武拉斌，李 雯，黃振元，黃 波，姜 北

（大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理 671000）

腺花香茶菜根化學(xué)成分研究

武拉斌，李 雯，黃振元，黃 波，姜 北*

（大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理 671000）

目的：研究腺花香茶菜根的主要化學(xué)成分。方法：采用硅膠柱層析分離純化化合物，依據(jù)理化性質(zhì)和現(xiàn)代波譜技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果：從腺花香茶菜根70%丙酮提取物中分離得到6個(gè)單體化合物，分別鑒定為8（17），13-ent-labdadien-15→16-lactone-19-oic acid（1）、腺花素（2）、烏索酸（3）、β-谷甾醇（4）、7α-羥基豆甾醇（5）、3β-羥基-5α，8α-橋二氧麥角甾-6，22-二烯（6）。結(jié)論：化合物1～6均為首次從該植物的根中獲得，化合物5、6為首次從該植物中分離得到。

腺花香茶菜；根；萜類化合物；甾醇類化合物

香茶菜屬（Isodon或Rabdosia）系唇形科（Labiatae）植物，為多年生草本、灌木或半灌木，主要分布在亞洲、非洲地區(qū)，全世界約有150余種，我國有90種，除青海、內(nèi)蒙古外幾乎遍布全國，但以西南諸省區(qū)種類最多〔1-2〕。香茶菜屬植物多具藥用價(jià)值，民間有廣泛應(yīng)用，具有清熱解毒、活血破瘀、抗菌消炎、抗腫瘤和治療各種肝炎等多種功效〔3〕。腺花香茶菜（I.adenantha）為多年生草本植物，根莖常不規(guī)則結(jié)節(jié)狀增大，向下生出纖細(xì)纖維狀須根〔2〕；該植物根莖具有化濕健脾、理氣止嘔、解毒消腫的功效〔4〕。為全面細(xì)致地了解腺花香茶菜地下部分的化學(xué)成分，開發(fā)利用該植物資源，本研究對(duì)腺花香茶菜根70%丙酮粗提物的乙酸乙酯部位進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，從中共分離得到6個(gè)化合物，并對(duì)這些成分的分離與鑒定工作作一報(bào)道。

圖1 化合物1～6的結(jié)構(gòu)

1 材料與方法

1.1 材料 腺花香茶菜〔Isodon adenantha（Diel）Hara〕2010年8月采自云南大理蒼山西坡，植物標(biāo)本由中科院昆明植物研究所向春雷博士鑒定，標(biāo)本（20100805-1b）存放于大理學(xué)院藥學(xué)院姜北教授研究組。

柱層析硅膠材料、薄層層析板硅膠G和GF254均為青島海洋化工廠生產(chǎn)；反相填充材料RP-18為40～75 μm，由日本Fuji公司生產(chǎn)；顯色劑為10%的H2SO4/ MeOH溶液。

1.2 儀器 質(zhì)譜由VG Auto Spec-3000質(zhì)譜儀測(cè)定，電離條件為70eV；1H與13C-NMR由Bruker AM-400與DRX-500型核磁共振波譜儀測(cè)定，四甲基硅烷（TMS）為內(nèi)標(biāo)。

1.3 提取分離 腺花香茶菜地下部分干燥后，將根與根莖分離，得須狀干燥根樣品3.2 kg，粉碎后用70%丙酮冷浸提取，共提取3次，提取液蒸干后將浸膏分布于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分配；乙酸乙酯部分除去溶劑后得浸膏50 g。浸膏以適量粗硅膠（100目）拌樣后用500 g 200～300目硅膠柱層析，氯仿-丙酮混合溶劑梯度洗脫（1∶0至0∶1），在TLC的檢測(cè)下合并相同流分得7個(gè)組分。

A組分（氯仿）：有晶體析出，經(jīng)氯仿-丙酮重結(jié)晶后得化合物4（200 mg）。

B組分（氯仿/丙酮9∶1）：經(jīng)硅膠柱層析（石油醚/丙酮，石油醚/乙酸乙酯），結(jié)合重結(jié)晶等方法最終得到化合物1（15 mg）、3（41 mg）、5（15 mg）、6（9 mg）。

