吳 娜 張慎榮 滕 淑 朱妍艷 杭州市兒童醫(yī)院 杭州310000

EV71與CoxA16感染手足口病患兒體液免疫研究

吳 娜 張慎榮 滕 淑 朱妍艷 杭州市兒童醫(yī)院 杭州310000

手足口病 腸道病毒71型 A組柯薩奇病毒 體液免疫

手足口?。╤and-foot-and-mouth disease，HFMD）是兒童尤其是嬰幼兒常見(jiàn)傳染病之一，主要由腸道病毒尤其以EV71及CoxA16感染最為常見(jiàn)。HFMD患兒的臨床經(jīng)過(guò)及轉(zhuǎn)歸差別較大，與患兒機(jī)體免疫狀況可能存在一定關(guān)系。本研究對(duì)我院2012年4月—10月收治的112例EV71陽(yáng)性、53例CoxA16陽(yáng)性HFMD患兒的臨床資料進(jìn)行分析，探討EV71和CoxA16感染后患兒體液免疫水平的變化。

1 臨床資料

112例EV71陽(yáng)性及53例CoxA16陽(yáng)性HFMD患兒均為我院感染科住院病例，其中男95例，女70例，年齡3個(gè)月～7歲，平均年齡（2.18±1.34）歲。112例EV71陽(yáng)性病例按臨床表現(xiàn)、并發(fā)癥分為三組，其中危重癥組22例（占19.6%），重癥組40例（占35.7%），輕癥組50例（占44.6%）。診斷及分度標(biāo)準(zhǔn)均符合衛(wèi)生部頒布的手足口病預(yù)防控制指南（2010年版）[1]。另設(shè)健康兒童15名為正常對(duì)照組。EV71各組、EV71組與CoxA16組、正常對(duì)照組年齡、性別差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2 方法

2.1 檢測(cè)指標(biāo)及方法 標(biāo)本采集：各組患兒均于入院后2h內(nèi)（均未靜脈使用丙種球蛋白）采集靜脈血送檢體液免疫功能。采集患兒咽拭子（48小時(shí)內(nèi)）或糞便進(jìn)行病毒核酸的提取。主要試劑和儀器：體液免疫功能采用HITACHI 7600型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，試劑采購(gòu)于芬蘭ORION DIAGNOSTICA公司，采用免疫比濁法測(cè)定。病毒核酸檢測(cè)采用Geneaid公司的Viral Nucleic Acid extraction KitII、上海輝睿生物科技有限公司的熒光RT-PCR試劑盒，在ABI 7500熒光定量PCR儀上進(jìn)行。

2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（±s） 表示，兩組樣本均數(shù)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組樣本均數(shù)間的比較采用單因素方差分析（ANOVA），方差齊性者兩兩比較采用LSD檢驗(yàn)。P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié) 果

EV71各組及正常對(duì)照組組間IgG、IgM水平不同（P＜0.05）。兩兩比較提示危重癥組IgG、IgM水平高于輕癥組及正常對(duì)照組；重癥組IgG水平高于輕癥組及正常對(duì)照組，EV71各組IgM水平均高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；危重癥組與重癥組比較，IgG、IgM水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 EV71感染各組及正常對(duì)照組體液免疫水平比較（±s） g/L

注：與正常對(duì)照組比較*P＜0.05；與輕癥組比較，#P＜0.05

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與CoxA16組比較，EV71組IgA、IgG、IgM水平升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），兩組C3、C4水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表2。CoxA16組與正常對(duì)照組比較，各指標(biāo)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表2 EV71與CoxA16感染手足口病患兒體液免疫水平比較（±s） g/L

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4 討論

HFMD以發(fā)熱和手、足、口腔等部位出現(xiàn)斑丘疹、皰疹為主要特征，部分患兒可出現(xiàn)腦炎、腦膜炎、腦脊髓炎、神經(jīng)源性肺水腫和心肌炎等嚴(yán)重并發(fā)癥。目前引發(fā)手足口病的腸道病毒共有多種，以EV71和CoxA16等腸道病毒最常見(jiàn)[2-4]，其中EV71更易引起HFMD的中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）并發(fā)癥[5-6]。

手足口病傳染源主要是患者和隱性感染者，多數(shù)人感染后呈隱性感染狀態(tài)。而手足口病在兒童及嬰幼兒，尤其3歲以下嬰幼兒普遍易感，且顯性感染比例明顯高于成人[7]。其原因考慮與嬰幼兒消化道及呼吸道屏障功能弱及黏膜表面SIgA含量低，病毒感染后容易入侵有關(guān)。腸道病毒在體內(nèi)的復(fù)制、清除過(guò)程與機(jī)體免疫功能相關(guān)。其中體液免疫系統(tǒng)發(fā)揮著免疫監(jiān)視與防御病毒感染的作用，是機(jī)體特異性免疫的重要組成部分[8]，尤其以IgA、IgG、IgM起重要作用，而補(bǔ)體主要參與機(jī)體免疫應(yīng)答及自穩(wěn)功能，在血清中含量相對(duì)穩(wěn)定。

國(guó)內(nèi)外研究顯示，HFMD發(fā)病后存在免疫功能亢進(jìn)，機(jī)體處于免疫紊亂和動(dòng)態(tài)失衡狀態(tài)[9]。本研究中，EV71危重癥組IgG、IgM水平高于輕癥組及正常對(duì)照組，重癥組IgG水平高于輕癥組及正常對(duì)照組，EV71各組IgM水平均高于正常對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示隨著病情加重，體液免疫進(jìn)一步亢進(jìn)。重癥HFMD患兒產(chǎn)生強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)，在保護(hù)機(jī)體及促進(jìn)疾病恢復(fù)的同時(shí)，可能對(duì)機(jī)體造成一定程度的損傷，使部分患兒病情向危重癥進(jìn)展。EV71組IgA、IgG、IgM水平高于CoxA16組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。提示不同腸道病毒感染后，患兒體液免疫功能狀態(tài)不同，EV71感染后免疫系統(tǒng)反應(yīng)較CoxA16感染后明顯活躍。其機(jī)制可能與EV71具有顯著的嗜神經(jīng)性，可通過(guò)神經(jīng)通路侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)導(dǎo)致神經(jīng)內(nèi)分泌肽分泌紊亂，而部分神經(jīng)內(nèi)分泌肽可通過(guò)神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)通路，對(duì)體液免疫起到調(diào)節(jié)作用有關(guān)[6-7]。CoxA16感染所致手足口病臨床癥狀多輕微，本研究中53例CoxA16陽(yáng)性HFMD患兒僅3例重癥、2例危重癥，與正常對(duì)照組比較各指標(biāo)均無(wú)差異，提示CoxA16感染后HFMD患兒體液免疫功能無(wú)明顯亢進(jìn)。

EV71感染的HFMD患兒存在體液免疫功能紊亂，隨著病情進(jìn)展，體液免疫水平變化更加顯著，而CoxA16感染的HFMD患兒體液免疫功能無(wú)明顯紊亂。在臨床工作中，應(yīng)加強(qiáng)HFMD患兒病原學(xué)及體液免疫功能水平監(jiān)測(cè)，這對(duì)于判斷及改善患兒疾病轉(zhuǎn)歸、預(yù)后有一定的意義。

［1］中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.手足口病預(yù)防控制指南（2010年版）[S/OL].[2010-4-21].http://www.moh.gov.cn.

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2013-04-20