江濤，張恩娟，樊莉，路勇，葛勤

（第三軍醫(yī)大學第二附屬醫(yī)院藥劑科，重慶4 0 0 0 3 7）

美速靜膠囊的制備及其成型工藝考察

江濤＊，張恩娟，樊莉，路勇，葛勤#

（第三軍醫(yī)大學第二附屬醫(yī)院藥劑科，重慶4 0 0 0 3 7）

目的：對原美速靜膠囊工藝進行改進，制定質量控制方法，考察成型工藝。方法：采用熔融法將聚乙二醇（PEG）4 0 0 0與褪黑素制成固體分散體，粉碎后加入輔料制成膠囊。采用高效液相色譜法測定褪黑素的含量，考察美速靜膠囊的含量均勻度和溶出度，并測定內容物的堆密度、休止角、臨界相對濕度。結果：褪黑素檢測濃度在4～2 4 μg·mL－1范圍內與其峰面積積分值線性關系良好（r＝0.9 9 9 8），平均回收率為9 9.6%（RSD＝0.6 4%）。美速靜膠囊的含量均勻度均＜1 5.0，1 0 min內溶出約9 0%。粉末堆密度為0.6 6 g·mL－1，休止角為2 3.8°，臨界相對濕度為6 0%。結論：建立的美速靜膠囊制備工藝可行，且質量可控。

美速靜膠囊；褪黑素；固體分散體；質量控制；高效液相色譜法

褪黑素或稱褪黑激素、松果體素，是由大腦松果體分泌的吲哚類激素[1]，具有誘導睡眠、調節(jié)生物鐘、調節(jié)內分泌系統(tǒng)、增強免疫力、抗氧化等生理功能，其水溶性差、半衰期短、生物利用度低[2]。固體分散體能增加水溶性差的藥物的溶解度，提高生物利用度，增加其療效。采用合適的制備方法，藥物能以微粒或分子形式均勻分散于基質中，從而保證藥物在固體分散體中含量的均一性[3]。美速靜膠囊原工藝中是褪黑素與淀粉混合后填充膠囊，二者質量比相差數(shù)十倍，不易混合均勻，且粉末流動性不佳。根據(jù)褪黑素的理化性質，筆者對工藝進行改進，先將褪黑素與聚乙二醇（PEG）4 0 0 0制成固體分散體，粉碎后細粉與淀粉、助流劑混合，從而使各組分間比例差距縮小，利于混合，且粉末流動性增加。

1 儀器與試藥

ME2 3 5 S電子天平（德國Satoris公司）；ZY9 5 1 Q高效液相色譜儀（安捷倫科技有限公司）；L3 2 9 1 2 4電熱恒溫水浴鍋（上海醫(yī)療器械五廠）；LD-2 0 0粉碎機（常宏制藥機械設備廠）；ZRS-6型智能溶出試驗儀（天津大學無線電廠）。

褪黑素（北京嘉康源科技發(fā)展有限公司，批號：0 9 1 2 2 8 0 1，純度：9 9.9%）；PEG 4 0 0 0（武漢鑫恒隆工貿有限責任公司，批號：2 0 0 9 1 0 2 5）；滑石粉（廣西龍勝華美滑石開發(fā)有限公司，批號：0 9 0 1 2 1）；淀粉（曲阜市藥用輔料有限公司，批號：2 0 0 9 1 2 0 2）；美速靜膠囊（自制，批號：2 0 1 0 5 0 7、2 0 1 0 5 1 6、2 0 1 0 5 1 9，規(guī)格：3 mg·2 5 0 mg－1）；乙腈為色譜純，水為蒸餾水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 美速靜膠囊的制備

