賈 鵬薛 敏朱 選劉海燕吳秀峰王 嘉鄭銀樺徐美娜

(1.河北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院, 石家莊 050024; 2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所國家水產(chǎn)飼料安全評價(jià)基地,北京 100081; 3.贏創(chuàng)德固賽(中國)投資有限公司, 北京 100026)

飼料蛋氨酸水平對異育銀鯽幼魚生長性能影響的研究

賈 鵬1,2薛 敏2朱 選3劉海燕1吳秀峰2王 嘉2鄭銀樺2徐美娜2

(1.河北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院, 石家莊 050024; 2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所國家水產(chǎn)飼料安全評價(jià)基地,北京 100081; 3.贏創(chuàng)德固賽(中國)投資有限公司, 北京 100026)

研究通過8周的生長實(shí)驗(yàn), 研究飼料中不同蛋氨酸水平對異育銀鯽(Carassius auratus gibelio)幼魚生長性能、體成分、氨基酸沉積率的影響。實(shí)驗(yàn)以魚粉、豌豆?jié)饪s蛋白、噴霧干燥血球粉為蛋白源, 設(shè)計(jì)低蛋氨酸(0.57%)實(shí)用基礎(chǔ)飼料, 并在此基礎(chǔ)上分別添加0、0.08%、0.16%、0.24%、0.32%、0.40%的DL-蛋氨酸配成蛋氨酸含量分別為0.57%、0.64%、0.74%、0.81%、0.88%、0.95%(干物質(zhì)基礎(chǔ), 實(shí)測值)的6種等氮等能(粗蛋白質(zhì): 37.22%, 總能: 17.61 MJ/kg)的配合飼料。選取初始體重為2.60 g的異育銀鯽幼魚為實(shí)驗(yàn)對象,每個(gè)處理3個(gè)重復(fù), 每個(gè)重復(fù)50尾魚, 養(yǎng)殖系統(tǒng)為室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng), 每天表觀飽食投喂4次。結(jié)果顯示在飼料中補(bǔ)充DL-蛋氨酸會(huì)顯著提高異育銀鯽幼魚的特定生長率和蛋白質(zhì)沉積率(P<0.05), 表明異育銀鯽可有效利用外源DL-蛋氨酸。各處理組實(shí)驗(yàn)魚肥滿度、肝體比、臟體比差異不顯著(P>0.05), 不同蛋氨酸水平對全魚水分、粗脂肪、能量沒有產(chǎn)生顯著影響(P>0.05), 補(bǔ)充DL-蛋氨酸顯著提高魚體的粗蛋白質(zhì)含量, 灰分含量顯著降低(P<0.05)。隨著飼料中蛋氨酸水平的提高, 全魚蛋氨酸沉積率顯著降低, 之后再升高(P< 0.05)。補(bǔ)充DL-蛋氨酸可以有效促進(jìn)其他必需氨基酸在魚體內(nèi)的沉積。在飼料中胱氨酸水平為0.42%時(shí), 通過折線模型回歸分析, 以蛋氨酸沉積率得到的異育銀鯽幼魚蛋氨酸需求量為占飼料干物質(zhì)的0.89%, 即占飼料蛋白的2.17%。

蛋氨酸; 異育銀鯽; 生長

蛋白質(zhì)是水生動(dòng)物飼料中最重要的營養(yǎng)成分,也是飼料中成本最高的部分。魚類對蛋白質(zhì)的需求實(shí)際上就是對必需氨基酸的需求, 所以漁用飼料中的氨基酸平衡, 尤其是必需氨基酸的平衡是提高飼料利用率的的重要途徑[1]。蛋氨酸是水生動(dòng)物的含硫必需氨基酸。在許多植物性蛋白源中(豆粕、花生粕等), 蛋氨酸是第一限制性氨基酸[2,3]。蛋氨酸參與蛋白質(zhì)的合成, 以S-腺苷甲硫氨酸的形式作為各種化合物甲基化的供體參與機(jī)體的眾多代謝過程, 同時(shí)也是合成胱氨酸、膽堿的前體[4,5]。因此, 只有當(dāng)飼料中的蛋氨酸水平滿足魚類生長的需求量時(shí), 才能夠使其獲得最大生長并同時(shí)提高飼料利用率[6]。目前, 國內(nèi)外已經(jīng)開展了大量在漁用飼料中添加晶體蛋氨酸的研究, 并確定了包括印度鯪(Cirrhinus mrigala H.)[7]、鯉魚(Cyprinus carpio L.)[8]、草魚(Ctenopharngodon idella)[9]、大黃魚(Pseudosciaena crocea R)[10]和大口黑鱸(Micropterus salmoides)[11]等眾多魚類的蛋氨酸需求量。