C組分（氯仿/丙酮8∶2）：經(jīng)RP-18反相柱層析（甲醇/水）后，再用硅膠柱層析（石油醚/丙酮），析出大量結(jié)晶，經(jīng)反復(fù)重結(jié)晶后得化合物2（200 mg）。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

化合物1，C20H28O4，無色針晶（丙酮）。1H-NMR（CD3COCD3，500MHz）δ:7.38（1H，brs，H-14），4.88（1H，s，H-17b），4.78（2H，m，H2-15），4.66（1H，s，H-17a），2.40（2H，m，H2-12），1.88（1H，m，H-11b）1.69（1H，m，H-9），1.64（1H，m，H-11a），1.20（3H，s，Me-19），0.64（3H，s，Me-20）。13C-NMR（CD3COCD3，100 MHz）δ:39.8（t，C-1），20.7（t，C-2），38.9（t，C-3），44.5（s，C-4），56.6（d，C-5），27.1（t，C-6），39.3（t，C-7），148.9（s，C-8），56.4（d，C-9），41.1（s，C-10），22.7（t，C-11），25.3（t，C-12），134.2（s，C-13），146.4（d，C-14），70.9（t，C-15），178.6（s，C-16），106.9（t，C-17），29.2（q，C-18），183.6（s，C-19），13.2（q，C-20）?；衔?的1H和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔5〕報(bào)道相符，故被確定為8（17），13-ent-labdadien-15→16-lactone-19-oic acid。

化合物2，C26H34O9，無色針晶（丙酮）。1H-NMR（CD3COCD3，400MHz）δ:5.75 and 5.30（each1H，brs，H2-17），5.57（1H，d，J=4.5 Hz，H-11α），5.35（1H，dd，J=5.1，10.9Hz，H-1β），4.80（1H，brs，H-7α），3.79（1H，brs，H-5β），3.35（1H，t，J=2.8Hz，H-3α），3.12（1H，m，H-13α），2.53（1H，brs，H-9β），1.30（3H，s，Me-18），1.27（3H，s，Me-20），0.85（3H，s，Me-19）。13C-NMR（CD3COCD3，100MHz）δ:80.7（d，C-1），32.7（t，C-2），75.5（d，C-3），36.0（s，C-4），51.4（d，C-5），201.7（s，C-6），79.2（d，C-7），53.0（s，C-8），55.4（d，C-9），49.0（s，C-10），69.3（d，C-11），38.5（t，C-12）36.6（d，C-13），34.3（t，C-14），206.6（s，C-15），150.9（s，C-16），113.6（t，C-17），26.9（q，C-18），22.7（q，C-19），15.5（q，C-20），3-OCOCH3:170.1（s），169.7（s），169.4（s）：20.9（q），21.1（q），21.6（q）。化合物2的1H和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔6〕報(bào)道相符，故被確定為腺花素。

化合物3，C30H48O3，白色粉末（氯仿-甲醇）。EIMS m/z（rel.int.%）:456〔M〕（+18），438（6），410（11），392（4），354（1），315（1），300（5），287（2），257（3），248（100），235（4），219（7），207（33），203（40），189（15），175（9），147（8），133（23），121（10），105（14）。1H-NMR（C5D5N，400 MHz）δ:5.49（1H，brs，H-12），5.16（1H，brs，OH-3β），3.46（1H，dd，J=5.3，12.0Hz，H-3α），2.63（1H，d，J=11.2Hz，H-18β），1.24，1.22，1.05，1.02 and 0.88（each 3H，s，5Me），1.00（3H，d，J= 6.4Hz，Me-29），0.95（3H，d，J=5.6Hz，Me-30）。13CNMR（C5D5N，100 MHz）δ:31.2（t，C-1），28.2（t，C-2），78.3（d，C-3），39.2（s，C-4），55.9（d，C-5），18.9（t，C-6），33.7（t，C-7），40.1（s，C-8），48.2（d，C-9），37.4（s，C-10），23.7（t，C-11），125.7（d，C-12），139.3（s，C-13），42.6（s，C-14），28.8（t，C-15），25.0（t，C-16），48.2（s，C-17），53.7（d，C-18），39.6（d，C-19），39.4（d，C-20），30.0（t，C-21），37.5（t，C-22），28.9（q，C-23），15.7（q，C-24），16.6（q，C-25），17.5（q，C-26），24.0（q，C-27），179.8（s，C-28），21.4（q，C-29），17.5（q，C-30）?；衔?的MS、1H和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔7〕報(bào)道相符，故被確定為烏索酸。

