姬志強(qiáng)，石 磊，李永麗，康文藝

（1.解放軍第155中心醫(yī)院，河南開封475003；2.河南大學(xué)中藥研究所，河南開封 475004）

大羽鱗毛蕨揮發(fā)性成分的GC-MS分析

姬志強(qiáng)1，2＊，石 磊1，李永麗1，康文藝2#

（1.解放軍第155中心醫(yī)院，河南開封475003；2.河南大學(xué)中藥研究所，河南開封 475004）

目的：分析大羽鱗毛蕨的揮發(fā)性成分。方法：采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)首次對(duì)大羽鱗毛蕨的揮發(fā)性成分進(jìn)行分析和鑒定。色譜柱為HP-5 MS石英彈性毛細(xì)管柱（30.0 m×250μm×0.25μm），載氣為高純氦氣（99.999%），流速為1.0 mL·min－1，進(jìn)樣口溫度為250℃，程序升溫；電離方式為EI源，電離能量為70 eV，離子源溫度為250℃，四極桿溫度為150℃，質(zhì)量掃描范圍為30～440 amu。結(jié)果：從大羽鱗毛蕨根中鑒定出了24個(gè)化合物，占根中揮發(fā)性成分的97.06%；從其葉中鑒定出了43個(gè)化合物，占葉中揮發(fā)性成分的88.46%。根和葉有20個(gè)共有成分。結(jié)論：壬醛有可能是大羽鱗毛蕨的主要香氣成分，2，6-二叔丁基對(duì)甲苯酚有可能是大羽鱗毛蕨中主要活性成分。

大羽鱗毛蕨；揮發(fā)性成分；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

大羽鱗毛蕨（Dryopteris bodinieri）屬于鱗毛蕨科鱗毛蕨屬植物[1]。化學(xué)研究表明，該屬植物最重要的化學(xué)成分是間苯三酚類化合物，另外還含有萜類和黃酮類化合物[2，3]。目前關(guān)于大羽鱗毛蕨的化學(xué)成分和揮發(fā)性成分均未見有文獻(xiàn)報(bào)道，因此本試驗(yàn)采用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用技術(shù)首次分析鑒定了大羽鱗毛蕨的揮發(fā)性成分。

1 儀器與試藥

GC 6890 N GC/5975 MSGC-MC聯(lián)用儀（美國安捷倫公司）；手動(dòng)SPME裝置，萃取纖維頭為65μm聚二甲基硅氧烷（PDMS-DVB）（美國Supelco公司）。

C6～C26正構(gòu)烷烴（美國Alfa Aesar公司）。大羽鱗毛蕨于2006年5月采集于云南西雙版納地區(qū)，由西雙版納植物園崔景云高級(jí)工程師鑒定為真品，標(biāo)本存放于河南大學(xué)天然藥物研究所（標(biāo)本號(hào)：200605023）。

2 方法與結(jié)果

2.1 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)前先將SPME裝置的萃取纖維頭在GC儀的進(jìn)樣口老化10 min，老化溫度為250℃，載氣體積流量為1.0 mL·min－1。取陰干大羽鱗毛蕨根和葉各0.7 g，置于5 mL樣品瓶中，蓋上蓋子，插入65μm PDMS-DVB萃取纖維頭，于80℃下頂空取樣30 min后立即取出，在GC儀進(jìn)樣口（250℃）脫附1 min。

2.2 試驗(yàn)條件

2.2.1 GC條件 色譜柱：HP-5 MS石英彈性毛細(xì)管柱（30.0 m×250μm×0.25μm）；載氣：高純氦氣（99.999%）；流速：1.0 mL·min－1；進(jìn)樣口溫度：250℃；程序升溫，色譜柱初始溫度為50℃（保持1.0 min），以3℃·min－1升溫至120℃（保持2 min），再以4℃·min－1升溫至210℃（保持10 min）；不分流進(jìn)樣。

2.2.2 MS條件 電離方式：電轟擊電離（EI）；電離能量：70 eV；離子源溫度：250℃；四極桿溫度：150℃；傳輸線溫度：280℃；電子倍增器電壓：1 765 V；質(zhì)量掃描范圍：30～440 amu。采用RTLPEST3.L和NIST05.L數(shù)據(jù)庫進(jìn)行譜圖檢索。

2.3 保留指數(shù)（KI）測定

KI是化學(xué)物質(zhì)在相應(yīng)類型分離柱中對(duì)應(yīng)正構(gòu)烷烴的一種比較穩(wěn)定的性質(zhì)。只要用于分離的色譜柱性質(zhì)相同、GC條件相近，同種組分在不同儀器上計(jì)算出來的KI值通常為常數(shù)。因此，同時(shí)考慮分離峰的MS匹配度和KI匹配度可大大提高鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性。在芳香精油復(fù)雜組分鑒定中，該方法在國際上得到普遍認(rèn)可并被大量使用[4]。

測定方法[5，6]：將色譜正構(gòu)烷烴樣品（C6～C26）各取等量混合后，按上述GC條件進(jìn)行色譜分析，測定各正構(gòu)烷烴的保留時(shí)間，然后在完全相同的條件下，對(duì)揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，測定各組分的保留時(shí)間，再根據(jù)下述線性升溫KI計(jì)算公式計(jì)算出各組分的KI值。