異育銀鯽(Carassius auratus gibelio)是中國科學(xué)院水生生物研究所20世紀(jì)80年代利用雌核發(fā)育生物技術(shù), 以興國紅鯉(Cyprinus carpio var.singuonensis)的精子刺激方正銀鯽(Carassius auratus gibe-lio Bloch.)的卵細(xì)胞培育的新品系。由于它保留了鯽魚肉質(zhì)鮮美、細(xì)嫩的特點(diǎn), 同時(shí)具有食性廣、生長快、病害少、養(yǎng)殖周期短、子代不分離等優(yōu)勢, 目前已經(jīng)成為我國鯽魚養(yǎng)殖中的主要品系, 是目前鯉科魚類的主要養(yǎng)殖品種之一[12]。迄今為止, 已有大量有關(guān)異育銀鯽的營養(yǎng)需求的研究, 已經(jīng)確定了如蛋白質(zhì)、脂肪[13]、碳水化合物、必需脂肪酸、幾種維生素[14]等需求量。在蛋氨酸需求量方面, 周賢君以魚粉、酪蛋白、豆粕為蛋白源, 部分蛋白以晶體氨基酸混合物替代制成半精制飼料, 以初均重1.67 g的異育銀鯽為實(shí)驗(yàn)對象研究了異育銀鯽幼魚的蛋氨酸需求量為占飼料干物質(zhì)的0.69%(胱氨酸含量為0.42%), 占飼料蛋白的1.68%[15]。本實(shí)驗(yàn)以實(shí)用飼料為基礎(chǔ), 旨在探討飼料中不同水平蛋氨酸對異育銀鯽的影響, 驗(yàn)證并確定異育銀鯽對飼料中蛋氨酸的需求量, 為異育銀鯽配合飼料的配制提供更為準(zhǔn)確的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)飼料

實(shí)驗(yàn)用DL-蛋氨酸由贏創(chuàng)德固賽(中國)投資有限公司提供。本研究以魚粉、豌豆?jié)饪s蛋白、噴霧干燥血球粉為主要蛋白源, 豆油為脂肪源, 配制低蛋氨酸實(shí)用基礎(chǔ)飼料, 并設(shè)定為對照組。在基礎(chǔ)飼料中分別添加0、0.08%、0.16%、0.24%、0.32%和0.40%的DL-蛋氨酸, 同時(shí)通過調(diào)節(jié)飼料中L-谷氨酸的含量, 設(shè)計(jì)6種等氮等能的實(shí)驗(yàn)飼料, 分別將其命名為DLM0、DLM1、DLM2、DLM3、DLM4、DLM5。飼料原料粉碎后全部通過100目篩, 按照添加量從小到大的順序逐級攪拌混勻, 制成直徑1 mm的硬顆粒料, 自然晾干后于?20℃保存。實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)飼料配方和化學(xué)組成(表1), 各實(shí)驗(yàn)飼料氨基酸成分分析(表2)。

1.2 實(shí)驗(yàn)用魚與飼養(yǎng)條件

實(shí)驗(yàn)用異育銀鯽購自天津市水產(chǎn)科學(xué)研究所魚苗場, 正式實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行為期2周的馴養(yǎng), 以適應(yīng)環(huán)境。養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所國家水產(chǎn)飼料安全評價(jià)基地室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行。該系統(tǒng)每桶水體容積為256 L, 實(shí)驗(yàn)用水為曝氣地下水, 水流速度約為0.4 L/s。實(shí)驗(yàn)采用體質(zhì)健康、個(gè)體大小均勻的異育銀鯽(2.60±0.00)g, 隨機(jī)分為6個(gè)處理組, 每個(gè)處理組3個(gè)重復(fù), 每個(gè)重復(fù)50尾魚。飼養(yǎng)周期56d, 實(shí)驗(yàn)開始和停止前24h停止投喂。每天表觀飽食投喂4次, 時(shí)間分別為9:00、12:00、15:00、18:00。每天測定一次水質(zhì), 溶氧保持在7.0 mg/L左右, 氨氮≤0.4 mg/L, 亞硝酸鹽≤0.15 mg/L, pH7.5—8.5, 水溫26—28℃。光照周期為自然光照周期。

