鄒成林，陳維鈞，孫曉順，方 璟

(荊州市第二人民醫(yī)院內(nèi)科，湖北 荊州 434000)

促血小板生成素在急性腦梗死患者血清中的表達及臨床意義

鄒成林，陳維鈞，孫曉順，方 璟

(荊州市第二人民醫(yī)院內(nèi)科，湖北 荊州 434000)

目的：探討促血小板生成素(TPO)在急性腦梗死患者血清中的表達及臨床意義。方法：應(yīng)用全自動血細胞分析儀和酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)對腦梗死患者45例及健康體檢者45例進行血小板參數(shù)及血清促血小板生成素檢測，按不同發(fā)病時間分為急性期(1～3d)和恢復(fù)期組(10～14d)；按梗死面積分為腔隙性梗死組(19例)、小面積梗死組(16例)、大面積梗死組(10例)。對各組與對照組之間的促血小板生成素及血小板參數(shù)進行比較。結(jié)果：腦梗死急性期血小板計數(shù)(PLT)、血小板平均體積(MPV)和血小板體積分布寬度(PDW)與對照組比較均統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)；腦梗死恢復(fù)期 PDW與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，PLT、MPV較對照組無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。急性期和恢復(fù)期血清TPO水平較正常組升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。腔梗組和小面積梗死組血清 TPO與對照組相比有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05或P<0.01)，小面積梗死組與腔梗組以及大面積梗死組與對照組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。腦梗死急性期組及恢復(fù)期組，血清TPO水平和血小板總數(shù)與梗死面積無明顯相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)論：腦梗死后TPO水平改變在腦梗死發(fā)病中有一定的作用，可能在腦梗死后腦保護中發(fā)揮一定的作用。

促血小板生成素；急性腦梗死；血小板計數(shù)；血小板平均體積；血小板分布寬度

促血小板生成素(thrombopoeitin，TPO)是體內(nèi)促進巨核細胞增殖、分化、成熟的主要細胞因子之一，與外周血中血小板數(shù)量有關(guān)，近年來研究表明TPO/促血小板生成素受體(TPOR)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的小腦、脊髓、皮質(zhì)、垂體、腦干、扁桃體和海馬可表達，并通過發(fā)揮生物學(xué)活性，起到腦保護作用[1]。同時也有研究認為，TPO對神經(jīng)細胞有促進生長和抗凋亡的作用[2]。TPO可通過選擇性抗神經(jīng)細胞凋亡、促進血管生成、抗炎癥及營養(yǎng)神經(jīng)來發(fā)揮腦保護作用。本研究旨在探討促血小板生成素在急性腦梗死患者血清中的表達及臨床意義。

1 對象與方法

1.1對象

2010年12月至2011年12月在我院神經(jīng)內(nèi)科住院的急性腦梗死患者45例，均符合全國第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會議制定的缺血性腦血管病診斷標準[3]，全部經(jīng)頭顱CT或MRI檢查證實。腦梗死患者中男25例，女20例，年齡40～75(61.2±11.3)歲。對照組為健康體檢者45例，男24例，女21例，年齡44～75(62.6±10.7)歲，均無心、肝、肺、腎、血液和代謝性疾病。兩組年齡、性別間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。所有患者按照頭部CT照片及報告病灶大小，參照Adama分類法[4]將所有病例分為3組。①大面積梗死組：10 例，梗死灶面積>3cm2；②小面積梗死組：16例，腦梗死灶面積處于1.5～3cm2之間；③腔隙性腦梗死組：19例，腦梗死灶面積<1.5cm2。

1.2方法

1.2.1 標本采集 腦梗死組急性期(1～3d)及恢復(fù)期(10～14d)分別抽血5ml，其中1ml置于EDTA-K2抗凝管中，完成血小板參數(shù)檢測。余4ml分離血清于-80℃冰箱保存待測。

