曹 瑩，蔣 音

(上海市獸藥飼料檢測(cè)所，上海 201103)

隨著現(xiàn)代獸醫(yī)手段廣泛應(yīng)用，化學(xué)藥品導(dǎo)致的耐藥性和藥物殘留問題，引起人們愈來愈多的關(guān)注。中藥因其具有天然性、無(wú)殘留性和無(wú)抗藥性在畜牧業(yè)規(guī)?；a(chǎn)中逐漸擴(kuò)大應(yīng)用。目前可在畜牧養(yǎng)殖過程中使用的中藥品種繁多，最新的2010年版《中國(guó)獸藥典》二部共收載了1114個(gè)品種，比2005年版《中國(guó)獸藥典》新增品種431個(gè)，為中獸藥的普及與應(yīng)用打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。然而，中藥的作用機(jī)理與化藥截然不同，一般起效時(shí)間較長(zhǎng)。同一藥材根據(jù)生長(zhǎng)地域、生長(zhǎng)季節(jié)、炮制方法的不同，其藥效可能會(huì)相差很大。某些廠家為提升中獸藥的“療效”，無(wú)視處方規(guī)定違規(guī)添加抗菌藥物，從而增加了食品安全風(fēng)險(xiǎn)。

2010年初，農(nóng)業(yè)部組織開展中獸藥非法添加禁用藥物和其他藥物成分的檢測(cè)工作，對(duì)涉嫌添加非法藥物成分的止痢散等9種中獸藥散劑進(jìn)行了呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因、氯霉素、喹乙醇、乙酰甲喹等三類抗菌藥物的檢測(cè)。在檢測(cè)過程中，通過數(shù)據(jù)的比較分析，發(fā)現(xiàn)了中獸藥中添加氟喹諾酮類藥物，并及時(shí)建立了儀器鑒別方法，可有效確認(rèn)中獸藥中是否添加了氟喹諾酮類藥物。

1 氟喹諾酮類藥物的檢出

在2010年針對(duì)中獸藥非法添加禁用藥物和其他藥物成分的專項(xiàng)檢測(cè)工作中，筆者使用液質(zhì)聯(lián)用儀在編號(hào)為YC2010014的清瘟敗毒散中成功檢出乙酰甲喹，如圖1所示，上圖為樣品色譜圖，下圖為對(duì)照品色譜圖(喹乙醇Rt=4.39，乙酰甲喹 Rt=13.92)，但在7.39 min處明顯有一未知組分A存在。筆者又比對(duì)了另外兩個(gè)品牌的清瘟敗毒散(YC2010055、YC2010011)與清瘟敗毒片(YC2010024)的色譜圖(圖2、圖3)，在相同位置并無(wú)此色譜峰，但清瘟敗毒片在10.61 min有一未知組分B存在。通過二極管陣列檢測(cè)器的紫外全掃描圖比對(duì)，A、B組分的紫外圖譜(圖4)幾乎一致，可以認(rèn)定為同類化合物，其紫外特征與氟喹諾酮類藥物一致。再通過質(zhì)譜掃描比對(duì)(圖5)，A、B組分都有m/z為44的氟喹諾酮類藥物特征碎片，經(jīng)確認(rèn)A為環(huán)丙沙星，B為恩諾沙星，兩者的含量均為3%左右。

2 主要方法的建立

選用液質(zhì)聯(lián)用方法可以對(duì)中獸藥中非法添加的氟喹諾酮類藥物進(jìn)行快速確證，紫外全掃描圖可對(duì)化合物的類別進(jìn)行區(qū)分，質(zhì)譜全掃描圖可得出化合物的特征碎片，作為確證依據(jù)?；痉治隽鞒倘缦?。

2.1 儀器分析條件 選用液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀(配置如Waters2695液相色譜+ZQ4000質(zhì)譜檢測(cè)器+PDA996二極管陣列檢測(cè)器)，一次進(jìn)樣可以采集紫外全掃描圖和總離子流掃描圖。色譜柱為質(zhì)譜專用細(xì)徑柱，流動(dòng)相選擇乙腈/甲酸溶液體系(甲酸溶液濃度控制在2%以下為宜;建議乙腈的體積比低于 15%)，流速控制在 0.2 ～0.3 mL/min。質(zhì)譜條件方面主要是選擇ESI正離子模式，錐孔電壓控制在30～40 V，確保特征碎片出現(xiàn)，其余如電離電壓、氮?dú)饬髁烤鶓?yīng)根據(jù)儀器要求盡量?jī)?yōu)化。

2.2 同類化合物數(shù)據(jù)收集比較 以氟喹諾酮類藥物為例，在發(fā)現(xiàn)恩諾沙星、環(huán)丙沙星的非法添加后，應(yīng)及時(shí)對(duì)其他氟喹諾酮類藥物的信息在相同的色譜、質(zhì)譜條件下進(jìn)行收集比對(duì)(圖6、圖7)，以便快速確證。

如圖所示，可將紫外波長(zhǎng)277～287 nm處的強(qiáng)吸收峰、325 nm附近兩個(gè)弱吸收峰、以及m/z為44的特征碎片作為氟喹諾酮類藥物的“鑒別點(diǎn)”。筆者使用上述流程對(duì)2009年的幾份不合格的中獸藥產(chǎn)品進(jìn)行分析，在一份清熱散的樣品中檢出恩諾沙星。

3 討論

無(wú)論是中獸藥還是化藥，獸藥中組分的含量相對(duì)較高，通過二極管陣列檢測(cè)器可以在固定的色譜條件下得到各個(gè)特征組分的紫外全掃描圖，同類藥物的紫外全掃描圖整體形態(tài)不會(huì)有較大差異，完全可以作為未知添加藥物鑒別的“突破口”。另一方面，隨著串聯(lián)質(zhì)譜儀的普及，單極質(zhì)譜儀因其靈敏度和專屬性較差，在定量、定性檢測(cè)中逐漸被淘汰，但往往串聯(lián)質(zhì)譜儀的離子對(duì)監(jiān)測(cè)(MRM)模式在常規(guī)檢測(cè)中僅針對(duì)設(shè)定的已知通道提供數(shù)據(jù)，難以收集其他組分的特征碎片信息，不適合未知添加藥物的定性鑒別。

本研究主要以定性為主，目的在于增加中獸藥質(zhì)量控制手段，降低獸藥殘留風(fēng)險(xiǎn)，防止違禁藥物利用“中獸藥”、“天然提取物”、“綠色添加劑”等形式進(jìn)入養(yǎng)殖環(huán)節(jié)。本文建立的檢測(cè)流程也同樣適合其他類別藥物的快速鑒別。