表1 基礎(chǔ)飼料配方和化學(xué)組成(風(fēng)干基礎(chǔ))Tab.1 Formulation and chemical compositions of the basal diet(air-dry basis)

1.3 取樣及分析檢測

養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)開始時(shí), 取200 g初始魚樣品于?20℃保存。養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束前1天, 魚體禁食24h后稱量每桶魚總重。并從每桶取20尾魚作終末全魚樣品。每桶隨機(jī)取4尾魚, 分別測量其體重、體長、然后解剖, 稱量其內(nèi)臟重和肝臟重。初始和實(shí)驗(yàn)結(jié)束后采集的全魚樣品, 用組織勻漿機(jī)勻漿, 于75℃烘干,將烘干樣品粉碎后, 留作體成分分析。飼料和全魚的粗蛋白質(zhì)(凱氏定氮法)、粗脂肪(酸水解全脂肪測定法)、總能(氧彈測熱法)、水分和灰分采用 AOAC方法進(jìn)行(AOAC, 1997)。飼料及全魚氨基酸組成的測定, 參照國標(biāo)測定方法(GB/T5009.124-2003), 16種氨基酸(色氨酸和酪氨酸被分解)采用酸水解和氧化水解兩種方法分別處理用于測定其中14種和2種含硫氨基酸, 用日立L-8900型氨基酸分析儀測定。

表2 實(shí)驗(yàn)飼料氨基酸組成分析 (%干物質(zhì))Tab.2 Analyzed amino acid composition of the experimental diets (% dry matter)

1.4 計(jì)算公式及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

存活率(Survival rate, SR, %)=100×成活魚尾數(shù)/投放魚尾數(shù)

特定生長率(Specific growth rate, SGR, %/d)=100× [ln末均重?ln初均重]/實(shí)驗(yàn)天數(shù)

攝食率(Feed intake, FI, %/d)=100×總攝食量/[(初總重+終總重)/2]/實(shí)驗(yàn)天數(shù)

飼料系數(shù)(Feed conversion ratio, FCR)=總攝食量/魚體凈增重

蛋白質(zhì)沉積率(Protein productive value, PPV, %)=100×(末總重×末魚體蛋白質(zhì)含量?初總重×初魚體蛋白質(zhì)含量)/(總攝食量×飼料蛋白質(zhì)含量)

能量沉積率(Energy productive value, EPV, %) = 100×(末總重×末魚體能量含量-初總重×初魚體能量含量)/(總攝食量×飼料能量含量)

氨基酸沉積率(Amino acid productive value, APV, %)=100×(末總重×末魚體氨基酸含量?初總重×初魚體氨基酸含量)/(總攝食量×飼料氨基酸含量)

肥滿度(Condition factor, CF, %)=100×體重/體長3

臟體比(Viscerasomatic index, VSI, %)= 100×內(nèi)臟重/體重

肝體比(Hepaticsomatic index, HSI, %)=100×肝臟重/體重

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示, 使用統(tǒng)計(jì)軟件STATISTICA6.0對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA), 差異顯著時(shí)通過Duncan’s方法進(jìn)行多重比較, 以P<0.05為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)。蛋氨酸需求量以特定生長率和蛋氨酸沉積率為指標(biāo)進(jìn)行折線模型(Broken-line model)回歸分析。

2 結(jié)果

2.1 蛋氨酸水平對異育銀鯽幼魚生長性能的影響

從表3可以看出, 飼料中蛋氨酸水平顯著影響了異育銀鯽的生長(P<0.05)。DLM5組終末體重顯著高于其他組; DLM5組SGR顯著高于除DLM3組之外的其他組, PPV顯著高于DLM0、DLM1和DLM2組, 和DLM3、DLM4組沒有顯著差異。DLM5組FCR顯著低于除DLM3組之外的其他組(P<0.05)。

2.2 蛋氨酸水平對異育銀鯽幼魚形體指標(biāo)的影響

由表4可知, 不同蛋氨酸水平的飼料對異育銀鯽幼魚的肥滿度, 臟體比, 肝體比均未產(chǎn)生顯著影響。

表3 蛋氨酸水平對異育銀鯽幼魚生長性能的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤)Tab.3 Effect of dietary methionine levels on the growth performance of juvenile gibel carp (Mean ± SE)

