林和,葉冰瑩,黃鷺強(qiáng),林清強(qiáng),何文錦,符永樂,陳由強(qiáng)
(1.福建師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,福建福州 350108;2.福建武夷山欣怡生態(tài)茶葉園,福建武夷山 354306)
老樅水仙和奇蘭不同提取方法的茶多酚含量
林和1,葉冰瑩1,黃鷺強(qiáng)1,林清強(qiáng)1,何文錦1,符永樂2,陳由強(qiáng)1
(1.福建師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,福建福州 350108;2.福建武夷山欣怡生態(tài)茶葉園,福建武夷山 354306)
以老樅水仙鮮葉、奇蘭鮮葉為試驗材料,采用恒溫水浴法與超聲波法測定其茶多酚含量,結(jié)合2種成品茶進(jìn)行測定比較.結(jié)果表明:采用恒溫水浴法與超聲波法提取,老樅水仙鮮葉茶多酚含量分別為18.0%和17.8%,奇蘭鮮葉茶多酚含量分別為14.4%和14.6%;老樅水仙成品茶茶多酚含量分別為42.18%和42.98%,奇蘭成品茶茶多酚含量分別為34.18%和37.12%.研究結(jié)果可為老樅水仙品質(zhì)分析和綜合開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù).
老樅水仙;奇蘭;茶多酚;測定
老樅水仙(old fir narcissus)作為武夷巖茶的當(dāng)家品種名樅之一,其茶葉質(zhì)綿軟,養(yǎng)生成分豐富,是武夷巖茶之望族,栽培歷史數(shù)百年之久.老樅水仙茶湯味極濃醇且厚重,巖韻突出,滋味甘醇且具有特殊香氣,湯水順滑又兼具有陳年茶之味[1].奇蘭(chelan)比較渾厚和醇爽,口感清新,茶性溫和,香氣馥郁,有隱隱蘭香味,含有豐富的茶多酚(tea polyphenol,TP),具有防癌、抗輻射、強(qiáng)化神經(jīng)系統(tǒng)的作用,栽培歷史也有百年之久.茶多酚是茶葉中的主要活性成分,在茶葉中含量很高,性質(zhì)極其活潑,能在酶的作用下發(fā)生酶促氧化作用,是一種新型的天然抗氧化劑.目前,老樅水仙的茶多酚研究國內(nèi)外尚未見相關(guān)報道,奇蘭的成分研究還處于基礎(chǔ)階段.因此,本文對老樅水仙和奇蘭的茶多酚含量進(jìn)行研究,以期為老樅水仙和奇蘭的綜合開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù).
老樅水仙均為60~80 a樹齡,奇蘭為20~30 a樹齡,鮮茶葉采摘1芽2~3葉,均采于武夷山仙店園區(qū)欣怡生態(tài)茶葉園,成品茶由福建武夷山欣怡生態(tài)茶葉園提供.
HH-4型恒溫水浴鍋;SHB-Ⅲ型循環(huán)水式抽濾裝置;722型分光光度計;Thermo D-37520冷凍高速離心機(jī);梅特勒AL104型電子天平,感量0.000 1 g;恒溫干燥箱.無水碳酸鈉、甲醇、福林酚試劑(均為AR);沒食子酸.
1.3.1 沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精確稱取沒食子酸標(biāo)樣0.110 g(100℃干燥至恒重)置100mL容量瓶中溶解并定容至刻度,搖均;再精確量取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL分別置100mL容量瓶中定容至刻度,其相應(yīng)質(zhì)量濃度分別為10、20、30、40、50μg/mL;分別精確量取1mL、水(作空白參照)于20mL刻度試管內(nèi),各加入5.0mL福林酚試劑,搖均,反應(yīng)5min后各加入4.0mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7.5%的Na2CO3溶液,加水稀釋至刻度,搖均.室溫下置60min后于765 nm波長處測定吸光度.實驗重復(fù)3次,取其均值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[2]. 1.3.2鮮茶葉樣品處理將采集并保存完好的鮮茶葉,分別取100 g于相同條件經(jīng)100℃恒溫烘干1 h稱其干物質(zhì)質(zhì)量,試驗重復(fù)3次.計算失水率.
1.3.3 提取液制備分別稱取樣品干物質(zhì)經(jīng)磨粹試樣0.5 g于10mL離心管中,加入在70℃水中預(yù)熱過的體積分?jǐn)?shù)為70%的甲醇溶液5mL,用玻璃棒充分?jǐn)嚢杈鶆驖駶?采用2種方法提取茶多酚:①立即移入70℃水浴中,浸提10min(隔5min攪拌1次)[3];②立即移入250W 60℃超聲波振蕩器中[4-5].兩種方法浸提后分別冷卻至室溫,用高速冷凍離心機(jī)(恒溫4℃)以3500 r/min離心10min,取上清液轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶,殘渣再用5mL體積分?jǐn)?shù)為的70%的甲醇溶液提取1次,重復(fù)以上操作,合并提取液定容至10mL,搖均,過0.45μm濾膜抽濾.
1.3.4 測試液制備用移液管分別移取1mL過濾后的提取液于100mL容量瓶中,用重蒸溜水定容至刻度,即為測試液.
