王萌,張留龍,趙運(yùn)立東營市人民醫(yī)院
a.信息中心;b.放射科;c.設(shè)備科,山東 東營 257091
在細(xì)胞圖像處理過程中,主要是對(duì)粘連細(xì)胞進(jìn)行分割,形成獨(dú)立的個(gè)體,以便計(jì)算各單個(gè)細(xì)胞的相關(guān)參數(shù),如面積、直徑、質(zhì)心等。因此,細(xì)胞分割的準(zhǔn)確性直接影響到后期圖像處理效果。目前已有多種分割算法,這些算法在進(jìn)行圖像分割時(shí)各有優(yōu)劣,但單一算法通常很難得到好的效果,綜合多種算法進(jìn)行處理可得到較理想的分割效果[1-3]。
在分割過程中,通常的做法都是直接將彩色細(xì)胞圖像灰度化,但這樣無疑會(huì)損失彩色圖像的某些信息,特別是在推片不均產(chǎn)生色斑時(shí),不能很好地將細(xì)胞從背景中分割出來,同時(shí)也不能較好地保留細(xì)胞形態(tài)。本研究嘗試充分利用圖像的彩色信息對(duì)細(xì)胞圖像進(jìn)行預(yù)處理,分別對(duì)細(xì)胞核、細(xì)胞漿進(jìn)行提取,為后期圖像處理提供更豐富、準(zhǔn)確的信息。
灰度圖又稱灰階圖,把黑色與白色之間按對(duì)數(shù)關(guān)系分為若干等級(jí),成為灰度?;叶确譃?56階,用灰度表示的圖像成為灰度圖。任何顏色都由紅(R)、綠(G)、藍(lán)(B)三原色組成,假如原來某點(diǎn)的顏色為RGB(R,G,B),那么,我們可以通過下面幾種方法,將其轉(zhuǎn)換為灰度(Gray):
(1)公式計(jì)算法:
Gray=R*0.3+G*0.59+B*0.11;
Gray=(R*30+G*59+B*11)/100;
Gray =(R*28+G*151+B*77)>>8 ;
Gray=(R+G+B)/3。
(2)僅取單色:
Gray=R(紅色通道);
Gray=G(綠色通道);
Gray=B(藍(lán)色通道)。
通過上述任一種方法求得Gray后,將原來的RGB中的R、G、B統(tǒng)一用Gray替換,形成新的顏色RGB(Gray,Gray,Gray),用它替換原來的RGB(R,G,B)就是灰度圖了.轉(zhuǎn)換后,灰度值的變化范圍是0~255,它綜合了彩色圖像中3種基色的灰度級(jí)變化。
(3)RGB圖的顏色矩陣映射。一幅RGB圖像存儲(chǔ)為數(shù)據(jù)矩陣,數(shù)組中的元素定義了圖像中每一個(gè)像素的R、G、B顏色值,像素的顏色由保存在像素位置上的R、G、B的灰度值組合來確定,根據(jù)目標(biāo)區(qū)域的偏向色限定R、G、B顏色的取值,從而使目標(biāo)圖像更明確。
在matlab運(yùn)行環(huán)境下對(duì)彩色細(xì)胞圖像進(jìn)行預(yù)處理,目的是使處理后的圖像更易于分割,以達(dá)到細(xì)胞提取的目的。上述(1)、(2)兩種方法,將彩色圖像轉(zhuǎn)換成灰度圖分別運(yùn)用了公式法和單色法處理,而方法(3)利用了原圖像的色彩信息進(jìn)行顏色矩陣映射。下面將分別介紹此3種方法的實(shí)現(xiàn)過程:
方法(1),用函數(shù)rgb2gray直接將原RGB圖像灰度化,其中函數(shù)rgb2gray使用公式計(jì)算法對(duì)彩色圖像進(jìn)行轉(zhuǎn)換(圖 1~2)。
圖1 RGB圖像
圖2 灰度圖
方法(2),選取單通道顯示[4]。一副完整的圖像,是由R、G、B 3個(gè)通道組成的,選擇彩色圖像中一個(gè)合適的通道進(jìn)行分割,在matlab運(yùn)行環(huán)境下顯微病理涂片在R、G、B通道下的顯示,見圖3~5。
圖3 R通道圖像
圖4 G通道圖像
圖5 B通道圖像
從彩色圖像上可見背景偏紅,在R通道上前景和背景對(duì)比度較好,便于分割操作。所以選擇圖(3)進(jìn)行下一步操作。
方法(3),顏色矩陣映射[5]。用交互式(impixel)獲取像素值,取多個(gè)細(xì)胞核的點(diǎn),以確定細(xì)胞核像素的取值范圍,然后使用imadjust函數(shù)來映射彩色圖像的顏色矩陣,取得細(xì)胞核、細(xì)胞漿(圖6~7)。
