何方洋

(北京勤邦生物技術(shù)有限公司，北京 102206)

獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)研究

何方洋

(北京勤邦生物技術(shù)有限公司，北京 102206)

從國內(nèi)外食品安全獸藥殘留現(xiàn)狀、制約食品安全的因素、獸藥毒理性分析以及建立具有中國特色的食品安全快速檢測(cè)體系4個(gè)方面論述了獸藥殘留對(duì)食品安全的危害以及應(yīng)對(duì)措施，并對(duì)食品安全快速檢測(cè)技術(shù)在未來的發(fā)展趨勢(shì)進(jìn)行了展望．

獸藥殘留;食品安全;快速檢測(cè)技術(shù)

中國是畜產(chǎn)品的生產(chǎn)和消費(fèi)大國，2010年我國肉類總產(chǎn)量達(dá)7925萬噸，比上年增長(zhǎng)了3.6%［1］，畜牧業(yè)的發(fā)展促進(jìn)了肉類工業(yè)的快速發(fā)展．獸藥作為發(fā)展現(xiàn)代牧業(yè)的物質(zhì)基礎(chǔ)，對(duì)于預(yù)防動(dòng)物疾病、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、改善動(dòng)物產(chǎn)品品質(zhì)和提高飼料利用率等方面起到重要的作用，但濫用獸藥往往會(huì)造成動(dòng)物組織中的藥物殘留，對(duì)公眾健康造成潛在危害，也成為制約養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展的重要因素．所以提高獸藥殘留對(duì)食品安全危害問題的認(rèn)識(shí)，并提出相應(yīng)的應(yīng)對(duì)措施是當(dāng)前勢(shì)在必行的任務(wù)．

1 國內(nèi)外食品中獸藥殘留現(xiàn)狀

西方發(fā)達(dá)國家對(duì)于食品安全問題非常重視，從20世紀(jì)80年代起即開始討論食品中的獸藥殘留問題，并開始對(duì)生產(chǎn)食品的動(dòng)物限制使用獸藥的品種．如歐盟在1997年開始討論動(dòng)物長(zhǎng)期使用抗菌藥會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性滋生的問題，1999年開始禁止使用喹乙醇和卡巴氧．我國從20世紀(jì)90年代初開始制定藥物在動(dòng)物食品中的最高殘留限量標(biāo)準(zhǔn)和檢測(cè)方法，到20世紀(jì)90年代末已制定了許多符合國際標(biāo)準(zhǔn)的藥物殘留指標(biāo)．

由于我國的畜禽養(yǎng)殖和屠宰是以個(gè)體分散為主，生產(chǎn)加工設(shè)備簡(jiǎn)陋、生產(chǎn)環(huán)境差，缺少檢驗(yàn)設(shè)備和人員，更沒有建立生產(chǎn)管理制度，致使一部分人置法律、道德和人民群眾的生命健康于不顧，制造出不少成本廉價(jià)、品質(zhì)低劣的有毒有害食品，而且手段不斷翻新，使檢測(cè)和監(jiān)控難以落實(shí)到位，實(shí)際技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)和安全指標(biāo)與國際標(biāo)準(zhǔn)還有較大的差距．對(duì)于消費(fèi)者，由于經(jīng)濟(jì)收入和購買力有限，相當(dāng)一些人消費(fèi)層次低，他們?cè)谶x擇食品方面主要考慮價(jià)格便宜，而忽視了食品安全．消費(fèi)者食品安全意識(shí)的提高可以牽引食品生產(chǎn)者、經(jīng)營者朝著健康、穩(wěn)定方向發(fā)展，并且消費(fèi)者對(duì)食品的監(jiān)督是食品安全監(jiān)督體系中的重要組成部分和有生力量．故要想使動(dòng)物源性食品中獸藥殘留問題從根本上進(jìn)行改善，需要國家政府、食品生產(chǎn)企業(yè)和消費(fèi)者三方共同努力得以實(shí)現(xiàn)．

