尹春玲

湖南省南華大學(xué)附屬第三醫(yī)院藥劑科，湖南衡陽 421900

四君子湯加味對小鼠抗缺氧作用的研究

尹春玲

湖南省南華大學(xué)附屬第三醫(yī)院藥劑科，湖南衡陽 421900

目的 觀察四君子湯加味在不同缺氧狀況下的抗缺氧作用。 方法 采用小鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，觀察四君子湯加味在常壓缺氧情況下和高壓缺氧情況下對小鼠存活時(shí)間的影響。實(shí)驗(yàn)分組采用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分組法，統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 16.0軟件。 結(jié)果（1）四君子湯加味在常壓缺氧情況下對小鼠存活時(shí)間的影響，根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果可知四君子湯加味低劑量組和高劑量組均可顯著延長常壓缺氧情況下小鼠存活時(shí)間，和0.9%NaCl溶液對照組相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P<0.05）；（2）四君子湯加味在高壓缺氧情況下對小鼠存活率的影響，根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果可知四君子湯加味低劑量組和高劑量組小鼠存活率分別為70.0%、85.0%，與0.9%NaCl溶液組比較，均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這說明四君子湯加味不僅在常壓缺氧情況下可明顯延長小鼠存活時(shí)間，而且在高壓缺氧情況下提高了小鼠的存活率。 結(jié)論四君子湯加味明顯提高缺氧條件下小鼠存活時(shí)間和存活率，具有明顯的抗缺氧作用。

四君子湯加味；缺氧；抗缺氧；研究

運(yùn)動(dòng)員在運(yùn)動(dòng)和訓(xùn)練中經(jīng)常會產(chǎn)生缺氧，致使機(jī)體耐力下降，因此，提高機(jī)體的耐缺氧能力對運(yùn)動(dòng)員訓(xùn)練具有很重要的意義[1]。四君子湯加味出自《曾廣盛方》，由黨參、白術(shù)、茯苓、甘草、莪術(shù)、三棱和牛膝組成，是健脾益氣的良方，具有“調(diào)補(bǔ)正氣，扶正固本，適應(yīng)原樣”的作用[2]。方中黨參為君，甘溫益氣，健脾養(yǎng)胃；臣以苦溫之白術(shù)，健脾燥濕，加強(qiáng)益氣助運(yùn)之力；佐以甘淡之茯苓，健脾滲濕，苓術(shù)相配，則健脾祛濕之功益著，莪術(shù)、三棱和牛膝相配伍具有活血行氣止痛之效；使以炙甘草，益氣和中，調(diào)和諸藥[3]。七藥配伍，共奏益氣健脾、氣血雙補(bǔ)之功，作為扶正固本的補(bǔ)益方劑，根據(jù)理論推測，四君子湯加味對機(jī)體耐缺氧能力可能有增強(qiáng)作用，基于這一設(shè)想，本研究通過對小鼠在不同缺氧狀況下進(jìn)行抗缺氧實(shí)驗(yàn)，以觀察小鼠耐受缺氧的能力，并探討四君子湯加味的抗缺氧效果，并對其效果進(jìn)行評價(jià)。

1 材料與方法

1.1 材料

雄性昆明小鼠160只，體重18～22 g。四君子湯加味以黨參、白術(shù)、茯苓、甘草、莪術(shù)、三棱和牛膝按質(zhì)量 10∶8∶5∶3∶20∶10∶5配方。黨參先用水浸泡30 min，再與其他藥混合浸泡30 min，然后煎煮30 min，用紗布濾出藥液，再加水煎煮30 min，合并2次藥液，沸水濃縮成生藥量為0.5 g/mL，1.0 g/mL，1.5 g/mL的不同濃度藥液，存放于4℃冰箱待用。

1.2 方法

實(shí)驗(yàn)一：取昆明種小鼠80只，隨機(jī)分成4組，每組20只，采用腹腔注射給藥。0.9%NaCl溶液組注射0.9%NaCl溶液12.5 g/kg，四君子湯低劑量組和高劑量組分別注射12.5 g/kg和37.5 g/kg，紅景天組注射12.5 g/kg。30 min后將小鼠放入300 mL廣口磨口瓶中密封 （瓶內(nèi)放堿石灰15g吸收CO2和H2O，墊濾紙用于吸收尿液），記錄小鼠存活時(shí)間，以呼吸停止為指標(biāo)。

實(shí)驗(yàn)二：取昆明種小鼠80只，隨機(jī)分成4組，每組20只。0.9%NaCl溶液組，采用灌胃法每天灌注0.9%NaCl溶液10 g/kg，連續(xù)7 d；四君子湯加味低劑量組、四君子湯加味高劑量組和紅景天組，分別采用灌胃法每天灌胃注四君子湯加味10 g/kg、35 g/kg和10 g/kg，連續(xù)7 d。第7天給藥60 min后，將各組分別放入加壓倉內(nèi)，以一定速度抽至預(yù)定的加壓條件（58.19～69.999 kPa），保持加壓狀態(tài)，待 0.9%NaCl溶液組加壓倉中存活小鼠減至5只時(shí)，立即恢復(fù)至常壓，記錄各組小鼠存活數(shù)、死亡只數(shù)，統(tǒng)計(jì)存活率。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，計(jì)量資料組間比較采用 t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 四君子湯加味在常壓缺氧情況下對小鼠存活時(shí)間的影響

