歐陽亦華李瑞明

阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑（14：1）的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究※

歐陽亦華1李瑞明2

目的對阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑（14：1）的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容進行了研究。方法通過對質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究，對質(zhì)量控制的各個方面進行完整的考察，從而確定制劑的保存方法和質(zhì)量控制指標(biāo)。結(jié)果與結(jié)論阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑（14：1）中阿莫西林、克拉維酸鉀濕度較高時較不穩(wěn)定，影響其質(zhì)量問題，保存時應(yīng)當(dāng)注意，其它要求均能合格制劑條件。

阿莫西林；克拉維酸鉀；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

阿莫西林是青霉素類抗生素，單獨用藥時容易產(chǎn)生耐藥性，阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑是阿莫西林和克拉維酸鉀的復(fù)方制劑，β-內(nèi)酰胺酶抑制劑克拉維酸鉀能明顯提高阿莫西林對其耐藥菌的活性，故阿莫西林配合克拉維酸鉀使用時療效更好，且對革蘭陽性及革蘭陰性細菌均有效[1-3]。本文主要針對阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑（14：1）進行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究，從而確定阿莫西林和克拉維酸配比情況下的制劑保存和質(zhì)量控制指標(biāo)[4]。

1 儀器與試劑

1.1 試驗方法參照中國藥典2010年版二部。島津LC-10AT型高效液相色譜儀，SPD-10A紫外檢測器，浙江大學(xué)N2000色譜管理系統(tǒng)，色譜柱：Diamonsil C18，5μm，Φ4.6×200mm，北京迪馬公司，柱溫：室溫；pHS-10A數(shù)字酸度計。

1.2 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以磷酸鹽緩沖液[取磷酸二氫鈉7.8g，加水900ml溶解，用磷酸或10mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值至（4.4±0.1），加水稀釋至1000ml]-甲醇（95：5）為流動相；流速：1.0ml/min；檢測波長為220nm。阿莫西林峰與克拉維酸峰的分離度應(yīng)大于3.5，理論板數(shù)按阿莫西林及克拉維酸計算均應(yīng)不低于2000。

1.3 樣品來源本品所含的兩種組分阿莫西林和克拉維酸鉀均由江西制藥有限責(zé)任公司提供。批號：200101003，含量：阿莫西林（C16H19N3O5S）為77.32%；克拉維酸鉀（C8H8KNO5）以克拉維酸計為5.50%。經(jīng)按中國藥典2010年版二部檢驗符合規(guī)定。阿莫西林600mg（以無水物計）：克拉維酸鉀42.9mg（以克拉維酸計），樣品批號：010506、010508、010510。阿莫西林對照品，批號：0409-9907，含量84.5%；克拉維酸對照品，批號：0429-9902，含量：91.3%，均由中國藥品生物制品檢定所提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀

2.1.1 外觀性狀本品原料為白色粉未，所用輔料均為白色。經(jīng)對試制的三批樣品進行檢查，結(jié)果均為白色粉末?？紤]到本品原輔料顏色變化可能對成品顏色帶來的影響，參考阿莫西林克拉維酸鉀其它口服制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的外觀性狀描述，將其性狀描述為：本品為白色或類白色粉末。

2.1.2 吸濕情況取阿莫西林克拉維酸鉀（14：1）干混懸劑010506批，去除外包裝袋后，分別露置于裝有飽和氯化鈉水溶液（相對濕度75%）和裝有飽和硝酸鉀水溶液(相對濕度92.5%)的干燥器中，分別在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、24、48、72、96、120、240h取出稱量，計算增重的百分?jǐn)?shù)。結(jié)果表明，本品具有較強引濕性，在相對濕度為75%的條件下吸濕達3.7%后趨于飽和；在相對濕度為92.5%的條件下放置10d，吸濕達9%。

2.2 鑒別本品是由兩類不同結(jié)構(gòu)的化合物混合加適當(dāng)?shù)妮o料制成的，參考同類混合制劑的鑒別方法采用高效液相色譜法（HPLC法）鑒別。在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液的兩主峰保留時間應(yīng)與對應(yīng)的對照品溶液中阿莫西林對照品和克拉維酸對照品的保留時間一致（保留時間相差應(yīng)不得過5%）。經(jīng)檢驗三批樣品，結(jié)果見表1。

表1 阿莫西林與克拉維酸鉀（14：1）干混懸劑鑒別結(jié)果（min）

2.3 檢查

2.3.1 PH值的測定試驗方法：取阿莫西林克拉維酸鉀（14：1）干混懸劑適量，加水制成每1ml中約含阿莫西林10mg的溶液，依法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅵ H）測定。定位溶液：鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液（PH=4.00，T=25℃），核對溶液：磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液（PH=6.86，T=25℃）。對三批樣品按上述方法檢查，樣品010506、010508、010510的PH值結(jié)果分別為4.35、4.28、4.41。