圖6 顏色矩陣映射提取細(xì)胞核
圖7 顏色矩陣映射提取細(xì)胞漿
圖像處理中關(guān)鍵技術(shù)的應(yīng)用,無論對(duì)邊緣檢測(cè)[6]還是形態(tài)學(xué)操作,都希望圖像的前景、背景對(duì)比度越明顯越好。經(jīng)比較:圖2對(duì)比度不強(qiáng),細(xì)胞漿難以與背景區(qū)分;圖3提取細(xì)胞核可行,但一些外沿的細(xì)胞漿與背景色斑較難區(qū)分;圖6可直接識(shí)別細(xì)胞核,背景干擾較少;圖7利于提取細(xì)胞漿,細(xì)胞漿與背景區(qū)分較明顯,為下一步圖像處理能提供更準(zhǔn)確的信息。本研究采用顏色矩陣映射法實(shí)現(xiàn),具體實(shí)驗(yàn)步驟如下。
用交互式(impixel)方法在圖1中獲取像素值,取多個(gè)細(xì)胞核(顏色深度不同)的點(diǎn),按先后順序依次顯示像素值,每1行為1個(gè)點(diǎn)的像素值。將細(xì)胞核像素值的大體取值范圍0~255轉(zhuǎn)換為與之對(duì)應(yīng)的0~1值(表1)。該取值用于確定一個(gè)范圍參考,不必每次都做此步驟。
表1 細(xì)胞核的大體取值范圍及其對(duì)應(yīng)的數(shù)值轉(zhuǎn)換關(guān)系
使用imadjust函數(shù)來映射彩色圖像的顏色矩陣,取得有意義的部分:
此式表示,將原圖像中的亮度值映射到新圖像中的新參數(shù)值,low_in為最低輸入值,high_in為最高輸出值,low_out為最低輸出值,high_out為最高輸入值,參數(shù)gamma默認(rèn)為1 線性映射。即將low_in~hige_in之間的值映射到low_out~high_out,low_in以下與high_in以上的值被剪切掉了。也就是說,low_in以下的值映射到low_out,high_in以上的值映射到high_out。
對(duì)RGB圖像的R、G、G調(diào)色板分別進(jìn)行調(diào)整。即隨著顏色矩陣的調(diào)整,每一個(gè)調(diào)色板都有唯一的映射值。由表1可知:R(0.38~0.8)、G(0.29~0.61),B 通道顏色較少,此處可不取。即原細(xì)胞圖像中紅色調(diào)色板中像素值<0.38的像素都將被置為0,>0.8的都將被置為1,原圖像中綠色調(diào)色板中像素值<0.29的像素都將被置為0,>0.61的都將被置為1。
細(xì)胞核表達(dá)式為 : imadjust(I,[0.38 0.29 0; 0.8 0.61 .01],[]);執(zhí)行此式得到了圖6。
我們用選取細(xì)胞核的方法選取細(xì)胞漿。像素的取值范圍及對(duì)應(yīng)轉(zhuǎn)換關(guān)系,見表2。
表2 選取細(xì)胞漿像素的取值范圍及對(duì)應(yīng)轉(zhuǎn)換關(guān)系
由表2可知,對(duì)應(yīng)的數(shù)值轉(zhuǎn)換后,R(0.74~0.93)、G(0.54~0.77),因原圖像B通道顏色較少此處可不取。即原細(xì)胞圖像中紅色調(diào)色板中像素值<0.748的像素都將被置為0,>0.93的都將被置為1;原圖像中綠色調(diào)色板中像素值<0.54的像素都將被置為0,>0.77的都將被置為1。
細(xì)胞漿表達(dá)式為: imadjust(I,[0.74 0.54 0; 0.93 0.77 .01],[])
執(zhí)行此式得到了圖7。
本研究提出了一種目標(biāo)性更強(qiáng)的背景分割方法。采用顏色矩陣映射方法能夠更充分地利用彩色圖像的色彩信息,為圖像的后期處理提供了更可靠的數(shù)據(jù)。經(jīng)過色彩矩陣映射法預(yù)處理的圖像再進(jìn)行灰度化,其前景、背景對(duì)比度更強(qiáng),對(duì)后期的圖像分割等處理更有實(shí)際應(yīng)用意義。
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