曲德斌王媛媛

（1松原市東方醫(yī)藥有限公司，吉林 松原 138000；2松原市寧江區(qū)疾病控制中心，138001）

人參糖肽注射液肽含量測定研究

曲德斌1王媛媛2

（1松原市東方醫(yī)藥有限公司，吉林 松原 138000；2松原市寧江區(qū)疾病控制中心，138001）

目的：改進(jìn)人參糖肽注射液肽含量測定方法。方法：參照《中國藥典》（2005年版）一部附錄VA“紫外-可見分光光度法”，將對(duì)照品溶液牛血清白蛋白濃度0.05 mg/mL改為0.1 mg/mL，供試品由“精密量取本品5 mL，置50 mL量瓶中”改為“精密量取本品10 mL，置50 mL量瓶中”，使供試品溶液的吸光度（A）值在0.3～0.7之間。結(jié)果：3批樣品的檢測結(jié)果顯示，將供試品的測定濃度及對(duì)照品的濃度提高1倍后，供試品溶液的A值均在0.3～ 0.7之間。結(jié)論：改良的測定方法穩(wěn)定可行，符合藥品檢驗(yàn)的規(guī)定。

人參糖肽注射液；肽含量；含量測定

人參糖肽注射液具有補(bǔ)氣、生津、止渴的功效，用于氣陰兩虛型消渴病。本品對(duì)體外糖基化有明顯抑制作用[1]，是一種新的安全而有效治療 2型糖尿病的藥物[2]，其生產(chǎn)過程中發(fā)現(xiàn)肽含量測定值不穩(wěn)定?！吨袊幍洹罚?005年版）一部[3]附錄VA“紫外-可見分光光度法”的規(guī)定，即“一般供試品溶液的吸光度（A）以在0.3～ 0.7之間的誤差較小”。而本品原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，肽含量測定樣品溶液的A測定值較小（小于0.3），故將供試品的測定濃度及對(duì)照品的濃度提高，使供試品溶液的

A測定值在0.3～0.7之間。

1 實(shí)驗(yàn)儀器與試藥

752紫外分光光度計(jì)，上海光學(xué)儀器廠；天平，上海天平儀器廠TG332A，上海精科TG328A；牛血清白蛋白對(duì)照品，批號(hào)：140619-200314（原中國藥品生物制品檢定所）。

2 實(shí)驗(yàn)過程

2.1 原測定標(biāo)準(zhǔn)[4]

2.1.1 對(duì)照品溶液的制備 取牛血清白蛋白1支，用生理鹽水溶解并稀釋成每mL中含牛血清白蛋白0.05 mg溶液，混勻。

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密量取對(duì)照品溶液0，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0 mL，加生理鹽水補(bǔ)充體積至2.0 mL，加Follin試劑（Ⅲ）5.0 mL室溫放置10 min，加入Follin試劑（Ⅳ）0.5 mL，立即混勻，室溫放置30 min，照紫外-可見分光光度法[《中國藥典》（2005年版）一部附錄ⅤA]，在750 nm波長處測定A值，以濃度為橫坐標(biāo)，A值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.1.3 供試品含量測定 精密量取本品 5 mL，置50 mL量瓶中，用生理鹽水稀釋至刻度，混勻，精密量取2.0 mL，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下方法，依法測定A值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中對(duì)應(yīng)的牛血清白蛋白的量，計(jì)算。

2.2 修改后測定標(biāo)準(zhǔn)

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 取牛血清白蛋白1支，用生理鹽水溶解并稀釋成每mL中含牛血清白蛋白0.1 mg溶液，混勻。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密量取對(duì)照品溶液0，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0 mL，加生理鹽水補(bǔ)充體積至2.0 mL，加Follin試劑（Ⅲ）5.0 mL室溫放置10 min，加入Follin試劑（Ⅳ）0.5 mL，立即混勻，室溫放置30 min，照紫外-可見分光光度法[《中國藥典》（2005年版）一部附錄ⅤA]，在 750 nm波長處測定A值，以濃度為橫坐標(biāo)，A值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.2.3 供試品含量測定 精密量取本品 10 mL，置 50 mL量瓶中，用生理鹽水稀釋至刻度，混勻，精密量取 2.0 mL，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下方法，依法測定A值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中對(duì)應(yīng)的牛血清白蛋白的量，計(jì)算。

表1 連續(xù)3個(gè)批號(hào)的人參糖肽注射液肽含量項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果對(duì)比

3 結(jié)果與討論

由表1可以看出，原標(biāo)準(zhǔn)曲線第5點(diǎn)A值在0.3左右，供試品A值在0.2左右，偏低。將供試品的測定濃度及對(duì)照品的濃度提高1倍后，供試品溶液的A值均在0.3～0.7之間，可見修訂后的方法穩(wěn)定可行，符合藥品檢驗(yàn)的規(guī)定。

[1] 王詩雯，苗春生，李才.人參糖肽對(duì)糖基化抑制作用的體外研究[J].中國老年學(xué)雜志，2009，29（5）：557-559.

[2] 葛煥琦，蔡寒青，王濤，等.人參糖肽注射液治療2型糖尿病30例[J].吉林大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2003，29（2)：87-88.

[3] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（2005年版）一部[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：附錄ⅤA.

[4] 國家藥監(jiān)局單頁標(biāo)準(zhǔn)（2001）：人參糖肽注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[WS-184（X-025）-2001][S].2001.

Study on the Content Determination of Peptide in Ginseng Glycopeptide Injection

Qu Debin1，Wang Yuanyuan2（1 Oriental Pharmaceutical Co.，Ltd.，in Songyuan City，Jilin Songyuan 138000，China；2 Center for Disease Control of Ningjiang District in Songyuan City，138001）

ABSTRACTObjective:To improve the method for the content determination of peptide of ginseng glycopeptide injection.Methods:Referring to the requirements of UV-Vis spectrophotometry set forth in Appendix VA of Chinese Pharmacopoeia （2005 edition），the control solution concentration of bovine serum albumin was changed from 0.05 mg/mL to 0.1 mg/mL and the samples taken into 50 mL volumetric flask was changed from 5 mL to 10 mL，and making the absorbance values of the test solution in the range of 0.3～0.7.Results:The test results of 3 batches of samples showed if the concentrations of the samples and control to be test were increased by 1 time，the absorbance values of the test solutions were all in the range of 0.3～0.7.Conclusion:The modified method for content determination is stable and feasible，and in compliance with the requirements for drug testing.
KDY WORDSGinseng Glycopeptide Injection；Peptide Content；Content Determination

10.3969/j.issn.1672-5433.2013.12.006

2012-11-30）

曲德斌，男，主管中藥師。研究方向：藥品生產(chǎn)經(jīng)營質(zhì)量管理、新藥研發(fā)。通訊作者E-mail：qdb888666@tom. com