秦靜海

內(nèi)風(fēng)性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種典型的自身免疫性疾病，免疫功能紊亂在RA發(fā)病機(jī)制中的作用逐漸引起重視，T細(xì)胞功能紊亂是RA患者免疫功能改變的特征之一。T淋巴細(xì)胞尤其是Th細(xì)胞是滑膜浸潤細(xì)胞中的主要細(xì)胞亞群。RA患者自身免疫性T細(xì)胞對自身抗原產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答，促進(jìn)單核巨噬細(xì)胞的活化和細(xì)胞毒性T細(xì)胞的分化，導(dǎo)致大量炎性細(xì)胞因子釋放［1］。目前認(rèn)為Th細(xì)胞功能紊亂，及其亞群分泌的炎性細(xì)胞因子和抗炎細(xì)胞因子失衡在啟動免疫異常過程中，起到了關(guān)鍵性的作用。本研究通過觀察中藥馬錢子對佐劑性關(guān)節(jié)炎(AA)大鼠血清中IL-10、IL-23的干預(yù)作用，以探討馬錢子對抗RA的初步研究。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料 Wistar大鼠，雌雄各半，體質(zhì)量為(180±20)g;制馬錢子由我院中藥房提供(為醋酸浸品，取凈馬錢子用水泡2 d，潤12 h，切1.5 mm薄片，再用5%的醋酸溶液浸泡5 d，水漂3 d，干燥，碾碎);弗氏完全佐劑(FCA，美國sigma公司，批號:019 k8719);IL-10、IL-17試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

1.2 動物分組 Wistar大鼠40只，隨機(jī)分為模型組、醋制馬錢子組、雷公藤多苷片組和空白對照組，每組10只大鼠。

1.3 AA模型的建立以及藥物的干預(yù)方法 除空白對照組外，其余三組大鼠均以FCA于每鼠左后足趾皮內(nèi)注射0.1 ml致炎，而對照組則在每鼠左后足趾皮內(nèi)注射0.1 ml生理鹽水。各組于致炎后第14～21天，分別連續(xù)7 d灌服相應(yīng)劑量的藥物進(jìn)行干預(yù)，給藥劑量分別為醋制馬錢子組(60 mg/kg)、雷公藤多苷片組(50 mg/kg)、空白對照組和模型組(給予生理鹽水2 ml/d灌胃)。于大鼠致炎前、致炎后第14，17和21天分別在足爪容積測量儀上測定右側(cè)足容積，某一時間致炎后與致炎前足容積的差值即為該時大鼠足腫脹度。

1.4 大鼠血清IL-10、IL-23的含量測定 25 d后將各組10只大鼠全部斷頭處死，立即采血，待測血清IL-10、IL-23的含量。采用放射免疫分析測定，具體操作方法按照試劑盒說明書進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 各組藥物干預(yù)后足腫脹度的比較，見表1。

2.2 各組藥物干預(yù)后足大鼠血清IL-10、IL-23的含量的比較醋制馬錢子組和雷公藤多苷片組均能顯著提高AA大鼠血清中抗炎因子IL-10的含量((P＜0.05)，能顯著降低致炎因子IL-23的含量(P＜0.05)，醋制馬錢子組和雷公藤多苷片組組間比較則未見有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見表2。

表1 各給藥組大鼠繼發(fā)側(cè)關(guān)節(jié)腫脹度的影響(n=10)

表2 各給藥組對AA大鼠血清中IL-10和IL-23水平的影響(±s，n=10)

表2 各給藥組對AA大鼠血清中IL-10和IL-23水平的影響(±s，n=10)

注:與空白對照組比較，*P＜0.05，與AA模型組比較，#P＜0.05

組別 劑量 IL-10(pg/ml) IL-23(pg/ml)空白對照組 2 ml生理鹽水49.72±0.48 436.83±5.41 AA組 2 ml生理鹽水 28.45±0.73## 646.39±7.33##雷公藤多苷片組 50/mg/kg 46.06±0.71＊＊ 536.83±8.13＊＊醋制馬錢子組 60/mg/kg 47.32±1.29＊＊ 533.06±3.44*

3 討論

IL-10主要由Th2細(xì)胞產(chǎn)生，它能下調(diào)巨噬細(xì)胞的抗原提呈功能，從而抑制T細(xì)胞產(chǎn)生炎性細(xì)胞因子及PGE2。因此，IL-10具有免疫抑制和抗炎作用。IL-23是參與Th17細(xì)胞分化的重要細(xì)胞因子。IL-23是一種異源二聚體細(xì)胞分子，主要來源于巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞，IL-23可直接刺激Th1細(xì)胞活化分泌IFN-γ，并可誘導(dǎo)抗原遞呈細(xì)胞表達(dá)輔助刺激免疫分子，IL-23在炎癥刺激時分泌，是 Th17重要的存活因子，對Th17細(xì)胞的分化有重要作用［2］。

本研究實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，醋制馬錢子組和雷公藤多苷片組均能顯著提高AA大鼠血清中抗炎因子IL-10的含量，能顯著降低致炎因子IL-23的含量，醋制馬錢子組和雷公藤多苷片組組間比較則未見有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明制馬錢子是通過干涉RA所導(dǎo)致的免疫紊亂而達(dá)到免疫調(diào)節(jié)作用，可為臨床治療RA提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)以供參考。

［1］易炳學(xué)，周道根，龔千鋒，等.馬錢子醋制品對小鼠抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究.時珍國醫(yī)國藥，2009，20(12):3054-3055.

［2］孫曙光，張賓，張董喆，等.制馬錢子對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠免疫調(diào)節(jié)的影響.上海中醫(yī)藥雜志，2010，44(5):75-77.