì)量也存在較大的差異，這些因素都直接影響姜炭的成品質(zhì)量及臨床療效。因此，優(yōu)選姜炭炮制新工藝有重要的意義。但目前均沒(méi)有關(guān)于研究姜炭炮制新工藝的系統(tǒng)報(bào)道。本研究以浸出物含量、凝血時(shí)間為指標(biāo)，結(jié)合成品性狀，對(duì)姜炭的炮制工藝進(jìn)行優(yōu)選，對(duì)提高炮姜炭成品質(zhì)量有重要的意義，并為制定姜炭飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 藥材

干姜，購(gòu)自云浮市大森林藥房 (產(chǎn)地：廣東;批號(hào)：20110812)，經(jīng)廣東省新興中藥學(xué)校彭瑞松副主任中藥師鑒定為姜科植物姜Rehmannia glutinosa Libosch.的干燥塊根。

1.2 儀器

箱形電阻爐，型號(hào)Sxz-4-10，佛山電爐廠制造;便攜式溫度計(jì)，WREU一892型，上海浦江電表廠生產(chǎn);BP211D型電子天平，德國(guó)Sartorius公司;101-1型數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱，廣州紅星儀器有限公司;內(nèi)徑0.9-1.1mm毛細(xì)管，華西醫(yī)科大學(xué)儀器修造廠;秒表;手術(shù)剪;毫米尺等。

1.3 動(dòng)物

KM系小鼠，18～22g，購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

2 方法和結(jié)果

2.1 姜炭的炮制

表1 姜炭炮制正交設(shè)計(jì)因素水平表

表2 姜炭炮制結(jié)果

以姜炭的傳統(tǒng)炮制工藝為參照［2]，對(duì)炮制過(guò)程中的溫度、時(shí)間及加熱方式3項(xiàng)影響炭藥飲片質(zhì)量的主要因素進(jìn)行考察。前2因素各選取3水平，后1因素選取2水平，按L9(3)4正交表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，并按正交表所示條件對(duì)干姜進(jìn)行炮制。炮制過(guò)程中準(zhǔn)確記錄加熱溫度、時(shí)間、成品性狀，并計(jì)算成品得率。結(jié)果顯示樣品5炭品的外觀性狀符合《中國(guó)藥典》2010年版一部姜炭外觀質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) (表面黑色，內(nèi)部棕褐色)。炭品得率最高為樣品1，其依次為樣品2、樣品3、樣品7、最少為樣品9。結(jié)果見(jiàn)表l、表2。

炭品得率%=成品炭量/樣品量×100%。

2.2 浸出物測(cè)定

精密稱取各樣品姜炭粉4g，每樣品各取3份，按《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄XA浸出物測(cè)定法［3]，水溶性浸出物測(cè)定法項(xiàng)下冷浸法進(jìn)行測(cè)定［2]，計(jì)算各樣品中水溶性浸出物的含量。結(jié)果表明干姜經(jīng)制炭后，除樣品5的水浸出物含量略有升高外，其余樣品浸出物含量均不同程度地降低，結(jié)果見(jiàn)表3。各姜炭組水溶性浸出物與干姜組水溶性浸出物經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較 P＞0.05，無(wú)明顯差異。

表3 各樣品姜灰水溶性浸出物含量測(cè)定結(jié)果表 (n=10)

2.3 凝血時(shí)間的測(cè)定

2.3.1 藥液的制備

稱取樣品 1至樣品 10各 100g，加水 500ml，浸泡30min，武火煮沸改文火煎30min，雙層紗布過(guò)濾，藥渣分別加水300 ml、200ml，煎煮30、20min，過(guò)濾，合并濾液，于水浴上濃縮至100ml，冰箱冷藏備用。每ml供試品相當(dāng)于姜炭樣品1 g。

2.3.2 對(duì)小鼠斷尾出血時(shí)間的影響［4]

表4 姜炭水煎劑對(duì)小鼠斷尾凝血時(shí)間的影響 (±SD，n=10)

表4 姜炭水煎劑對(duì)小鼠斷尾凝血時(shí)間的影響 (±SD，n=10)