1.2.2 檢測方法 取患者入院后次日晨空腹肘前靜脈血，用2%EDTA-K2抗凝，采血1h內(nèi)在Sysmex2100 全自動血細胞分析儀上進行血小板參數(shù)如 PLT、MPV以及PDW的檢查。

血清TPO采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗法(ELISA)，嚴格按照操作說明書進行操作。在MultiskanAscentV2.6型酶標儀檢測各份樣本吸光度，并繪制成標準曲線，測定的樣本吸光度均以此標準曲線計算。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié) 果

2.1腦梗死急性期組、恢復(fù)期組與對照組檢測結(jié)果比較

腦梗死急性期PLT、MPV、PDW與對照組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)；腦梗死恢復(fù)期 PDW與對照組比較差異顯著(P<0.05)，PLT、MPV與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。急性期血清TPO水平較正常組升高，恢復(fù)期血清TPO水平較正常組仍升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組TPO及血小板參數(shù)的比較

注：與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

2.2不同梗死面積急性腦梗死患者血清TPO水平及血小板計數(shù)比較

梗塞面積越大，PLT越低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而腔隙性腦梗死PLT與對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。腔梗組和小面積組血清TPO與對照組相比有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05或P<0.01)，小面積組與腔梗組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，大面積組與對照組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。見表2。

表2 不同病灶大小組PLT及TPO結(jié)果比較

注：與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

2.3相關(guān)性分析

腦梗死急性期組及恢復(fù)期組，血清TPO水平與血小板總數(shù)之間無明顯相關(guān)性(P>0.05)。血清TPO與梗死面積無明顯相關(guān)性(P>0.05)。

3 討 論

TPO是一種造血正調(diào)控因子，可刺激巨核細胞增殖分化、成熟和血小板生成。TPO在腦缺血后的腦保護作用機制目前不十分清楚。近來發(fā)現(xiàn)，造血外組織中也有TPO受體C-mpl的表達，Yang等[1]發(fā)現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)中存在C-mpl，其能對抗細胞凋亡，促進神經(jīng)細胞生長。本研究結(jié)果表明，在腦梗死急性期和恢復(fù)期患者血清TPO水平較正常組均升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。本研究同時發(fā)現(xiàn)腦梗死急性期雖然血小板計數(shù)較正常對照組明顯減少，但TPO水平與血小板計數(shù)無明顯相關(guān)性。這與侯曉平等[5]研究結(jié)果一致。朱在卿等[6]研究結(jié)果顯示，急性腦梗死患者血小板活化標記物CD62P、CD63的表達明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，血小板活化增強，在急性腦梗死疾病發(fā)生過程中起了重要作用。血小板活化因子被激活，損傷處的肌纖維和膠原纖維使血小板迅速在此處聚集、消耗，使血循環(huán)中的血小板數(shù)量減少。

目前調(diào)控體內(nèi)TPO水平的機制還不清楚，其主要受巨核細胞數(shù)及PLT與巨核細胞表面TPO受體(C-MPL)總量的調(diào)控[7]。當(dāng)血小板及成熟巨核細胞減少時，TPO水平增高，反之，當(dāng)血小板或成熟巨核細胞增多時，血清中TPO與受體結(jié)合后即被吸附或降解，致使TPO水平降低[8]。本研究結(jié)果顯示，急性期PLT大量消耗，血清TPO水平反饋性增高?；謴?fù)期雖然 PLT、MPV恢復(fù)正常，但血清PLT水平較對照組仍增高，提示血清TPO升高不僅與PLT數(shù)量變化有關(guān)。由于腦是TPO表達的一個場所，且急性缺血性腦血管病發(fā)病后，存在缺血-再灌注損傷，可導(dǎo)致炎性介質(zhì)表達，釋放白介素及多種炎性物質(zhì)，引發(fā)機體一系列炎性反應(yīng)。在缺氧缺血時，大量的炎性細胞因子滲出，導(dǎo)致機體處于炎性狀態(tài)。TPO是一種快反應(yīng)蛋白，在急性缺氧缺血狀態(tài)下，TPO水平可應(yīng)激性增高。炎癥過程中TPO基因表達增加，發(fā)揮抗炎癥的作用，并且炎癥因子IL-6、IL-12等還可誘導(dǎo)TPO的合成[9]。

