劉雪蓮，秦佳梅，張 巖，梁 宇，徐貴福

(通化師范學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院，吉林 通化 134002)

錦帶(Diervillasessilifolia.)為忍冬科落葉直立灌木，花期4～6月，錦帶花枝葉茂密，花色艷麗，花期長(zhǎng)可達(dá)兩個(gè)多月[1-2]，適宜庭院墻隅、湖畔群植．也可在樹(shù)叢林緣作花籬、叢植配植．點(diǎn)綴于假山、坡地．錦帶屬陽(yáng)性樹(shù)種，喜光、耐寒、耐旱、怕水澇，對(duì)土壤要求不嚴(yán)，是一種很好的園林綠化裝飾樹(shù)種[3].目前關(guān)于錦帶花粉活力[4]、培養(yǎng)基組分對(duì)花粉離體萌發(fā)的影響[5]有相關(guān)報(bào)道，但就培養(yǎng)條件對(duì)錦帶花粉離體萌發(fā)的研究尚未見(jiàn)報(bào)道，本試驗(yàn)以錦帶新鮮花粉為研究材料,采用單因素實(shí)驗(yàn)方法研究培養(yǎng)基pH值、培養(yǎng)溫度和時(shí)間對(duì)花粉萌發(fā)的影響,其結(jié)果可為錦帶花粉的生殖生物學(xué)研究、植物的品種改良與育種操作、種質(zhì)庫(kù)保存提供基礎(chǔ)資料．

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

選用通化師范學(xué)院校園內(nèi)8:00～10:00采集的錦帶花花粉進(jìn)行萌發(fā)實(shí)驗(yàn).選擇當(dāng)天開(kāi)放完整的，花粉多的花朵，最好在晴天采集．

1.2 培養(yǎng)基

實(shí)驗(yàn)采用固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基的成分為: 20%蔗糖+0.02%硼酸+0.005%鈣離子+5g/L瓊脂．

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

(1)花粉的培養(yǎng)方法.配制好的培養(yǎng)基滴在干凈載玻片上，待培養(yǎng)基冷卻后，再將當(dāng)天采集花朵的花粉用毛筆均勻的灑落在載玻片的培養(yǎng)基表面，每個(gè)載玻片大約2～3朵花，然后將載玻片放在襯有濕潤(rùn)濾紙的培養(yǎng)皿中，以保證空氣濕度利于花粉的萌發(fā)和防止培養(yǎng)基快速蒸發(fā)，在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng).

(2)實(shí)驗(yàn)處理.采用單一因素實(shí)驗(yàn)方法，在研究某一因素時(shí)其他因子均取假設(shè)的最適值.實(shí)驗(yàn)處理如下：培養(yǎng)基pH:5.5、6.0、6.5、7.0、7.5五個(gè)梯度.培養(yǎng)溫度:15℃、20℃、25℃、30℃四個(gè)梯度.培養(yǎng)時(shí)間:1h、2h、3h、4h、6h五個(gè)梯度.

(3)花粉的萌發(fā)與檢測(cè).經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后，在顯微鏡下觀測(cè)花粉萌發(fā)的情況，每處理3次重復(fù)，統(tǒng)計(jì)花粉萌發(fā)率，用測(cè)微尺測(cè)量花粉管的長(zhǎng)度，以10個(gè)花粉的花粉管長(zhǎng)度平均值作為花粉管的長(zhǎng)度，花粉管長(zhǎng)度超過(guò)花粉粒直徑作為萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算萌發(fā)率(同一視野中花粉萌發(fā)數(shù)占花粉總數(shù)的百分比)和花粉管長(zhǎng)度，每個(gè)視野花粉?？倲?shù)約在100粒左右.

(4)數(shù)據(jù)分析.利用DPS統(tǒng)計(jì)軟件和EXCEL軟件對(duì)所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析.

2 結(jié)果分析

2.1 培養(yǎng)基pH值對(duì)花粉萌發(fā)和花粉管生長(zhǎng)的影響

測(cè)定pH值對(duì)其影響時(shí)，在不同pH值的培養(yǎng)基上，花粉萌發(fā)和花粉管生長(zhǎng)有顯著差異. 由表1可見(jiàn)，花粉萌發(fā)率和花粉管長(zhǎng)度的變化趨勢(shì)一致，在pH值為5.5的培養(yǎng)基上萌發(fā)率為0,pH值為6.0時(shí)的萌發(fā)率達(dá)到最大為89.333%，花粉管長(zhǎng)度最大為0.44mm,當(dāng)pH值超過(guò)6.0后花粉萌發(fā)率和花粉管長(zhǎng)度隨pH值的升高而逐漸下降.