表4 蛋氨酸水平對異育銀鯽幼魚形體指標(biāo)的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤)Tab.4 Effect of dietary methionine levels on morphometric parameters of juvenile gibel carp (Mean ± SE)

2.3 蛋氨酸水平對異育銀鯽幼魚體成分的影響

從表5中可以看出, 各實(shí)驗(yàn)組的魚體粗蛋白質(zhì)含量均高于對照組, 且DLM4組顯著高于對照組(P<0.05)。各實(shí)驗(yàn)組魚體灰分均低于對照組, 且DLM2組顯著低于其他各組(P<0.05)。各組魚體水分、粗脂肪、能量均沒有顯著差異。

2.4 蛋氨酸水平對異育銀鯽幼魚氨基酸沉積率的影響

由表6可以看出, 隨著蛋氨酸水平的增加, 異育銀鯽的蛋氨酸沉積率逐漸降低, 其中DLM4組和DLM5組顯著低于對照組(P<0.05), 并于DLM4組達(dá)到最低蛋氨酸沉積率, DLM5組開始上升。而胱氨酸沉積率隨蛋氨酸水平的增高呈現(xiàn)上升趨勢。實(shí)驗(yàn)組各組谷氨酸沉積率均高于對照組, 且在DLM5組顯著高于對照組(P<0.05)。其他各種氨基酸沉積率均無顯著差異, 但實(shí)驗(yàn)組的氨基酸沉積率均高于對照組,且隨著蛋氨酸水平的增加呈上升趨勢。

2.5 異育銀鯽幼魚蛋氨酸需求量

通過異育銀鯽的特定生長率數(shù)據(jù)對飼料中蛋氨酸水平進(jìn)行三次回歸分析, 得到特定生長率與蛋氨酸水平的三次多項(xiàng)式關(guān)系為y = 7.5494x3?15.436x2+ 10.659x?0.0807(R2= 0.8397)。三次多項(xiàng)式曲線(圖1)顯示蛋氨酸對促進(jìn)異育銀鯽幼魚的生長性能還有一定空間?？梢灶A(yù)測, 若繼續(xù)增加飼料中蛋氨酸含量,可能獲得更佳的生長性能。

通過折線模型回歸分析, 得到蛋氨酸沉積率(Methionine productive value, MPV)對飼料中蛋氨酸含量的關(guān)系(圖2), 曲線的拐點(diǎn)對應(yīng)的蛋氨酸含量即為異育銀鯽的蛋氨酸需求量。由圖2可知, 飼料中胱氨酸含量為0.415%時(shí), 通過蛋氨酸沉積率所得到的異育銀鯽蛋氨酸需求量為占飼料干物質(zhì)的0.89%,或占飼料蛋白的2.17%。

表5 蛋氨酸水平對異育銀鯽體成分的影響Tab.5 Effect of dietary methionine levels on body compositions of juvenile gibel carp (Mean ± SE)

表6 蛋氨酸水平對異育銀鯽氨基酸沉積率的影響Tab.6 Effect of dietary methionine levels on amino acid retention rate of juvenile gibel carp (Mean ± SE, %)

圖1 異育銀鯽特定生長率與飼料蛋氨酸水平的三次多項(xiàng)式關(guān)系Fig.1 Third-order polynomial relationship between SGR of gibel carp and dietary methionine level

圖2 異銀鯽蛋氨酸沉積率與飼料蛋氨酸水平的折線關(guān)系Fig.2 Break-line relationship between methionine retention rate of gibel carp and dietary methionine level