本研究發(fā)現(xiàn)，梗死面積越大，PLT越低。腦梗死面積大的患者血管內(nèi)皮細胞損傷更為嚴重，內(nèi)皮細胞中存在C-mpl的表達，TPO可以通過C-mpl受體介導(dǎo)激活內(nèi)皮細胞合成血小板激活因子并通過STAT信號通路誘導(dǎo)血管生成[10]。同時內(nèi)皮細胞損傷能夠產(chǎn)生較多的炎癥介質(zhì)，可以消耗血液中大量的血小板。腔梗組和小面積組血清 TPO較對照組升高，說明TPO產(chǎn)生增多，大腦的保護作用加強，缺氧缺血性腦損傷減輕，但大面積組血清TPO與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，血清TPO與梗死面積也無明顯相關(guān)性。究其原因，一方面可能是隨著腦血管病的病程延長，血清TPO消耗增多，導(dǎo)致其含量下降，另一方面可能是隨著其損傷程度加重，機體產(chǎn)生TPO 的能力降低；這樣，腦損傷后的保護作用減弱，損傷嚴重，預(yù)后也就越差。因此，TPO水平作為評估腦損傷嚴重程度的指標，反映腦損傷的嚴重程度。但TPO在腦梗死發(fā)病過程中的作用機制尚不十分明確，研究其作用機制，將對腦梗死的治療有一定的指導(dǎo)意義。

[1]Yang M O，Xia W J ，Li K R，et al.Identification of TPO Receptors on Central Nervous System-A Preliminary Report[J].Journal of Experimental Hematology，2004，12(4)：494-497.

[2]Delong W G，Born C T.Cytokines in patients with polytrauma[J].Clin Orthop，2004，6：57-65.

[3]中華醫(yī)學(xué)會第四次腦血管病學(xué)術(shù)會議．各類腦血管疾病診斷要點[J]．中華神經(jīng)科雜志，1996，29(6):379-380．

[4]胡響祥.血小板及其參數(shù)的相互關(guān)系與纖維蛋白原在冠心病患者中的變化[J].臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志，2008，7(9)：76.

[5]侯曉平，王潔.急性缺血性腦血管病循環(huán)血小板生成素和血管活性肽類的動態(tài)變化[J].中國急救醫(yī)學(xué)，2002，22(7)：398-399.

[6]朱在卿，許貴剛，劉洋，等.急性腦梗死患者血小板CD62P和CD63的表達及意義[J].山東醫(yī)藥，2011，51 (41)：49-50.

[7]楊玲，辜學(xué)忠，佟力，等.血小板減少癥患者血清促血小板生成素水平的檢測[J].昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2005，26(1)：40-43.

[8 ]Nayara Y，Shozaki Y，Nagahisa H，et al.Serum thrombopoeitin level is not regulated by transcription but by the total count of both megakayrocytes and platelet during thrombocytopenic and thrombocytosis [J].Thromb Haemost，1997，77：808-814.

[9]Burmester H，Wolber E M，F(xiàn)reitag P，et al.Thrombopoietin production in wild-type and interleukin-6 knockout mice with acute inflammation[J].J Interferon Cytokine Res，2005，25(7)：407-413.

[10]Brizzi M F，Battaglia E，Montrucchio G，et al．Thrombopoietin stimulates endothelial cell motility and neoangiogenesis by a platelet-activating factor-dependent mechanism [J].Circ Res，1999，84(7)：785-796.

[編輯] 一 凡

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2012.10.005

2012-07-28

鄒成林(1981-)，男，湖北宜昌人，主治醫(yī)師，碩士，主要從事血液病發(fā)病機制及治療的研究與臨床工作。

R743.3

A

1673-1409(2012)10-R013-03