2 獸藥殘留的毒理性分析

食品中獸藥殘留問題早在20世紀(jì)70年代就引起國際關(guān)注，并于80年代在WHO和FAO成立的CAC下設(shè)立了CCRVDF，負(fù)責(zé)制定食品中獸藥允許殘留限量標(biāo)準(zhǔn)［2］．食品中獸藥殘留所產(chǎn)生的危害是多方面的，可以包括以下幾個(gè)方面．

2.1 中毒反應(yīng)

一些抗菌抗生素類藥物如青霉素類、磺胺類、四環(huán)素類及某些氨基糖苷類抗生素，由于具有抗原性，可刺激機(jī)體內(nèi)抗體的形成，一些過敏性個(gè)體在接觸這些藥物的殘留后，容易引發(fā)過敏反應(yīng)或變態(tài)反應(yīng)，表現(xiàn)為瘙癢、紅疹、頭痛等癥狀．磺胺類藥物還可能引起造血系統(tǒng)紊亂，出現(xiàn)急性溶血性貧血，粒細(xì)胞缺乏癥，再生障礙性貧血，血小板減少和嗜酸性白細(xì)胞增多癥等;還可能引起腎損害，特別是乙酰化磺胺在酸性尿中溶解度降低，析出結(jié)晶后損害腎臟．近幾年發(fā)生的“瘦肉精”中毒事件，是由一種β-受體激動(dòng)劑——克倫特羅藥物引起的，可引起交感神經(jīng)興奮．如果在動(dòng)物肌肉和內(nèi)臟含有較高濃度的克倫特羅，人體在食入時(shí)，則很快會(huì)引起心悸、頭痛、頭暈眼花、肌肉震顫和四肢發(fā)麻無力等急性毒性作用［3］．

2.2 誘導(dǎo)產(chǎn)生耐藥菌株

動(dòng)物經(jīng)常反復(fù)接觸某一種抗菌藥物后，其體內(nèi)敏感菌株將受到選擇性的抑制，從而使耐藥菌株大量繁殖．而抗生素飼料添加劑長(zhǎng)期、低濃度使用是耐藥菌株增加的主要原因．人體經(jīng)常使用含抗生素藥物殘留的動(dòng)物性食品，一方面可能引起人畜共患病耐藥性的病原菌大量增加，另一方面帶有藥物抗性的耐藥因子可傳遞給人類病原菌，由此導(dǎo)致人體產(chǎn)生耐藥致病菌，如沙門氏菌和大腸桿菌，會(huì)出現(xiàn)抗生素?zé)o法控制人類細(xì)菌感染性疾病情況［2］．據(jù)美國新聞周刊報(bào)道，僅1992年全美就有13300名患者死于抗生素耐藥性細(xì)菌感染［4］．

2.3 “三致”作用

苯并咪唑類藥物是獸藥臨床上常用的廣譜抗蠕蟲病的藥物，可持久地殘留于肝臟內(nèi)，并對(duì)動(dòng)物具有潛在的致畸性和致突變性．另外，殘留于食品中的丁苯咪唑、苯咪唑、丙硫咪唑和苯硫氨酯具有致畸作用，克球粉和雌激素、硝基呋喃類等違禁藥物則具有致癌作用．近來發(fā)現(xiàn)一些抗生素類藥物如四環(huán)素類、氨基糖苷類和β-內(nèi)酰胺類等抗生素均被懷疑具有“三致”作用［5］．

2.4 引起激素樣作用

人經(jīng)常食用含有激素殘留的食品，會(huì)干擾人體內(nèi)的激素平衡，產(chǎn)生一系列激素樣作用．當(dāng)人體攝入了激素殘留的食品后它就蓄積在脂肪組織中，然后通過胎盤傳遞給胎兒，人的生殖系統(tǒng)障礙、發(fā)育異常及某些癌癥如乳腺癌、睪丸癌等均與激素樣作用有關(guān)［2］．

3 獸藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)

