朱書(shū)梁，何少華，游秋花，朱 菁，曹華斌

（1.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江西南昌 330045；2.福建圣農(nóng)發(fā)展股份有限公司肉雞事業(yè)部，福建南平 351400）

1 病原和流行病學(xué)

1.1 病原

1.1.1 豬傳染性胃腸炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus，TGEV）和豬流行性腹瀉病毒（PEDV）均為冠狀病毒，在低溫環(huán)境可長(zhǎng)期存活，對(duì)光、乙醚和氯仿等敏感，可被福爾馬林、氫氧化鈉、含氯或碘消毒劑滅活。豬輪狀病毒（RV）屬于呼腸孤病毒科輪狀病毒屬，在環(huán)境中廣泛存在而且相當(dāng)穩(wěn)定，耐乙醚、氯仿和酸堿，但對(duì)EDTA等促溶劑及氯化鈣、硫氯酸鉀、過(guò)醋酸、碘、酚等敏感。

1.1.2 豬博卡病毒（PBoV）是細(xì)小病毒科細(xì)小病毒亞科博卡病毒屬成員，為無(wú)囊膜單股線狀DNA，有5個(gè)型[1]。2009年瑞典研究人員從斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合癥的病豬分離到了該病毒。國(guó)內(nèi)翟少倫等建立了檢測(cè)豬博卡病毒的PCR方法，通過(guò)對(duì)191份疑似高熱病病料的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)PBoV陽(yáng)性75份，陽(yáng)性率為39.3%，表明我國(guó)豬群中豬博卡病毒相當(dāng)流行[2]。

1.1.3 豬腸道杯狀病毒（Porcine Enteric Calicivirus，PECV）包括豬諾如病毒（NoV）和豬札如病毒（SaV）。最早于1980年在英國(guó)和美國(guó)的斷奶仔豬及保育豬的腹瀉糞便中發(fā)現(xiàn)[3]。

1.1.4 豬庫(kù)布病毒（Porcine Kobu virus）是一種單股正鏈RNA病毒，屬于微小RNA病毒科庫(kù)布病毒屬。最早由日本科學(xué)家在Hela細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，2008年匈牙利科學(xué)家最先在豬糞便中分離得到，2009年我國(guó)學(xué)者也在豬糞便中發(fā)現(xiàn)了庫(kù)布病毒[4]。

1.1.5 豬博卡病毒、豬腸道杯狀病毒和豬庫(kù)布病毒由于發(fā)現(xiàn)較晚，盡管在病原學(xué)和流行病學(xué)等方面已經(jīng)取得了不少成就，但我們?nèi)匀粚?duì)其了解甚少，有待進(jìn)一步研究。

1.2 流行病學(xué)

1.2.1 此類(lèi)疾病均表現(xiàn)為急性、高度接觸性傳染病，以嘔吐、水樣性腹瀉、脫水、體重迅速下降和新生仔豬大量死亡為特征。豬場(chǎng)的病毒性腹瀉一般為幾種病毒混合感染。

1.2.2 豬病毒性腹瀉的季節(jié)性較強(qiáng)，主要發(fā)生在11月份至下年4月份之間，特別容易在寒冷、潮濕和衛(wèi)生條件差的地方暴發(fā)。其病原在環(huán)境中長(zhǎng)期存在，本病一旦流行很難徹底消除。

1.2.3 TGEV可感染不同日齡的豬，以2周齡內(nèi)哺乳仔豬最易感染；PDEV能感染各日齡豬，以仔豬受害最為嚴(yán)重；RTV對(duì)各日齡的仔豬及產(chǎn)前3天至產(chǎn)后2周的母豬較易感染，但發(fā)病豬一般為13至39日齡的仔豬；

1.2.4 病豬和帶毒豬是主要傳染源，感染途徑主要是消化道感染[5]。

2 癥狀及病變

2.1 癥狀

2.1.1 豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉

臨床上很難區(qū)別這兩種病，只是PED癥狀比TGE要輕一些。TGEV對(duì)各日齡豬均高度易感，新生仔豬感染后死亡率可達(dá)100%，潛伏期2～3天，中大豬感染后死亡率較低。PEDV潛伏期一周左右，但傳播速度極快，數(shù)日內(nèi)可波及全群。對(duì)2周齡內(nèi)仔豬有高度致死性，中大豬群則相對(duì)危害程度較低，僅表現(xiàn)為消化道病變，經(jīng)過(guò)2～3周的流行即停止。相對(duì)TGEV而言，PEDV的致死率較低。