3 討論

3.1 蛋氨酸水平對異育銀鯽幼魚生長性能的影響

蛋氨酸是許多魚類生長的第一限制性氨基酸,尤其當(dāng)飼料中植物蛋白用量較高時(shí)[2,3]。大量研究表明, 在缺乏蛋氨酸的飼料中補(bǔ)充外源晶體蛋氨酸可以顯著提高魚類的生長性能。在南亞野鯪(Labeo rohita H.)上, Sardar, et al.以豆粕作為蛋白源, 在飼料中添加1.16%(占干物質(zhì))的DL-蛋氨酸, 顯著提高了南亞野鯪的生長性能和蛋白質(zhì)效率[3]。Eduardo, et al.在細(xì)鱗巨脂鯉(Piaractus mesopotamicus)上, 使用豆粕和玉米蛋白粉為主要蛋白源, 添加0.14%(占干物質(zhì))晶體DL-蛋氨酸, 顯著提高了生長性能和飼料利用效率[2]。林仕梅等在羅非魚植物蛋白飼料中補(bǔ)充D-蛋氨酸也有類似結(jié)果[16]。異育銀鯽屬于鯉科魚類, 由于鯉科魚類沒有胃, 腸道排空速度較快, 所以關(guān)于其能否有效利用晶體氨基酸一直存在爭議[1]。在本實(shí)驗(yàn)中, 隨著飼料蛋氨酸水平的增加, 特定生長率和相對增重率均逐漸升高, 于DLM3組達(dá)到平臺(tái)期, 并于DLM5組達(dá)到最大值, 顯著高于對照組(P<0.05)。這表明異育銀鯽可以有效利用晶體蛋氨酸, 從而達(dá)到促生長的效果。這與目前在其他鯉科魚類如印度鯪[7]、鯉魚[8]、草魚[9]、建鯉[17]、南亞野鯪(Labeo rohita)[18]的研究結(jié)果一致。

大量研究表明, 魚類的生長性能隨飼料中蛋氨酸含量的增加呈現(xiàn)出兩種不同的變化趨勢。一種是隨著飼料蛋氨酸含量增加, 魚類的生長速度相應(yīng)加快, 一旦飼料中蛋氨酸含量滿足了魚類需求量的時(shí)候, 即使提高飼料中蛋氨酸的含量, 魚類的生長也保持在相對穩(wěn)定的水平[6,19—21]。另一種則是隨飼料中蛋氨酸含量增加魚類生長速度也提高, 但當(dāng)飼料蛋氨酸水平超過需求量時(shí), 其生長速度出現(xiàn)下降的現(xiàn)象[10,22]。在本實(shí)驗(yàn)中, SGR隨著飼料中蛋氨酸含量的增加呈現(xiàn)不斷上升的趨勢, 若繼續(xù)增加飼料中蛋氨酸含量, 應(yīng)該仍舊會(huì)促進(jìn)其生長。造成這一現(xiàn)象的原因這可能是由于異育銀鯽幼魚的生長速度快,對氨基酸需求量較大導(dǎo)致的。目前在鯉科魚類上,王勝[9]以相對增重率為評價(jià)指標(biāo), 根據(jù)二次回歸模型得出當(dāng)飼料中胱氨酸含量(占干物質(zhì))為0.11%時(shí),草魚對飼料中蛋氨酸需求量為占飼料干物質(zhì)的1.10%, 占飼料蛋白的2.97%。Ahmed, et al.以相對增重率為評價(jià)指標(biāo), 采用二次回歸模型得出飼料中胱氨酸含量為1%時(shí), 印度鯪的蛋氨酸需求量為占飼料干物質(zhì)的1%, 占飼料蛋白的2.88%[7]。TANG, et al.以相對增重率為評價(jià)指標(biāo), 采用二次回歸分析得出當(dāng)飼料中胱氨酸含量為3%時(shí), 幼建鯉的最適蛋氨酸水平為占干物質(zhì)的1.2%, 占飼料蛋白的3.6%[17]。Scharwz, et al.以末均重為評價(jià)指標(biāo), 得出鯉魚飼料中胱氨酸含量為0.42%時(shí), 蛋氨酸需求量為占飼料干物質(zhì)的0.86%, 飼料蛋白的2.2%[8]。周賢君以半精制飼料為基礎(chǔ), 以特定生長率為評價(jià)指標(biāo), 采用折線模型得到當(dāng)飼料中胱氨酸含量為0.42%時(shí), 異育銀鯽的蛋氨酸需求量為占飼料的0.69%, 占飼料蛋白的1.68%[15]。不同品種魚類的蛋氨酸需求量存在差異, 不同研究方法對于同一品種的蛋氨酸需求量也會(huì)得到不同的結(jié)果。本研究采用實(shí)用飼料各組異育銀鯽的生長性能顯著高于周賢君[15]的結(jié)果。半精制飼料適口性差, 相對實(shí)用飼料可能低估魚類營養(yǎng)需求[23]。對各個(gè)研究結(jié)果整理后發(fā)現(xiàn),大部分水產(chǎn)動(dòng)物的蛋氨酸需求量在2%—4%(占飼料蛋白)這一范圍[24]。本實(shí)驗(yàn)通過MPV所得到的結(jié)果也印證了這一結(jié)論。同時(shí), 與其他鯉科魚類相比, 如印度鯪2.88%[7]、草魚2.97%[9]、建鯉3.6%[17]、南亞野鯪2.9%[18](占飼料蛋白), 異育銀鯽的蛋氨酸需求量相對較低, 而和鯉魚的2.2 %[8]的蛋氨酸需求量非常接近。不同魚類對于蛋氨酸需求量的差異可能是由于不同種屬之間的差異[25], 也可能是由于魚的規(guī)格、年齡、水溫、投喂策略、養(yǎng)殖密度、 氨基酸模式和飼料中其他營養(yǎng)物的含量, 特別是蛋白源的種類和含量所造成的[21,26,27]。