面對(duì)層出不窮的食品安全問題和我國為數(shù)眾多的食品經(jīng)營企業(yè)小而亂，溯源管理難等問題．對(duì)于中小型食品企業(yè)單靠實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法和儀器難以即時(shí)、快速、全面地從源頭進(jìn)行監(jiān)控，因此，快速檢測(cè)技術(shù)和儀器及試劑的研發(fā)有著特殊的意義．在檢測(cè)方法體系的構(gòu)建上，從我國實(shí)際情況出發(fā)，也形成了“快速篩查方法”與“確證檢測(cè)方法”相結(jié)合的體系．目前針對(duì)動(dòng)物性食品中獸藥殘留的快速檢測(cè)技術(shù)主要有酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)、膠體金免疫層析技術(shù)、微生物抑制法檢測(cè)技術(shù)、化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測(cè)技術(shù)等．上述快速檢測(cè)技術(shù)可以滿足對(duì)大量樣品檢測(cè)、縮短檢測(cè)周期、降低檢測(cè)費(fèi)用的需求，也是未來快速檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)．

3.1 微生物抑制法快速檢測(cè)試劑盒

抗生素在奶牛飼養(yǎng)過程中是醫(yī)治乳房炎等疾病的高效獸藥，牛奶中抗生素殘留問題日益受到消費(fèi)者的重視，已成為乳業(yè)管理和技術(shù)的難題之一．抑制法測(cè)定抗生素殘留方法開發(fā)于20世紀(jì)70年代，可測(cè)定β-內(nèi)酰胺類抗生素．目前的微生物抑制法快速檢測(cè)試劑盒多采用微孔形式，可同時(shí)測(cè)定96個(gè)樣品．樣品在64℃下培養(yǎng)25 h后，可見結(jié)果，陰性的樣品由于微生物產(chǎn)酸，培養(yǎng)基從紫色變黃色，陽性則不變色．該方法操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)成本低，無需配套儀器設(shè)備．最近開發(fā)的微生物抑制法快速檢測(cè)試劑盒能檢測(cè)更廣的抗生素藥物，特別是磺胺類，并且對(duì)泰樂菌素、紅霉素、新霉素、慶大霉素、甲氧芐氨嘧啶等抗生素類藥物亦有較好的敏感度［6－7］．

3.2 膠體金免疫層析試紙條

目前，我國畜牧業(yè)中使用的抗生素等各類獸藥種類繁多，這不僅增加了動(dòng)物源性食品中藥物殘留的幾率，對(duì)消費(fèi)者具有潛在的危害，而且加大了執(zhí)法機(jī)關(guān)檢測(cè)的難度．而現(xiàn)有的膠體金試紙條大多只能檢測(cè)同一樣本中的一種藥物，如果開發(fā)出可采用在同一膜上作多類藥物測(cè)定的方式，將對(duì)檢測(cè)某些具有聯(lián)檢意義的物質(zhì)具有很大的應(yīng)用價(jià)值．

目前已開發(fā)出針對(duì)動(dòng)物源性食品中多種抗生素殘留的同步檢測(cè)產(chǎn)品(如圖1)，如β-內(nèi)酰胺類和四環(huán)素類抗生素快速檢測(cè)試紙條、β-內(nèi)酰胺類和三聚氰胺快速檢測(cè)試紙條、磺胺類和氟喹諾酮類藥物快速檢測(cè)試紙條等，大大節(jié)省了檢測(cè)的時(shí)間和成本．未來要將這種技術(shù)進(jìn)一步改進(jìn)，實(shí)現(xiàn)針對(duì)更多的樣本基質(zhì)和檢測(cè)藥物的目的，達(dá)到“一卡多用”的效果．