1.3.5 樣品測定用移液管分別移取重蒸溜水(作空白對照用)及不同品種測試液各1mL于20mL刻度試管內(nèi),在每一試管內(nèi)分別加入5mL的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的福林酚試劑(現(xiàn)配)搖均,反應(yīng)3~5min后,加入4mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7.5%的Na2CO3溶液,加水定容至刻度,搖均.室溫下放置60min,765 nm波長條件下測定吸光度,并計算TP含量.
試驗數(shù)據(jù)采用DPS數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行處理.
所得沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.009 3x+0.012 6,相關(guān)系數(shù)R2=0.998 2.達(dá)到分光光度法的實驗要求.
老樅水仙和奇蘭鮮茶含水率見表1.
表1 鮮葉樣品的含水率及干物質(zhì)含量Tab.1 Water ratio and drymatter contentof fresh leaf%
由表1可知,老樅水仙鮮葉含水率為73.57%,奇蘭鮮葉含水率為71.07%,老樅水仙鮮葉含水率略高于奇蘭鮮葉,原因是老樅水仙表皮上的氣孔相對大于奇蘭,對水分的散失有著重要的影響[6-7];老樅水仙干物質(zhì)含量為26.43%,奇蘭干物質(zhì)含量為28.93%.方差分析結(jié)果表明,老樅水仙與奇蘭的鮮葉含水率和干物質(zhì)含量差異均不顯著(P>0.05).
老樅水仙和奇蘭鮮葉TP用不同方法提取時的含量見表2.
表2 恒溫水浴法與超聲波振蕩法提取的鮮葉TP含量Tab.2 Effectof thermostaticwater-bath and ultrasonicmethod on fresh leaf TP content %
注:同列后不同大寫字母表示0.01水平差異極顯著,下同.
由表2可知,分別采用恒溫水浴法和超聲波振蕩法提取,老樅水仙鮮葉TP含量均高于奇蘭.方差分析結(jié)果表明,2種方法提取時老樅水仙鮮葉TP含量與奇蘭相比差異均達(dá)極顯著水平.
老樅水仙和奇蘭成品茶TP用不同方法提取時的含量見表3.
表3 恒溫水浴法與超聲波振蕩法提取的成品茶TP含量Tab.3 Effectof thermostaticwater-bath and ultrasonicmethod on product tea TP content %
由表3可知,2種樣品成茶分別用恒溫水浴法和超聲波振蕩法提取時,其TP含量均高于鮮葉茶較多.可能原因是鮮茶葉在加工各個環(huán)節(jié)中受到機(jī)械損傷后多酚類化合物與多酚氧化酶的成分發(fā)生了變化.方差分析結(jié)果表明,2種方法提取時老樅水仙成品茶TP含量均極顯著高于奇蘭.
TP是茶葉中主要風(fēng)味之一,已成為區(qū)分茶葉品質(zhì)高低的標(biāo)準(zhǔn),TP又是構(gòu)成茶湯濃度和收斂性的有效成分.本試驗結(jié)果表明,老樅水仙與奇蘭的鮮葉含水率、干物質(zhì)含量差異均不顯著,但分別采用恒溫水浴法與超聲波振蕩法提取時,老樅水仙鮮葉與成品茶中TP含量均極顯著高于奇蘭.這與老樅水仙生長環(huán)境有著一定關(guān)系,其原因是老樅水仙根系較發(fā)達(dá),比其他巖茶品種發(fā)根率高,且茶樹葉片氣孔與周圍環(huán)境如松、杉、竹、巖石等為伴,直接影響茶樹植株體內(nèi)物質(zhì)代謝和生化成分含量變化的植被生態(tài)條件明顯優(yōu)于奇蘭[6].鮮葉經(jīng)過一系列深加工后,TP含量發(fā)生明顯的變化,可作為區(qū)分品種間的品質(zhì)成分檢測分析[8],也可作為日后綜合開發(fā)利用老樅水仙提供科學(xué)依據(jù).
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Content of tea polyphenol in old fir narcissusm and chelan extracted w ith differentmethod
Lin He1,Ye Bingying1,Huang Luqiang1,Lin Qingqiang1,HeWenjin1,Fu Yongle2,Chen Youqiang1
(1.Collegeof Life Sciences,Fujian NormalUniversity,Fuzhou 350108,China;2.FujianWuyiMoumtain XinyiEcology Tea Plantation,Wuyishan 354306,China)
Thermostatic water-bath and ultrasonic method were respectively applied to extract the tea polyphenol(TP)for content determination in fresh leaf from old fir narcissus and chelan,and two product tea was used as control sample.The results show that the TP content of the fresh leaf from old fir narcissus is 18.0%and 17.8%;the chelan,14.4%and 14.6%;the product tea old fir narcissus is 42.18%and 42.98%,and the product tea chelan is 34.18%and 37.12%respectively,based on this two kind of extraction method.This study will provide scientific basis on characteristic analyze and synthetic develop form in old fir narcissus.
old fir narcissus;chelan;tea polyphenol;determination
TQ914.1
A
1008-7516(2013)01-0041-03
10.3969/j.issn.1008-7516.2013.01.010
2012-12-20
福建省教育廳基金資助項目(JB11015,JA11043)
林和(1961-)男,福建福州人,本科,高級實驗師.主要從事食品科學(xué)研究.
陳由強(qiáng)(1956-),男,福建福州人,教授,博士生導(dǎo)師.主要從事植物生理學(xué)和植物分子生物學(xué)研究.
鄧天福)