表1 培養(yǎng)基pH值對(duì)錦帶花粉萌發(fā)和花粉管生長(zhǎng)的影響

注：表中每個(gè)小寫(xiě)字母代表5%的顯著水平

2.2 培養(yǎng)溫度對(duì)花粉萌發(fā)和花粉管生長(zhǎng)的影響

經(jīng)不同溫度培養(yǎng)的花粉，其萌發(fā)率和花粉管生長(zhǎng)差異較大(見(jiàn)表2).在15～25℃溫度范圍內(nèi)花粉萌發(fā)率隨溫度升高而上升，25℃培養(yǎng)時(shí)花粉萌發(fā)率最高為86%，與其他溫度下培養(yǎng)的萌發(fā)率相比差異顯著，超過(guò)25℃時(shí)花粉萌發(fā)率開(kāi)始下降.花粉管長(zhǎng)度的變化趨勢(shì)與花粉萌發(fā)率的變化趨勢(shì)一致，即在較低的溫度范圍內(nèi)，隨溫度的升高花粉管生長(zhǎng)越好，當(dāng)超過(guò)25℃培養(yǎng)時(shí)花粉管長(zhǎng)度反而下降，25℃培養(yǎng)條件下花粉管生長(zhǎng)最好為0.42mm，與其他處理相比差異顯著.

表2 培養(yǎng)溫度對(duì)錦帶花粉萌發(fā)和花粉管生長(zhǎng)的影響

注：表中每個(gè)小寫(xiě)字母代表5%的顯著水平

2.3 培養(yǎng)時(shí)間對(duì)花粉萌發(fā)和花粉管生長(zhǎng)的影響

不同培養(yǎng)時(shí)間條件下花粉萌發(fā)率和花粉管生長(zhǎng)長(zhǎng)度有較大差異(見(jiàn)表3).隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)花粉萌發(fā)率先升高后下降，當(dāng)培養(yǎng)時(shí)間為3h時(shí)花粉萌發(fā)率最大為92%，與培養(yǎng)時(shí)間為2h和4h的花粉萌發(fā)率相比差異不顯著,花粉管長(zhǎng)度的變化趨勢(shì)與花粉萌發(fā)率不同，隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)花粉管長(zhǎng)度逐漸增加，當(dāng)培養(yǎng)時(shí)間達(dá)到6h時(shí)花粉管長(zhǎng)度達(dá)到最大值.

表3 培養(yǎng)時(shí)間對(duì)錦帶花粉萌發(fā)和花粉管生長(zhǎng)的影響

注：表中每個(gè)小寫(xiě)字母代表5%的顯著水平

3 結(jié)論

花粉萌發(fā)與生長(zhǎng)不僅與培養(yǎng)基組分有關(guān)，而且也受培養(yǎng)基pH值和培養(yǎng)溫度的影響.研究表明植物花粉離體培養(yǎng)基的適宜pH值為5.0～7.0，最適pH值為6.0～6.5，在強(qiáng)酸或強(qiáng)堿條件下，均不利于離體花粉萌發(fā)與生長(zhǎng).他們受花粉培養(yǎng)溫度的影響，在培養(yǎng)溫度較低時(shí)花粉幾乎不萌發(fā)，花粉管也不生長(zhǎng)．而達(dá)到15℃以上時(shí)才能良好生長(zhǎng).本實(shí)驗(yàn)條件下,錦帶花粉萌發(fā)和花粉管生長(zhǎng)的最適培養(yǎng)基pH值為 6.0，培養(yǎng)溫度為25℃，培養(yǎng)時(shí)間為3h.除了這些環(huán)境因素外，外源激素對(duì)植物花粉萌發(fā)和花粉管生長(zhǎng)影響作用也很大.有關(guān)外源激素對(duì)錦帶花粉離體萌發(fā)的影響有待進(jìn)一步研究.

參考文獻(xiàn)：

[1]阿達(dá)來(lái)提,侯正年.四季錦帶引種與栽培技術(shù)[J].新疆林業(yè),2005,6(1):23-29.

[2]周景清,張麗茹,周長(zhǎng)虹,等.錦帶花全光噴霧嫩枝扦插繁殖技術(shù)[J].河北林業(yè)科技,2007(1):20-21.

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[4]劉林德,張萍,張麗,等.錦帶花的花粉活力、柱頭可授性及傳粉者的觀察[J].西北植物學(xué)報(bào),2004,24(8):1431-1434.

[5]李范.不同培養(yǎng)條件對(duì)錦帶花粉萌發(fā)的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(11):3234-3236.