3.2 蛋氨酸水平對異育銀鯽幼魚蛋白質(zhì)和氨基酸沉積率的影響

在飼料中添加晶體氨基酸, 改善飼料蛋白質(zhì)中各種氨基酸的平衡情況, 可以提高蛋白質(zhì)的生物學(xué)效價(jià), 提高飼料中氮的利用率, 減少氮的排泄量。這樣既可節(jié)省天然蛋白質(zhì)飼料資源, 又可減輕集約化水產(chǎn)養(yǎng)殖對環(huán)境的氮污染問題。蛋白質(zhì)沉積率不僅反應(yīng)魚類蛋白質(zhì)合成和利用能力, 還能間接反應(yīng)氮的排放, 是重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境安全指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn), 在飼料中添加DL-蛋氨酸提高了異育銀鯽的蛋白質(zhì)沉積率, 這在鯉魚[7]、點(diǎn)帶石斑魚[6]、大口黑鱸[11]、黑鯛(Sparus macrocephalus)[28]等也有相同的報(bào)道。

水產(chǎn)動(dòng)物的生長主要是對飼料中蛋白質(zhì)的積累過程, 蛋白質(zhì)的積累又是通過氨基酸的合成來實(shí)現(xiàn)的。由于氨基酸檢測的成本較高, 目前大多數(shù)研究較少考慮氨基酸沉積率, 本研究發(fā)現(xiàn)在飼料中添加DL-蛋氨酸盡管降低了魚體蛋氨酸沉積率, 但提高了其他如賴氨酸、精氨酸和蘇氨酸等氨基酸的沉積率。并且發(fā)現(xiàn)必需氨基酸中蛋氨酸、蘇氨酸、組氨酸、賴氨酸、異亮氨酸的沉積率均高于43%, 遠(yuǎn)大于異育銀鯽的蛋白質(zhì)沉積率。相比之下, 非必需氨基酸的沉積率大多與蛋白質(zhì)沉積率水平較為接近,甚至低于蛋白質(zhì)沉積率。這表明異育銀鯽幼魚對于飼料中必需氨基酸的利用率較高, 可以推斷異育銀鯽幼魚會(huì)優(yōu)先利用飼料中必需氨基酸來滿足其生長需求。高貴琴等使用雙低菜籽粕替代飼料中的魚粉和豆粕實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn), 隨著雙低菜籽粕的替代比例升高, 異育銀鯽的必需氨基酸沉積率呈現(xiàn)下降趨勢[29]。Luo, et al.在使用大豆?jié)饪s蛋白和晶體氨基酸混合物替代魚粉的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn), 添加L-蛋氨酸可以顯著提高石斑魚肌肉的必需氨基酸含量[6]。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明, 在使用植物性蛋白源替代魚粉時(shí)添加DL-蛋氨酸可以有效提高必需氨基酸的沉積率, 進(jìn)而促進(jìn)異育銀鯽的生長。