式中，KI為Kovats保留指數(shù)；tR為被測組分的保留時(shí)間；下標(biāo)x為被測組分符號(hào)；下標(biāo)n和n+1為分別具有n和n+1個(gè)碳原子的正構(gòu)烷烴符號(hào)。

2.4 結(jié)果

按上述試驗(yàn)條件操作，得到大羽鱗毛蕨根和葉的揮發(fā)油總離子流圖（分別見圖1、圖2），通過計(jì)算機(jī)檢索和人工解析各峰相應(yīng)的MS圖，共鑒定出了47個(gè)化合物，詳見表1。

表1 大羽鱗毛蕨根和葉揮發(fā)油的化學(xué)成分Tab 1 Chemical constituents of volatile oil from the roots and leaves of D.bodinieri

續(xù)表1Continued tab 1

由表1可知，本研究首次從大羽鱗毛蕨根中分離鑒定了24個(gè)化合物，占根揮發(fā)性成分總量的97.06%，主要成分有壬醛（11.12%）、2，6-二叔丁基對(duì)甲苯酚（9.77%）、十六烷（8.48%）和十五烷（8.34%）；從大羽鱗毛蕨葉中分離鑒定了43個(gè)化合物，占葉中揮發(fā)性成分總量的88.46%，主要成分有十六烷（6.87%）、十五烷（5.82%）、（E）-2-甲基-2-丁烯醛（4.95%）、6，7，8，9-四氫-1，2，3-三甲氧基-9-甲基-5H-苯并環(huán)庚烯（4.60%）和十七烷（4.53%）。其中，有20個(gè)化合物同時(shí)存在于大羽鱗毛蕨根和葉的揮發(fā)性成分中。

3 討論

由表1可知，壬醛在大羽鱗毛蕨根的揮發(fā)性成分中含量達(dá)11.12%，在葉中含量也為3.25%，而壬醛具有強(qiáng)烈的油脂氣味和甜橙氣息，是調(diào)制玫瑰、橙花、香紫羅蘭等香精的主要成分之一，因此也是大羽鱗毛蕨主要的香氣成分[7]。2，6-二叔丁基對(duì)甲苯酚俗稱抗氧化劑264，簡稱BHT，是一種用途廣泛、用量較大的通用型酚類抗氧化劑，廣泛用于食品、藥品和化妝品保鮮上[8]。BHT在大羽鱗毛蕨根中的含量為9.77%，在葉中含量為4.04%，提示大羽鱗毛蕨可能具有潛在的抗氧化活性。

在大羽鱗毛蕨葉的揮發(fā)性成分中檢測到了角鯊烯（1.58%），而角鯊烯具有較強(qiáng)的生物活性，在血液中有很強(qiáng)的輸送活性氧的能力，可增強(qiáng)機(jī)體生理功能、提高免疫力、抵抗紫外線傷害，是性能優(yōu)良的血液輸氧劑和生物氧化劑[9]。角鯊烯的發(fā)現(xiàn)為大羽鱗毛蕨的抗缺氧和抗疲勞作用提供了一定的理論依據(jù)。

在大羽鱗毛蕨根和葉的揮發(fā)性成分中，烷烴占的比例均較大。飽和的脂肪烴是植物體蠟質(zhì)的主要成分，對(duì)植物起著保護(hù)的作用，一旦形成就不再參與物質(zhì)代謝，是新陳代謝末端的產(chǎn)物[10]。6，10，14-三甲基-2-十五烷酮在大羽鱗毛蕨根和葉中均有存在，該化合物存在于多種植物的揮發(fā)性成分中[11～14]，其在植物體內(nèi)部的作用和藥理作用尚未有文獻(xiàn)報(bào)道，值得進(jìn)一步研究。

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Analysisof Volatile Constituentsin Dryopterisbodinieri by GC-MS

JI Zhi-qiang，SHI Lei，LI Yong-li
（No.155 Central Hospital of PLA，Henan Kaifeng 475003，China）
JI Zhi-qiang，KANG Wen-yi
（Institute of Traditional Chinese Medicine，Henan University，Henan Kaifeng 475004，China）

OBJECTIVE：To analyze the volatile constituents in Dryopteris bodinieri.METHODS：GC-MSwas used to analyze and identify the volatile constituents in D.bodinieri for the first time.HP-5 MSfused-silica capillary column（30.0 m×250μm×0.25 μm）was used with high pure helium（99.999%）as carrier gas，programmed temperature，at the flow rate of 1.0 mL·min－1and injection temperature of 250℃.EI source was applied with electron energy of 70 eV，ion source temperature of 250℃，quadropole temperature of 150℃，mass scan range of 30～440 amu.RESULTS：24 compounds were identified from the volatile constituents in the roots of D.bodinieri，accounting for 97.06%of volatile constituents；43 compounds from the leaves，accounting for 88.46%.There were 20 same compounds.CONCLUSION：Nonanal may be the main fragrance constituents and butylated hydroxytoluene may be the active compound of D.bodinieri.

Dryopteris bodinieri；Volatile constituents；GC-MS

R284.1；R917

A

1001-0408（2012）43-4098-03

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2012.43.26

2011-11-08

2012-04-23）