2.1.2 豬輪狀病毒

主要以嘔吐、腹瀉、脫水死亡為特征。癥狀輕重取決于發(fā)病豬日齡、免疫狀態(tài)和環(huán)境條件，缺乏母源抗體保護(hù)的仔豬感染最為嚴(yán)重。多發(fā)生于2～6周齡的仔豬，以3周齡高發(fā)，隨日齡增大而死亡率降低。初產(chǎn)母豬所產(chǎn)的仔豬對(duì)RV敏感度較高，潛伏期極短，往往數(shù)小時(shí)即可發(fā)病，出現(xiàn)嘔吐、腹瀉、排水樣或糊狀糞便，一般持續(xù)3～5天。做好防脫水工作，可降低死亡率[6]。

2.1.3 豬博卡病毒

豬博卡病毒可引發(fā)動(dòng)物呼吸道與腸道感染，出現(xiàn)支氣管炎、肺炎和慢性胃腸炎癥狀，以及引發(fā)流產(chǎn)、死胎甚至死亡。

2.1.4 豬腸道杯狀病毒

NoV只感染成年豬，無(wú)明顯臨床癥狀；SaV可感染各年齡段的豬，斷奶仔豬感染率最高，并引起腹瀉。NoV和SaV不會(huì)同時(shí)感染同一頭豬。

2.2 病變

TGE、PDE和RVI都是胃腸道疾病，主要通過(guò)消化道感染，靶細(xì)胞是腸絨毛上皮細(xì)胞，腸絨毛萎縮脫落，腸淋巴結(jié)水腫，導(dǎo)致病豬消化紊亂、脫水和酸中毒。

2.2.1 TGE的危害部位主要是胃和腸道，胃內(nèi)有凝乳塊，胃底部黏膜脫落，腸壁菲薄、半透明、充出血，腸道內(nèi)容物稀薄如水，多呈黃綠色或灰白色。

2.2.2 PED侵害的主要部位是腸道，腸壁菲薄、半透明狀，腸道內(nèi)容物呈灰黃色液體，較TGE腸道內(nèi)容物黏稠，腸道有氣泡，腸管擴(kuò)張，腸黏膜脫落。

2.2.3 RVI與PED、TGE的區(qū)別在于其病變一般僅限于腸道，在小腸后段表現(xiàn)類(lèi)似于PED、TGE的病變。胃內(nèi)也可見(jiàn)凝乳塊，出血較少，大腸有類(lèi)似于小腸的病變。

豬博卡病毒、豬腸道杯狀病毒和豬庫(kù)布病毒引發(fā)的病變與以上三種疾病類(lèi)似，很難區(qū)分。

3 疾病診斷

3.1 臨床診斷

3.1.1 如果腹瀉發(fā)生于寒冷季節(jié)，且發(fā)病急、傳染快、拉水樣糞便并伴有嘔吐，所有豬發(fā)病、日齡越小死亡率越高，病變主要在胃腸道，抗生素等治療無(wú)效，基本可確定為病毒性腹瀉。

3.1.2 一周齡以下不發(fā)病、2～4周齡發(fā)病的一般為輪狀病毒感染，一周齡內(nèi)發(fā)病死亡的往往是TGE或PED。

3.1.3 如果用顯微鏡可觀察到絨毛萎縮，則可基本確定是病毒性腹瀉；用pH試紙檢測(cè)糞便，TGE和RVI腹瀉的糞便呈酸性，細(xì)菌性腹瀉的糞便一般呈堿性。

3.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.2.1 采集病豬的小腸或糞便，取500 mg進(jìn)行勻漿處理，勻漿液用1 mL PBS液稀釋混勻，-30 ℃反復(fù)凍融3次，置-30 ℃冰箱保存?zhèn)溆茫?/p>