本研究發(fā)現(xiàn), 隨著飼料中DL-蛋氨酸添加量的不斷升高, 異育銀鯽幼魚蛋氨酸沉積率出現(xiàn)了先下降后上升的趨勢。被消化吸收的蛋氨酸在進(jìn)入機(jī)體后, 一部分參與機(jī)體蛋白質(zhì)的合成, 另外一部分被分解用于供能。研究發(fā)現(xiàn)飼料中必需氨基酸在魚體的沉積率隨飼料中氨基酸含量的增加而減少[30]。葉元土指出必需氨基酸的平衡性是配合飼料蛋白質(zhì)質(zhì)量的決定性因素之一[31], 王愛民等指出氨基酸平衡飼料對異育銀鯽的生產(chǎn)性能具有顯著改善作用[32]。在本研究中, 在滿足異育銀鯽蛋氨酸需求量之前,飼料中的氨基酸比例不平衡, 限制了魚體蛋白質(zhì)的合成, 導(dǎo)致攝入的大量蛋氨酸流失浪費(fèi), 從而出現(xiàn)隨著蛋氨酸添加量增加, 蛋氨酸沉積率下降的現(xiàn)象;而當(dāng)?shù)鞍彼岬暮繚M足魚體需求之后, 飼料氨基酸達(dá)到平衡, 魚體蛋白質(zhì)合成速度提高, 進(jìn)而使異育銀鯽幼魚蛋氨酸沉積率出現(xiàn)了上升的趨勢。

魚類對于蛋氨酸的需求量實(shí)際上是對于總的含硫氨基酸的需求量[33], 當(dāng)?shù)鞍彼岜粩z入體內(nèi), 僅有一部分直接用于合成蛋白質(zhì), 而另一部分則轉(zhuǎn)化成胱氨酸參與蛋白質(zhì)的合成, 因此飼料中胱氨酸能夠節(jié)約蛋氨酸的比例。目前研究發(fā)現(xiàn)飼料中胱氨酸部分替代蛋氨酸的比例為斑點(diǎn)叉尾(Ictalurus punctatus)60%[34]、黃鱸(Perca flavescens)51%[35]、尼羅羅非魚(Oreochromis niloticus)49%[21]、虹鱒(Oncorhynchus mykiss)42%[36]、美國紅魚(Sciaenops ocellatus)40%[37]、雜交條紋鱸(Morone chrysops×M.saxatilis)40%[38]。在本實(shí)驗(yàn)飼料中胱氨酸水平為0.415%(占干物質(zhì)), 所以異育銀鯽幼魚總含硫氨基酸的需求量為占飼料干物質(zhì)的1.31%(MPV), 占飼料蛋白的3.19% (MPV)。該結(jié)果與周賢君測定異育銀鯽蛋氨酸需求量使用的胱氨酸水平一致, 但通過實(shí)驗(yàn)得到的蛋氨酸需求量卻高于其研究結(jié)果(占飼料的0.69%, 占飼料蛋白的1.68%; 總含硫氨基酸需求量為占飼料干物質(zhì)1.11%, 占飼料蛋白的2.71%;胱氨酸占飼料干物質(zhì)的0.42%[15]。造成這一結(jié)果差異的原因可能是由于飼料配方, 投喂策略, 養(yǎng)殖密度的不同。周賢君采用的飼料為半精制飼料, 適口性較差, 是導(dǎo)致其各組生長性能偏低的原因之一。另外, 有研究表明, 當(dāng)異育銀鯽的日投喂頻率為24次時(shí), 獲得最大生長速度[39]。周賢君采用每天過量投喂2次的方法進(jìn)行養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)[15], 而本實(shí)驗(yàn)采取每日4次飽食投喂的策略。這可能導(dǎo)致其所得到的蛋氨酸需求量相對偏高的原因之一。

3.3 蛋氨酸水平對異育銀鯽幼魚體成分、形體指標(biāo)的影響

在本實(shí)驗(yàn)中, 飼料中蛋氨酸水平對異育銀鯽幼魚的肥滿度、臟體比、肝體比均沒有產(chǎn)生顯著影響, 這與在軍曹魚飼料中添加L-蛋氨酸得到的結(jié)果一致[40]。在黑鯛的研究中發(fā)現(xiàn), 飼料中蛋氨酸水平對肥滿度沒有顯著影響, 當(dāng)?shù)鞍彼崴礁哂谛枨罅繒r(shí), 肝體比有小幅的升高[27]。吉紅等的研究表明飼料成分對于魚體肥滿度、肝體比、臟體比影響不大[41], 葉元土等在草魚飼料中使用豆粕、菜粕等植物性蛋白源替代魚粉的實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)類似結(jié)果[42]。在本實(shí)驗(yàn)中,全魚灰分均低于對照組, 這一現(xiàn)象與Ahmed, et al.在印度鯪上發(fā)現(xiàn)的一致[7]。全魚粗蛋白質(zhì)含量均高于對照組, 且DLM4組最高, 顯著高于對照組(P< 0.05)。這可能是由于在蛋氨酸缺乏的情況下, 飼料中氨基酸不平衡導(dǎo)致魚體蛋白質(zhì)合成率下降, 隨著蛋氨酸的添加, 飼料中氨基酸達(dá)到平衡, 進(jìn)而促進(jìn)了魚體蛋白質(zhì)合成[43]。在本實(shí)驗(yàn)中, 飼料蛋氨酸水平未對全魚的脂肪和能量產(chǎn)生顯著影響, 這與在大黃魚、軍曹魚、大口黑鱸和黑鯛的研究結(jié)果一致[10,11,27,39]。