采用熔融法制備。稱取PEG 4 0 0 0適量，加入到2 5 0 mL燒杯中，7 5℃水浴不斷攪拌至PEG 4 0 0 0完全熔融，按處方比例緩慢加入褪黑素（PEG 4 0 0 0-褪黑素（質量比）＝2 5∶1），攪拌1 0 min，使其充分混勻。趁熱將含褪黑素的液體倒于干凈的玻璃板上，冷卻后凍干2 4 h，制成褪黑素固體分散體[4]。取褪黑素固體分散體適量，粉碎過8 0目篩，過篩后粉末備用。按處方比例（固體分散體粉末-滑石粉-淀粉（質量比）＝5.5∶1∶1 0.5），稱取褪黑素固體分散體粉末、滑石粉、淀粉適量，混合均勻，2號膠囊填充，即得。

2.2 褪黑素含量測定

2.2.1 色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗。色譜柱：YMC柱（2 5 0 mm×4.6mm，1 0μm）；流動相：乙腈-水（V/V＝3 0∶7 0），流速：1.0 mL·min－1；檢測波長：2 2 3 nm；柱溫：2 5℃；進樣量：2 0 μL。2.2.2 對照品溶液的制備。精密稱取褪黑素5 mg，置5 0 mL量瓶中，用0.1 mol·L－1乙腈溶液溶解并稀釋至刻度，混勻，得濃度為0.1 mg·mL－1的對照品貯備液。精密量取5 mL對照品貯備液，置5 0mL量瓶中，用0.1mol·L－1乙腈溶液稀釋至刻度，混勻，得濃度為0.0 1 mg·mL－1的對照品溶液。

2.2.3 供試品溶液的制備。取美速靜膠囊2 0粒，傾出內容物，研細，精密稱取2 5 mg，置2 5 mL量瓶中，加0.1 mol·L－1乙腈溶液溶解并稀釋至刻度，過濾，即得。另取缺褪黑素的樣品，同法制得陰性供試品溶液。

2.2.4 專屬性試驗。精密吸取對照品、供試品及陰性供試品溶液各2 0μL，按“2.2.1”項下色譜條件注入色譜儀。結果表明，陰性供試品溶液對褪黑素測定無干擾，色譜見圖1。

Fig 1HPLC chromatogramA.negative control；B.reference substance；C.test sample；1.melatonin

2.2.5 線性關系考察。精密量取“2.2.2”項下對照品貯備液1、2、3、4、5、6 mL，置2 5mL量瓶中，加0.1 mol·L－1乙腈溶液稀釋至刻度，分別取2 0 μL注入色譜儀測定峰面積。結果，以檢測濃度為橫坐標（X），峰面積為縱坐標（Y）進行線性回歸，得回歸方程為：Y＝4 5 4 6.0 7 9 9 2 X－1 7.4 2 8 7（r＝0.9 9 9 8），褪黑素檢測濃度線性范圍為4～2 4 μg·mL－1。

2.2.6 精密度試驗。取對照品溶液2 0 μL注入色譜儀，按“2.2.1”項下色譜條件，分別進樣6次，記錄色譜圖，測定峰面積，考察日內精密度；連續(xù)5 d進樣，記錄峰面積，考察日間精密度。結果，日內RSD＝0.9%，日間RSD＝1.0 5%，表明精密度良好。

2.2.7 穩(wěn)定性試驗。取同一份供試品溶液，按“2.2.1”項下色譜條件，分別于0、1、2、5、7、9 h進樣2 0 μL，測定峰面積，記錄色譜圖。結果，RSD＝0.7 5%，表明褪黑素在9 h內穩(wěn)定性良好。2.2.8 重復性試驗。取供試品溶液6份，按“2.2.1”項下色譜條件，測定峰面積并計算褪黑素含量。結果，褪黑素平均含量為9 9.8 0%，RSD＝0.5 6%。

2.2.9 回收率試驗。精密稱取已知含量的美速靜膠囊內容物9份（每份約2 5mg），分別加入對照品貯備液，置2 5mL量瓶中，加0.1 mol·L－1乙腈溶液溶解并稀釋至刻度，過濾，制備成高、中、低濃度溶液各3份，按“2.2.1”項下色譜條件測定峰面積，計算回收率，結果見表1。