3.2.2 根據(jù)GenBank上病毒序列，使用引物設(shè)計(jì)軟件，設(shè)計(jì)PEDV、TGEV、RV、PRoV、PECV、Kobuvirus的特異性引物，引物由生物公司合成；

3.2.3 提取RNA、DNA，反轉(zhuǎn)錄，PCR，檢測(cè)RT-PCR和PCR的產(chǎn)物；

3.2.4 分析RT-PCR和PCR的產(chǎn)物序列，根據(jù)檢測(cè)的陽(yáng)性結(jié)果即可確定病原[7]。

4 治療及免疫預(yù)防

4.1 治療

由上述病毒引起的腹瀉目前尚無(wú)特效的治療方法。對(duì)于正在發(fā)病的仔豬，應(yīng)在預(yù)防細(xì)菌性繼發(fā)感染，糾正酸中毒、電解質(zhì)不平衡，防止母豬奶水質(zhì)量下降的前提下，可選用高免血清進(jìn)行肌注。若同時(shí)注射豬用干擾素，對(duì)病毒性腹瀉也有一定的預(yù)防和治療作用。

4.1.1 高免血清的制備

①選取本豬場(chǎng)60 kg以上健康的育肥豬或淘汰的健康老母豬，注射疫苗，如TGE-PDE二聯(lián)苗，在豬只的后海穴注射，15天后用再次肌肉注射；②再隔15～20天，對(duì)豬進(jìn)行檢查，對(duì)無(wú)任何疾病者，凌晨空腹宰殺，無(wú)菌放血。注意器械和容器的消毒；③待血液自然凝固，取血清離心。取上清液分裝至500 mL的潔凈生理鹽水瓶中；④每瓶血清加入160萬(wàn)單位的青霉素鈉鹽和100萬(wàn)單位的硫酸鏈霉素，搖勻，壓蓋密封。置4℃冰箱中保存，待用[8]。

4.1.2 高免血清的使用

肌肉注射：小豬2 mL，中大豬3-5 mL，母豬8 mL。隔5天再注射一次。對(duì)于脫水和酸中毒的病豬，灌服或自由飲用口服補(bǔ)液鹽是必需的輔助治療方法。

4.2 免疫預(yù)防

免疫程序的制定要考慮豬只年齡、母源抗體水平、疫苗的種類(lèi)、免疫途徑等因素，特別是目前混合感染率逐年升高，一定要注意聯(lián)合及多重免疫。

4.2.1 目前我國(guó)研制的豬傳染性胃腸炎與輪狀病毒弱毒疫苗，對(duì)3日齡仔豬主動(dòng)免疫效果很好，給母豬分娩前五周至六周和一周各肌注或鼻內(nèi)接種一次后，則對(duì)3日齡哺乳仔豬的被動(dòng)免疫保護(hù)率達(dá)95%以上；在每年秋天來(lái)臨后，對(duì)新生仔豬吃乳前肌注疫苗（至少30 分鐘后才能吃初乳），仔豬斷奶前7～10天，架子豬、育肥豬和公豬肌肉注射疫苗一次即可。

4.2.2 對(duì)于流行性腹瀉，可應(yīng)用豬流行性腹瀉氫氧化鋁滅活苗，對(duì)妊娠母豬于產(chǎn)仔前20～30天接種4 mL，25 kg以下的仔豬接種1 mL，25～50 kg育成豬接種2 mL，50 kg以上成豬接種4 mL，接種部位為后海穴，接種后15天產(chǎn)生免疫力。

4.2.3 自家苗是一種針對(duì)性極強(qiáng)的包含有病毒、細(xì)菌等多種病原體的多聯(lián)苗，能迅速控制和預(yù)防本場(chǎng)主要流行病。所以在不確定是何種病原引起腹瀉的情況下，可選用自家苗免疫接種。