見表1。由表1可知四君子湯加味低劑量組和高劑量組均可顯著延長常壓缺氧情況下小鼠存活時(shí)間，低劑量組、高劑量組和紅景天組耐常壓缺氧存活時(shí)間與0.9%NaCl溶液組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

表1 四君子湯加味在常壓缺氧情況下對小鼠存活時(shí)間的影響

2.2 四君子湯加味在高壓缺氧情況下對小鼠存活率的影響

見表2。由表2可知四君子湯加味低劑量組、高劑量組和紅景天組小鼠存活率分別為70.0%、85.0%和75.0%，與0.9%NaCl溶液組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說明四君子湯加味可提高小鼠在高壓缺氧情況下的存活率。

表2 四君子湯加味在高壓缺氧情況下對小鼠存活率的影響

3 討論

本研究是對小鼠在不同缺氧條件下進(jìn)行抗缺氧實(shí)驗(yàn)，采用方法簡便易行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性高，分析軟件選用也較恰當(dāng)，為四君子湯加味的抗缺氧研究提供了較好范例。本文設(shè)計(jì)了兩種缺氧情況下的實(shí)驗(yàn)，有針對性地研究了四君子湯加味的抗缺氧作用，四君子湯加味在常壓缺氧情況下可明顯延長小鼠存活時(shí)間，在高壓缺氧情況下作用也較為顯著，說明其具有抗缺氧作用，這無疑為四君子湯加味的進(jìn)一步開發(fā)利用提供了客觀依據(jù)。有關(guān)文獻(xiàn)顯示在特異性心肌缺氧情況下，紅景天苷明顯延長了小鼠的存活時(shí)間，并與濃度成量效關(guān)系，進(jìn)一步證明了紅景天苷能減少細(xì)胞耗氧，改善心肌氧的供求。此外，紅景天苷對亞硝酸鈉中毒小鼠也有明顯的保護(hù)作用，可延長小鼠中毒后的存活時(shí)間，為紅景天養(yǎng)生保健方面提供了依據(jù)[4-5]。小鼠心肌缺氧和中毒后，組織對氧的利用率明顯下降，極易引起組織損傷，但是紅景天苷能明顯提高存活時(shí)間，說明其具備抗缺氧能力。本實(shí)驗(yàn)中，紅景天苷和四君子湯加味均能提高小鼠在缺氧情況下存活時(shí)間，紅景天組作為陽性對照，更進(jìn)一步說明四君子湯加味的抗缺氧作用。也有文獻(xiàn)報(bào)道，四君子湯加味能提高小鼠血清SOD、CAT和GSH-Px的活力，降低LPO及血脂含量，起到抗氧化、解毒和抗衰老作用[6-7]。四君子湯加味能不同程度地促進(jìn)大鼠力竭運(yùn)動(dòng)后骨骼肌疲勞的恢復(fù)，對力竭大鼠的心肌損傷也有明顯的保護(hù)作用[8-9]。四君子湯對缺氧環(huán)境所致的心功能損傷和心肌損傷具有明顯的緩解作用[10-12]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果和以上研究結(jié)果相一致，進(jìn)一步闡明四君子湯加味具有增強(qiáng)機(jī)體抗缺氧能力。

在中醫(yī)臨床應(yīng)用方面，四君子湯加味是作為健脾益氣的代表方劑。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，對照組的存活時(shí)間明顯低于四君子湯加味組，紅景天組作為陽性對照組，四君子湯加味組和紅景天組都能延長小鼠存活時(shí)間和存活率。這一結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了四君子湯加味的抗缺氧作用，為臨床四君子湯加味的研究和開發(fā)提供了有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為四君子湯加味應(yīng)用于臨床治療和預(yù)防保健提供了良好的研發(fā)前景。

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The effect of mouse anti-anoxia research of Si Jun Zi Tang Jia Wei

YIN Chunling
Department of Pharmacy,Third Affiliated Hospital of Nanhua University in Hu'nan Province,Hengyang 421900,China

Objective To observe the anti-anoxia of Si Jun Zi Tang Jia Wei under different hypoxic conditions.Methods Used animal experiment to observe mouse's survival time when the mouse was injected with Si Jun Zi Tang Jia Wei under the hypoxic and high hypoxic conditions.The experimental groups used a randomization method of experimental animals,the data analysis used statistical analysis SPSS 16.0 software.Results(1)Si Jun Zi Tang Jia Wei had effect to the survival time of mouse in the hypoxic,the statistical results showed that low dose group and high dose group of Si Jun Zi Tang Jia Wei prolonged the survival time of mouse in the hypoxic,there were significant differences compared to the saline group(P<0.05).(2)Si Jun Zi Tang Jia Wei had effect to the survival rate of mouse in the high hypoxic,the statistical results showed that the mouse survival rate of low dose group and high dose group were 70.0%and 85.0%,there were significant differences compared to the saline group (P<0.05).It illustrated that Si Jun Zi Tang Jia Wei not only significantly prolonged the survival time of mouse in the hypoxic,but also improved the survival rate of mouse in the high hypoxia.Conclusion Si Jun Zi Tang Jia Wei significantly improves the survival time and the survival rate of mouse under the hypoxic conditions,it has obvious effect of anti-anoxia.

Si Jun Zi Tang Jia Wei;Pypoxia;Anti-anoxia;Study

R28

A

1674-4721（2012）11（a）-0005-02

2012-07-06 本文編輯：魏玉坡）