2.2.1 0 樣品含量測定。取3批美速靜膠囊（批號：2 0 1 0 5 0 7、2 0 1 0 5 1 6、2 0 1 0 5 1 9）適量，按“2.2.3”項下方法制得供試品溶液，按“2.2.1”項下色譜條件測定，并計算樣品中褪黑素含量。結果含量分別為9 9.8 0%、9 8.3 1%、9 9.5 9%，A+1.8 0 S（A：均值差的絕對值，S：標準差）分別為5.6、6.3、6.1，均＜1 5.0。

2.2.1 1 含量均勻度[5]。取美速靜膠囊1 0粒，分別傾出內容物，置燒杯中，加0.1 mol·L－1乙腈溶液溶解后轉移至5 0 mL量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取2 0 μL，注入色譜儀，按“2.2.1”項下色譜條件測定并計算。結果3批樣品含量均勻度均符合規(guī)定。

2.2.1 2 溶出度測定[5]。取美速靜膠囊6粒，照2 0 1 0年版《中國藥典》（二部）附錄ⅩC第一法（籃法）測定溶出度，以9 0 0mL 2%十二烷基硫酸鈉為溶出介質，溫度（3 7±0.5）℃，轉速1 0 0 r·min－1，于1、3、5、1 0、1 5、2 0、3 0、4 5 min取樣5 mL，同時補加等溫介質5 mL，樣品經(jīng)0.8 μm微孔濾膜過濾，按“2.2.1”項下色譜條件測定，計算累積溶出度，結果見圖2。

表1 回收率試驗結果Tab 1 Results of recovery tests

圖2 美速靜膠囊中褪黑素的溶出曲線Fig 2 Dissolution curves of melatonin in Meisujing capsule

2.3 成型工藝考察

2.3.1 堆密度[6]。堆密度測定采用量筒法。取美速靜藥粉5 g，精密稱定，置量筒中，手持量筒由5 cm高處落在塑膠板上，反復5次，測定容積，共測定5次，以堆密度＝藥粉質量（g）/容積（mL）計算，結果見表2。粉末的平均堆密度為0.6 6 g·mL－1，與原工藝相比明顯增加，更符合制劑要求。

表2 膠囊中粉末的堆密度和休止角測定結果Tab 2 Results of bulk density and angle of repose of powder in capsules

2.3.2 流動性[6]。采用固定漏斗法測定休止角。取半徑為4 0 mm的平底圓皿，將漏斗固定于三角架上，下端正對平底圓皿的圓心，高1 5 cm，取美速靜藥粉使之從漏斗上自然流下，至錐形周邊到平底圓皿邊緣為止，測定錐體高度H，計算公式tgα＝H/R，結果見表2。一般認為休止角＜3 0℃，表明摩擦力小，流動性好。由表2的結果可知，工藝改進后平均休止角為2 3.8°，表明粉末的流動性好。

2.3.3 吸濕百分率的測定[7]。將底部盛有氯化鈉過飽和溶液的干燥器，放入2 5℃恒溫箱內，平衡2 4 h，使干燥器內的相對濕度（RH）達到7 5%，放入裝有適量美速靜藥粉的稱量瓶（厚度約為1 mm），于0、6、1 2、2 4、3 6、4 8、7 2 h稱定重量，以吸濕百分率＝（吸濕后藥粉重量－吸濕前藥粉重量）/吸濕前藥粉重量×1 0 0%計算。以吸濕百分率為縱坐標，時間為橫坐標作圖，即得吸濕曲線，結果見圖3。

圖3 膠囊中藥粉的吸濕曲線Fig 3 Curve of moisture absorption in powder of capsules

由圖3可知，在暴露1 2 h后，藥粉吸濕百分率顯著增加，因此要避免長時間暴露于空氣中，填充過程最好控制在1 2 h以內。2.3.4 臨界相對濕度（CRH）的測定[8～10]。分別取粉末適量，平鋪于稱量瓶中（厚度約為1 mm），恒重后精密稱定，放置于由不同濃度硫酸溶液和飽和鹽液制成的不同濕度的干燥器中，RH分別為1 8.5%、3 3.0%、4 2.7 6%、5 9.2%、6 5.0%、8 5.0%，于2 5℃恒溫箱中放置9 6 h，取出，精密稱定重量，計算各RH下的吸濕百分率。以吸濕百分率為縱坐標，RH為橫坐標作圖，得吸濕曲線，結果見圖4。