自家苗的制備方法：①采病料：取本場(chǎng)患病新死亡的豬只，用解剖刀剖開(kāi)腹部皮膚，并向兩邊剝離，充分暴露腹肌，依次剪破腹肌和腹膜，取出小腸。剪下腸系膜淋巴結(jié)，同時(shí)取肺臟、脾臟、腦等諸多器官；②制作：將采集的病料稱(chēng)重，加適量生理鹽水，用消毒好的絞肉機(jī)，反復(fù)絞碎成漿，雙層無(wú)菌紗布過(guò)濾，濾液再用生理鹽水稀釋?zhuān)共×吓c液體比為1:15，最后加入甲醛，使甲醛純品在溶液中含量達(dá)到4%。搖均后，置37 ℃條件下滅活。滅活期間，每4～6 h搖動(dòng)一次，24 h后滅活完畢，取出置于4 ℃下，保存待用；③使用方法：先用自家苗注射一兩窩小豬，如果沒(méi)有發(fā)生過(guò)敏或注部位發(fā)炎等反應(yīng)，說(shuō)明自家苗制作成功。使用量：母豬產(chǎn)前4周注射4 mL/頭，乳豬7～9日齡肌注1 mL，15～18日齡注射2 mL；小豬（30～35日齡）3 mL/頭。

5 綜合防治

5.1 強(qiáng)化飼養(yǎng)管理，減少誘因

5.1.1 加強(qiáng)種豬尤其是后備豬的飼養(yǎng)管理。注意畜舍的保溫與通風(fēng)。強(qiáng)化小種豬運(yùn)輸管理。要盡量減少運(yùn)輸中的應(yīng)激反應(yīng)，把小種豬隔離觀察一段時(shí)間再調(diào)入生產(chǎn)線，注意欄舍的消毒。

5.1.2 做好畜舍濕度的控制。料槽水不要加得太滿；不要把欄舍沖得太濕；臨產(chǎn)豬只消毒適當(dāng)，不要太濕。做好防寒保暖工作。長(zhǎng)時(shí)間的寒冷應(yīng)激是病毒性腹瀉的主要誘因?？墒褂梦葜形荼靥岣哓i舍室內(nèi)溫度；防止賊風(fēng)。

5.1.3 保持種豬合理膘情。膘情合理，健康程度高的種豬群，不僅抗應(yīng)激抗病能力強(qiáng)，即使發(fā)生腹瀉，其損失也遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于亞健康的豬群[9]。

5.2 積極應(yīng)對(duì)病毒性腹瀉

5.2.1 發(fā)病初期實(shí)行隔離消毒措施

5.2.1.1 要高度重視全場(chǎng)的防疫隔離工作，防止病原擴(kuò)散。（1）加強(qiáng)主干道的衛(wèi)生清潔和消毒；（2）避免掃把等設(shè)備和藥物的交叉使用，防止污染；（3）注意死胎和胎衣的收集，特別是因病毒性腹瀉流產(chǎn)的胎物；（4）員工要勤換衣物、勤洗澡；（5）規(guī)范夜班人員的行為。

5.2.1.2 發(fā)病豬只的護(hù)理和處置：（1）腹瀉糞便直接使用生石灰掩蓋后清掃；（2）腹瀉欄面要固定掃把清理，掃把每天要用消毒水浸泡1次；（3）確保發(fā)病豬舍內(nèi)溫度適合；（4）嚴(yán)格控制欄舍的濕度，可用生石灰等處理；（5）做好抗繼發(fā)感染工作，針對(duì)性添加一些抗生素藥物，如阿莫西林、慶大霉素、新霉素、氟哌酸等藥物飲水，防止細(xì)菌繼發(fā)感染。

5.2.2 懷孕舍擴(kuò)散后要根據(jù)豬場(chǎng)實(shí)際情況考慮糞便返飼

5.2.2.1 糞便返飼流程：（1）一次性收取新鮮的水樣腹瀉糞樣5～10 kg（未采取消毒措施）；（2）簡(jiǎn)單配制生理鹽水：4 kg水中加36 g食鹽；（3）將糞便加入生理鹽水中攪拌后用3層紗布過(guò)濾；（4）濾液加入青鏈霉素各50 g左右；（5）攪勻靜止15～20分鐘；（6）飼喂時(shí)噴灑在未發(fā)病的豬只飼料中，每頭母豬200 g左右。

5.2.2.2 返飼后加強(qiáng)種豬群護(hù)理：全群加糖鹽水連用3天，或使用補(bǔ)液鹽+Vc+新霉素連用3天，2～3次/天，5～10 mL/次/頭。糖鹽水配方：2 kg葡萄糖+0.5 kg食鹽+0.25 kg小蘇打+100 kg水。補(bǔ)液鹽配方：1 kg溫開(kāi)水+3.5 g食鹽+2.5 g小蘇打+1.5 g氯化鉀+20 g葡萄糖。