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EFFECTS OF DIETARY METHIONINE LEVELS ON THE GROWTH PERFORMANCE OF JUVENILE GIBEL CARP (CARASSIUS AURATUS GIBELIO)

JIA Peng1,2, XUE Min2, ZHU Xuan3, LIU Hai-Yan1,WU Xiu-Feng2, WANG Jia2, ZHENG Yin-Hua2and XU Mei-Na2
(1.Life Science College, Hebei Normal University, Shijiazhuang 050024, China; 2.The National Aquatic Feed Safety Assessment Center, Feed Institute Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China; 3.Evonik Degussa (China) Co., Ltd., Beijing 100026, China)

Methionine is usually the first limiting amino acid in many fish diets, especially those containing high levels of plant protein sources, such as soybean meal, peanut meal, and cottonseed meal.In the present study, an 8-week growth trial was conducted to evaluate the effects of dietary methionine (Met) levels on growth performance, nutrients retentions of gibel carp (Carassius auratus gibelio) with the initial weight of 2.60 g based on practical diets.Six isonitrogenous (crude protein content 37.22%) and isoenergetic (gross energy 17.61KJ/kg) diets were formulated with different levels of DL-methionine, i.e., 0, 0.08%, 0.16%, 0.24%, 0.32%, 0.40%.The determined Met levels were 0.57%, 0.64%, 0.74%, 0.81%, 0.88% and 0.95% and then defined as DLM0 (basal diet), DLM1, DLM2, DLM3, DLM4, and DLM5, respectively.Fifty fish were batch weighted and put into each tank and each treatment had triplicate tanks.All the experimental fish were stocked in a flow-through system, fed four times a day (9:00, 12:00, 15:00, 18:00).The water temperature fluctuated from 26 to 28°C and dissolved oxygen was maintained at ～7.0 mg/L.The results indicated that specific growth rate (SGR) and protein productive value (PPV) significantly increased with the DL-Methionine supplemented diets (P<0.05), indicating that gibel carp could utilize crystallized DL-Met.Maximum final body weight (FBW, 11.15 g), highest specific growth rate (2.60%/d), and protein productive value (37.02%) were observed in fish fed with diet containing methionine at 0.951% level (DLM5).There were no significantly differences on morphometric parameters and whole body nutrients compositions except crude protein and ash (P>0.05).Whole body crude protein of fish fed with Met supplemented diets were higher than that of the control group, while ash content of the control group was significantly lower than those of all other groups (P<0.05).The methionine productive value (MPV) was reduced with increasing levels of methionine up to 0.876% of diet (DLM4) (P<0.05), and then increased in the DLM5 group.While other essential amino acid productive values increased with the higher methionine levels in diets, a third-order polynomial regression analysis of specific growth rate indicated that the growth performance of juvenile gibel carp might be improved if the methionine levels enhanced subsequently.Broken-line model of MPV indicated that optimum Met level in the diet of juvenile gibel carp was 0.89% of diet (dry matter basis), or 2.17% in terms of dietary protein with cystine level at 0.42%.

Methionine; Carassius auratus gibelio; Growth

S963

A

1000-3207(2013)02-0217-10

10.7541/2013.7

2012-03-15;

2012-12-01

公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科技專項(xiàng)(201003020; 201203015); 十二五國家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(20113AD26B04); 河北師范大學(xué)科研基金(L2008B08); 河北師范大學(xué)研究生科研基金(201002022)資助

賈鵬(1987—), 男, 河北省邢臺(tái)人; 碩士研究生; 主要從事水產(chǎn)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料研究。E-mail: alexander6264@hotmail.com

薛敏, 研究員, 碩士生導(dǎo)師; Tel: 010- 82106095; E-mail: xuemin@caas.cn