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.01。

樣品 劑量 (ml/20g) 給藥途徑 出血時(shí)間 (s)1 ig 213.6 ±34.7 2 1 ig 212.6 ±37.1 1 3 ig 231.6 ±36.3 4 1 ig 219.6 ±32.5 1 5 ig 176.7 ±27.3*6 1 ig 182.3 ±35.2*1 7 ig 191.5 ±40.1*8 1 ig 221.2 ±25.9 1 ig 234.6 ±36.2 10 1 ig 261.3 ±36.8對(duì)照組9 1 ig 380.6 ±60.5-

取18～22g健康KM小鼠110只，雌雄各半，隨機(jī)分為11組，以1ml/20g劑量，每日灌胃給藥1次，連續(xù)3 d，對(duì)照組給等量的蒸餾水，末次給藥后60 min將小鼠固定，在距尾尖8mm處標(biāo)記，用手術(shù)刀片從標(biāo)記處迅速橫斷，待血液自行溢出時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，每隔30 s用濾紙將流出的血滴吸去，直至出血自然停止 (濾紙吸時(shí)無(wú)血)為止，即為出血時(shí)間(室溫20℃ ～25℃條件下進(jìn)行)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)樣品5、樣品6、樣品7對(duì)小鼠的出血時(shí)間有明顯的縮短作用，其中出血時(shí)間最少為樣品5組炭品176.7±27.3 s。具體結(jié)果見(jiàn)表4。

2.3.3 對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響［5]

取18～22g健康KM小鼠110只，雌雄各半，隨機(jī)分為11組，以1ml/20g劑量，每日灌胃給藥1次，連續(xù)3 d，對(duì)照組給等量的蒸餾水，末次給藥后60 min用眼科彎鑷迅速摘去小鼠一側(cè)眼球，于載玻片兩端各滴一滴血，血滴直徑約5 mm，秒表計(jì)時(shí)，每隔20 s用清潔大頭針自血滴邊緣向里輕輕挑動(dòng)一次，觀察有無(wú)血絲挑起。從采血開(kāi)始至挑起血絲止，所歷時(shí)間即為凝血時(shí)間 (室溫20℃ ～25℃條件下進(jìn)行)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)各樣品對(duì)小鼠的凝血時(shí)間均有一定的縮短作用，其中用時(shí)最短為80.1±14.2 s(樣品5組炭品)，其次分別為樣品9、樣品6….用時(shí)最長(zhǎng)為對(duì)照組，具體結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 炮姜炭水煎劑對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響 (±SD，n=10)

表5 炮姜炭水煎劑對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響 (±SD，n=10)

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.01。

樣品 劑量 (ml/20g) 給藥途徑 凝血時(shí)間 (s)1 ig 90.6 ±11.6 2 1 ig 96.4 ±10.6 1 3 ig 95.1 ±12.4 4 1 ig 92.1 ±13.5 1 5 ig 80.1 ±14.2*6 1 ig 83.8 ±11.3*1 7 ig 84.6 ±12.5*8 1 ig 87.2 ±16.1 1 ig 117.2 ±11.5 ig 83.1 ±14.6*10 1 ig 86.2 ±12.3對(duì)照組9 1-

3 討論

3.1 通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選姜炭炮制工藝的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)樣品5組炭品外觀性狀最符合《中國(guó)藥典》2010年版一部姜炭外觀質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，水溶性浸出物、鞣質(zhì)含量均最高，其凝血、止血時(shí)間最短。統(tǒng)計(jì)學(xué)表明，樣品5組與對(duì)照組均有較大差異性 P＜0.01。因此，姜炭炮制最佳工藝應(yīng)選為A2B2C2即250℃、加熱15 min(烘法)。

3.2 該炮制工藝操作簡(jiǎn)便，勞動(dòng)強(qiáng)度低，對(duì)環(huán)境污染少，成品質(zhì)量高，較好解決了炮制工作中影響姜炭飲片質(zhì)量存在的主要問(wèn)題，規(guī)范了炮姜炭炮制的時(shí)間、溫度和炮制方式，可規(guī)范化生產(chǎn)并能為制定炮姜炭飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

［1]崔國(guó)靜，劉芳.干姜、炮姜與炮姜炭［J].傳統(tǒng)中醫(yī)藥，2011，4：52～52.

［2]張鏡潮，何鏡華，藍(lán)水中.實(shí)用中藥炮制［M].第1版.廣州：廣東科技出版社，1993：204.

［3]中國(guó)藥典 ［S].一部.2010：附錄56-57.

［4]李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M].第1版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1991：496.

［5]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)［M].第1版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：275.