圖4 不同相對濕度下膠囊中藥粉的吸濕曲線Fig 4 Moisture absorption curves under different relative humidity in powder of capsules

由圖4可見，藥粉在RH 6 0%時吸濕明顯增加，故膠囊中藥粉的CRH為6 0%，在實際操作中可參考此值對車間的RH進行控制，以免吸濕使產(chǎn)品的含水量過高而影響質量。

3 討論

固體分散體通常有2種制備方法，即熔融法和溶劑法。溶劑法在制備過程中會使用大量有機溶劑，這些有機溶劑可能會帶入制劑中，有害人體健康[4]。因此筆者選用熔融法制備固體分散體：先將PEG 4 0 0 0加熱熔融成液態(tài)，再與褪黑素混合，保證了固體分散體中褪黑素含量的均勻性，后再與輔料物理混合，從而使各組分間比例差距縮小，易于混合，含量均勻度試驗也證明了美速靜膠囊內容物是混勻的。

筆者在試驗中發(fā)現(xiàn)美速靜膠囊內容物長時間暴露于空氣中會迅速吸濕，這主要是因為PEG 4 0 0 0為親水性材料，易吸濕；此外，淀粉中含水量也較高，因此淀粉在使用前必須先烘烤，以去除水分。膠囊填充過程要嚴格控制濕度，控制人員的出入，盡量縮短填充時間，減少在空氣中的暴露。

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Study on Preparation and Forming Technology of Meisujing Capsule

JIANG Tao，ZHANG En-juan，F(xiàn)AN Li，LU Yong，GE Qin
（Dept.of Pharmacy，The Second Affiliated Hospital of Third Military Medical University，Chongqing 4 0 0 0 3 7，China）

OBJECTIVE：To improve preparation process of Meisujing capsules，to establish its quality control method and to investigate forming technology.METHODS：Meisujing capsule was prepared using the excipient and Melatonin solid dispersion which was prepared by hot melting method using melatonin and PEG 4 0 0 0.The content uniformity was studied，and the content and dissolution rate of melatonin in Meisujing capsule were measured by HPLC.The bulk density，angle of repose and critical relative humidity（CRH）were investigated.RESULTS：The linear range of melatonin was 4～2 4 μg·mL－1（r＝0.9 9 98）with an average recovery of 9 9.6%（RSD＝0.6 4%）.The content uniformity of melatonin in 3batches of Meisujing capsule was lower than 1 5.0.The dissolution rate was nearly 9 0%in 1 0min.Its bulk density was 0.6 6g·mL－1，the angle of repose was 2 3.8°，and CRH was 6 0%.CONCLUSION：Established technology of Meisujing capsule is feasible and controllable in quality.

Meisujing capsule；Melatonin；Solid dispersion；Quality control；HPLC

R9 4 4.5

A

1 0 0 1-0 4 0 8（2 0 1 2）3 3-3 1 1 4-0 3

DOI1 0.6 0 3 9/j.issn.1 0 0 1-0 4 0 8.2 0 1 2.3 3.1 6

＊藥師，碩士。研究方向：醫(yī)用新材料和中藥制劑開發(fā)。電話：0 2 3-6 8 7 7 4 7 1 6。E-mail：zhongyaozhijishi@yahoo.com.cn

#通訊作者：副主任藥師。研究方向：中藥制劑研發(fā)。電話：0 2 3-6 8 7 7 4 7 1 6。E-mail：zhongyao2 0 0 7@yahoo.com.cn

2 0 1 1-0 9-0 3

2 0 1 1-1 0-1 5）