3.3 化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測(cè)試劑盒

從標(biāo)記免疫測(cè)定來看，化學(xué)發(fā)光酶免疫測(cè)定應(yīng)屬于酶免疫測(cè)定．酶反應(yīng)所用底物為發(fā)光劑，通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光在特定的儀器上進(jìn)行測(cè)定，經(jīng)過酶和發(fā)光兩級(jí)放大，具有很高的靈敏度．由于其具有超過放射免疫的高靈敏度，又具有酶免疫操作簡(jiǎn)便、快速的特點(diǎn)，并且檢測(cè)過程中不使用有害試劑，試劑保存期長(zhǎng)，該方法已成為放射免疫分析與普通酶免疫分析的取代者，是免疫學(xué)檢測(cè)重要發(fā)展方向［8］．目前已經(jīng)開發(fā)出間接競(jìng)爭(zhēng)化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測(cè)試劑盒，能夠檢測(cè)動(dòng)物組織中的克倫特羅、磺胺類藥物、氯霉素等藥物，比常規(guī)酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法靈敏度提高10倍．化學(xué)發(fā)光酶免疫測(cè)定技術(shù)廣泛應(yīng)用于抗原、抗體和半抗原的免疫測(cè)定，將多種功能的蛋白基因構(gòu)建在一起成為多功能抗體，可實(shí)現(xiàn)真正意義上的多項(xiàng)標(biāo)志物同時(shí)檢測(cè)［8－9］，因此食品中多組分有毒有害物質(zhì)的協(xié)同檢測(cè)也是化學(xué)發(fā)光酶免疫測(cè)定技術(shù)未來的發(fā)展趨勢(shì)．

圖1 能夠同時(shí)檢測(cè)多種藥物的快速檢測(cè)試紙條及其結(jié)果說明Fig．1 A rapid diagnosis strip for detecting multiple animal drugs in foods and its results

隨著獸藥產(chǎn)業(yè)技術(shù)的不斷發(fā)展，新獸藥品種還會(huì)不斷出現(xiàn)，因此需要國家不斷地制定和修訂在動(dòng)物源性食品中的獸藥最高殘留限量規(guī)定及相應(yīng)的檢測(cè)方法．此外，目前建立的標(biāo)準(zhǔn)方法中以儀器檢測(cè)方法為主，缺少快速篩選和確認(rèn)相結(jié)合的檢測(cè)方法，嚴(yán)重制約了獸藥殘留監(jiān)管工作的全面開展．因此，建立起適合我國國情并與國際接軌的獸藥殘留監(jiān)控體系是當(dāng)前勢(shì)在必行的任務(wù)．針對(duì)我國國情的特殊性，目前我國很多基層單位對(duì)快速檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用還處于定性或半定量水平，開發(fā)便攜、易用的小型化快速檢測(cè)產(chǎn)品，應(yīng)是目前和今后快速檢測(cè)技術(shù)發(fā)展的趨勢(shì)．

［1］2010年我國肉類總產(chǎn)量達(dá) 7925萬噸［EB/OL］．(2011-05-05)［2012-01-02］．http://www．cqn．com．cn/news/wqpd/zfxd/407209．html．

［2］陳一資，胡濱．動(dòng)物性食品中獸藥殘留的危害及其原因分析［J］．食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào)，2009，28(2):162-166．

［3］徐士新，汪明．關(guān)注獸藥殘留危害 重視食品安全［J］．農(nóng)村養(yǎng)殖技術(shù):新獸醫(yī)，2006(2):7-9．

［4］王俊菊，劉金財(cái)．對(duì)我國動(dòng)物源性食品安全問題的思考［J］．動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué)．2004，21(1):18-19．

［5］賀家亮．動(dòng)物性食品中獸藥殘留現(xiàn)狀及對(duì)策［J］．食品研究與開發(fā)，2006(6):176-178．

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［9］邱云青，李鳳琴．化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)在食品有害因素檢測(cè)中的應(yīng)用［J］．國外醫(yī)學(xué):衛(wèi)生學(xué)分冊(cè)，2009，36(6):373．

(責(zé)任編輯:檀彩蓮)

Research on Detection Technology of Veterinary Drugs Residue

HE Fang-yang
(Beijing Kwinbon Biotechnology Co．Ltd．，Beijing 102206，China)

Food safety hazard caused by veterinary drugs residue and coping strategy were discussed from four aspects，which include the present situation of veterinary drugs residue in food at home and abroad，constraint elements of food safety，toxicological analysis of veterinary drugs and how to establish rapid detection techniques in food safety having Chinese characteristics．Finally the development tendency of rapid detection techniques in food safety was presented．

veterinary drugs residue;food safety;fast detection techniques

TS251.7

A

1671-1513(2012)01-0017-03

2012-01-02

何方洋，男，研究員，博士，主要從事食品安全藥物殘留檢測(cè)技術(shù)方面的研究．