化合物4，C29H50O，無色晶體（丙酮）。在TLC上多種溶劑系統(tǒng)展開時(shí)，化合物4與β-谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品Rf值一致，故被確定為β-谷甾醇。

化合物5，C29H48O2，無色針晶（氯仿）。1H-NMR（CDCl3，400 MHz）δ:5.53（1H，d，J=5.2 Hz，H-6），5.09（1H，dd，J=8.4，14.8Hz，H-22），4.95（1H，dd，J= 8.4，14.8 Hz，H-23），3.79（1H，brs，H-7），3.52（1H，m，H-3），0.93（3H，s，Me-19），0.86（3H，d，J=6.4 Hz，Me-21），0.78（3H，d，J=5.0 Hz，Me-26），0.77（3H，t，J=8.0 Hz，Me-29），0.75（3H，d，J=6.4 Hz，Me-27），0.62（3H，s，Me-18）。13C-NMR（CDCl3，100 MHz），δ: 37.0（t，C-1），31.4（t，C-2），71.3（d，C-3），42.0（t，C-4），146.2（s，C-5），123.8（d，C-6），65.3（d，C-7），37.5（d，C-8），42.2（d，C-9），37.5（s，C-10），22.7（t，C-11），39.2（t，C-12），42.3（s，C-13），49.4（d，C-14），24.3（t，C-15），29.6（t，C-16），55.7（d，C-17），11.6（q，C-18），19.0（q，C-19），40.4（d，C-20），18.2（q，C-21），138.2（d，C-22），129.4（d，C-23），51.2（d，C-24），31.9（d，C-25），20.2（q，C-26），21.1（q，C-27），25.4（t，C-28），11.9（q，C-29）?；衔?的1H和13CNMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔8〕報(bào)道相符，故被確定為7α-羥基豆甾醇。

化合物6，C28H44O3，無色針晶（氯仿）。1H-NMR（CDCl3，400 MHz）δ:6.50（1H，d，J=8.4 Hz，H-7），6.24（1H，d，J=8.4 Hz，H-6），5.24（1H，dd，J=7.6，14.8 Hz，H-23），5.13（1H，dd，J=7.6，15.6 Hz，H-22），3.97（1H，m，H-3α），0.99（3H，d，J=6.4 Hz，Me-21），0.90（3H，s，Me-19），0.88（3H，d，J=6.4 Hz，Me-28），0.83（3H，overlap，Me-26），0.81（3H，s，Me-18），0.80（3H，overlap，Me-27）。13C-NMR（CDCl3，100 MHz）δ:34.6（t，C-1），30.1（t，C-2），66.4（d，C-3），36.9（t，C-4），82.1（s，C-5），135.4（d，C-6），130.7（d，C-7），79.4（s，C-8），51.0（d，C-9），36.9（s，C-10），20.6（t，C-11），39.3（t，C-12），44.5（s，C-13），51.6（d，C-14），23.4（t，C-15），28.6（t，C-16），56.1（d，C-17），12.8（q，C-18），18.1（q，C-19），39.7（d，C-20），20.8（q，C-21），135.2（d，C-22），132.2（d，C-23），42.7（d，C-24），33.0（d，C-25），19.6（q，C-26），19.9（q，C-27），17.5（q，C-28）。化合物6的1H和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔9〕報(bào)道相符，故被確定為3β-羥基-5α，8α-橋二氧麥角甾-6，22-二烯。