5.2.2.3 注意事項(xiàng)：（1）返飼結(jié)束后，豬舍內(nèi)外進(jìn)行全面的消毒。（2）返飼后注意記錄懷孕豬群的采食情況和腹瀉情況，采食下降或腹瀉的種豬應(yīng)占返飼全群的70%以上，達(dá)不到比例的則應(yīng)對(duì)無(wú)癥狀的豬強(qiáng)化返飼一次；（3）返飼注意做好操作人員的防疫隔離，要規(guī)范種豬的調(diào)動(dòng)[10]。

5.2.3 產(chǎn)房仔豬大量死亡，綜合考慮使用病料或內(nèi)容物返飼

5.2.3.1 根據(jù)種豬發(fā)病情況和仔豬死亡情況確定需要返飼的懷孕舍或臨產(chǎn)單元，母豬懷孕50～110天后以棟為單位進(jìn)行返飼，返飼前先盡量讓一周內(nèi)分娩的母豬進(jìn)入產(chǎn)房。臨產(chǎn)單元必要時(shí)才進(jìn)行返飼，在產(chǎn)單元和產(chǎn)后單元原則上不返飼。

5.2.3.2 取腹瀉嚴(yán)重仔豬的胃腸內(nèi)容物搗碎兌換返飼液（必要時(shí)可連同胃腸一起搗碎，用紗布過(guò)濾），每1 000 mL加入青霉素鏈霉素各一瓶攪勻后，將得到的溶液加入母豬飼料中投給母豬喂食。每頭仔豬內(nèi)容物（病料）可返飼15～30頭種豬。在生產(chǎn)線就地解剖仔豬取病料或胃腸內(nèi)容物，快速制備濾液，在1 h內(nèi)完成返飼。

5.3 做好產(chǎn)房的護(hù)理和管理

5.3.1 做好產(chǎn)欄之間、單元之間消毒隔離

5.3.1.1 對(duì)仔豬腹瀉欄用飼料袋間隔開(kāi)，常將仔豬關(guān)進(jìn)保溫箱后用消毒水清洗拖干欄面，同時(shí)做好母豬后軀和乳房清洗消毒工作，多使用干燥粉灑在保溫箱內(nèi)。

5.3.1.2 單元之間做到工作人員不竄崗，特別是已經(jīng)發(fā)生腹瀉單元的飼養(yǎng)員要相對(duì)隔離，不要到其他單元走動(dòng)，如須進(jìn)入，進(jìn)入前必須在消毒盆洗手、消毒池踏腳；管理人員注意檢查的順序，并注意自身消毒。

5.3.2 做好溫度和濕度控制等基礎(chǔ)工作

5.3.2.1 做好初生仔豬的保溫工作。確保在產(chǎn)單元溫度適宜，必要時(shí)燒煤炭保溫。仔豬出生3天內(nèi)轉(zhuǎn)進(jìn)至保溫箱，必要時(shí)可以增加保溫?zé)簟?/p>

5.3.2.2 做好產(chǎn)房濕度控制工作。對(duì)仔豬或母豬腹瀉后的欄面要及時(shí)撒上石灰掩蓋，10 min后清掃干凈，再撒上密斯陀，保持欄面干燥。

5.3.3 補(bǔ)液與調(diào)理

發(fā)生病毒性腹瀉時(shí)，仔豬必須做好補(bǔ)液工作，防止脫水死亡。補(bǔ)液注意嚴(yán)格按配方進(jìn)行，還要注意多種補(bǔ)液方法相結(jié)合（如飲水中加入補(bǔ)液配方，同時(shí)進(jìn)行單獨(dú)灌服補(bǔ)液，將補(bǔ)液鹽放入料槽讓豬只自由飲食）。對(duì)發(fā)生病毒性腹瀉的母豬采取補(bǔ)液或調(diào)理，減少因腹瀉導(dǎo)致弱仔、死胎與流產(chǎn)，可在飼料中加入多維與葡萄糖調(diào)理。

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