3 討論

作為民間廣泛應(yīng)用的草藥，腺花香茶菜地下部分可用于治療上吐下瀉、食積飽脹、痢疾等胃腸道疾病〔4〕。在我們對(duì)該植物的系統(tǒng)研究中，不論是在其根莖〔10〕，還是根中均分離得到了半日花烷型二萜化合物，此類成分在地上部分植物樣品中未見報(bào)道，其結(jié)構(gòu)類型與穿心蓮內(nèi)酯類成分十分相似〔5〕。由于穿心蓮內(nèi)酯類化合物具有很好的抗菌消炎活性，可用于治療胃腸道疾病，因此，腺花香茶菜地下部分所含有的半日花烷型二萜化合物是否為該植物的代表性活性成分有待進(jìn)一步研究。

志謝 本實(shí)驗(yàn)部分工作由中科院昆明植物研究所孫漢董研究員研究組和黎勝紅研究員研究組協(xié)助完成，在此表示感謝！

〔1〕中國科學(xué)院植物志編輯委員會(huì).中國植物志：66卷〔M〕.北京:科學(xué)出版社，1977:512-532.

〔2〕云南植物研究編著.云南植物志Ⅰ卷〔M〕.北京:科學(xué)出版社，1977:758.

〔3〕董瑞華，高洪志，劉澤源.唇形科香茶菜屬二萜類化合物生物活性研究進(jìn)展〔J〕.China Pharmacy，2010，21（7）: 651-652.

〔4〕國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草：19卷〔M〕.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社，1999:140-159.

〔5〕王國才，胡永美，張曉琦，等.穿心蓮的化學(xué)成分〔J〕.中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，3（4）:199-200.

〔6〕孫漢董，許云龍，姜北.香茶菜屬植物二萜化合物〔M〕.北京:科學(xué)出版社，2001:93.

〔7〕王祝年，韓壯，崔海濱，等.裸花紫珠的化學(xué)成分〔J〕.熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)，2007，15（4）:359-362.

〔8〕王媛，鄒忠梅.毛葉巴豆中甾醇類化合物的研究〔J〕.中國藥學(xué)雜志，2008，43（12）:897-899.

〔9〕楊曉艷.凹頂藻Laurencia化學(xué)成分的分離及結(jié)構(gòu)鑒定〔D〕.廣州:暨南大學(xué)，2005.

〔10〕周星利，王玎瑋，楊明珠，等.腺花香茶菜地下塊莖化學(xué)成分研究〔J〕.大理學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，10（2）:10-12.

Chemical Constituents of Root of Isodon adenantha

WU Labin,LI Wen,HUANG Zhenyuan,HUANG Bo,JIANG Bei*
（College of Pharmacy and Chemistry,Dali University,Dali Yunnan 671000,China）

Objective:To explore the chemical constituents of root of Isodon adenantha.Methods:Compounds were separated and purified by silica gel column chromatography and their structures were elucidated on the basis of spectral analysis and chemical evidences.Results:Six compounds were obtained from ethyl acetate fraction of the extract of root of I.adenantha and were identified as 8（17）,13-ent-labda-dien-15→16-lactone-19-oic acid（1）,adenanthin（2）,ursolic acid（3）,β-sitosterol（4）,stigmast-5,22-dien-3β,7α-diol（5）,and 5,8-Epidioxy-5α,8α-ergosta-6,22E-dien-3β-ol（6）.Conclusion:Compounds 1～6 were isolated from the root of I.adenantha for the first time.while the compounds5and6were firstly obtained from this plant.

Isodon adenantha;root;terpenoids;steroids

Q949.777.6［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］A［文章編號(hào)］1672-2345（2012）03-0009-03

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81060259）；中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)基金資助項(xiàng)目（ITBBKF1006）；云南省中青年學(xué)術(shù)技術(shù)帶頭人后備人才基金資助項(xiàng)目（2008PY005）

2012-01-04

2012-01-19

武拉斌，碩士研究生，主要從事藥用植物化學(xué)研究.

*通信作者：姜北，博士，教授.

（責(zé)任編輯 毛本勇）