2.3.2 溶液的沉降體積比參考中國藥典2010年版二部附錄ΙΟ混懸劑項下的沉降體積比的檢查方法，取阿莫西林克拉維酸鉀（14：1）干混懸劑10包，置于具塞量筒中，加水至50ml振搖1min，混合均勻，記錄此時混懸物的高度（Ho），放置3h后記錄此時混懸物的高度（H）。計算H/Ho的結(jié)果，即為沉降體積比。對三批樣品按上述方法檢查，沉降體積比均在藥典規(guī)定范圍。

2.3.3 混懸劑的分散性參考中國藥典2010年版二部附錄ΙΟ混懸劑項下的有關(guān)規(guī)定，取阿莫西林克拉維酸鉀（14：1）干混懸劑5包，置于燒杯中，加入50ml水?dāng)嚢?min，分別對三批樣品進行檢查，混懸劑均分散均勻，無異物。

2.3.4 水分阿莫西林克拉維酸鉀（14：1）干混懸劑中的阿莫西林為三水化合物（每分子含有三個結(jié)晶水），其水分含量較高，克拉維酸分子中不含有結(jié)晶水，參照阿莫西林水分測定法，采用卡爾-費休氏水分測定法測定其含水量。取本品150mg，按中國藥典2010年版二部附錄Ⅷ M水分測定法第一法進行測定。對三批樣品按上述方法檢查，樣品010506、010508、010510的水分測定結(jié)果分別為4.7%、4.8%、4.6%。

2.3.5 裝量差異取本品三批各10包，除去外包裝，分別精密稱定每一包內(nèi)容物的重量，求出每包內(nèi)容物的裝量與平均裝量，三批樣品稱定結(jié)果見表2。

表2 阿莫西林克拉維酸鉀（14：1）干混懸劑的裝量差異結(jié)果（g）

2.3.6 樣品含量均勻度取本品1小包，照含量均勻度測定法（中國藥典2010年版二部附錄Х E），置于500ml量瓶中，加水使溶解，并稀釋至刻度，搖勻。濾過，精密量取續(xù)濾液20ml置25ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取克拉維酸對照品適量，加水溶解，制成每1ml中約含克拉維酸0.07mg的溶液，同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計算供試品中C5H9NO5的含量。三批樣品中克拉維酸鉀的含量均勻度，結(jié)果見表3。

表3 各批號克拉維酸鉀含量均勻度測定結(jié)果（%）

2.3.7 微生物限度根據(jù)中國藥典2010年版二部附錄的要求，阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑屬抗細菌的抗生素，應(yīng)進行霉菌檢查。經(jīng)對三批樣品的霉菌檢查，樣品010506、010508、010510的霉菌結(jié)果均小于10個/g。

2.3.8 有關(guān)物質(zhì)試驗方法：參照中國藥典2010年版二部收載品種阿莫西林克拉維酸鉀片的含量測定方法——高效液相色譜法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅴ D），確定本品有關(guān)物質(zhì)測定法為高效液相色譜法，其有關(guān)物質(zhì)的考察采用自身對照法。測定法：精密吸取對照溶液10μl，注入高效液相色譜儀，調(diào)節(jié)儀器靈敏度，使阿莫西林峰高約為滿量程的20～25%。再精密吸取供試品溶液與對照溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖至主峰保留時間的2.5倍，供試品溶液的色譜圖中各雜質(zhì)峰面積之和與對照溶液（1%）主峰面積之和相比，計算出有關(guān)物質(zhì)的量。采用自身對照法計算樣品中有關(guān)物質(zhì)的含量，樣品010506、010508、010510的結(jié)果分別為0.62%、0.64%、0.65%。

2.3.9 最低檢出量取對照品溶液，逐級稀釋后，依上述有關(guān)物質(zhì)測定方法檢測，記錄色譜圖，以主峰響應(yīng)信號為噪聲3倍作為最小可檢測的信號（S/N≈3），當(dāng)對照品溶液中的克拉維酸稀釋至3.5ng/ml時，得克拉維酸最低檢測量為0.035ng。繼續(xù)稀釋，當(dāng)對照品溶液中的阿莫西林稀釋至5ng/ml時，得阿莫西林最低檢測量為0.05ng。色譜圖見圖1、2。

圖1 克拉維酸最低檢出量HPLC圖

圖2 阿莫西林最低檢出量HPLC圖

3 結(jié)果與討論

阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑為了便于保存，方便攜帶和使用的一種在臨床上常用的抗感染藥，主要成分在分子結(jié)構(gòu)上均為含p-內(nèi)酞胺結(jié)構(gòu)的化合物，對光、熱、濕度均不穩(wěn)定，阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑（7：1）已有上市產(chǎn)品，但不同比例的干混懸劑在使用中由于阿莫西林克拉維酸鉀兩者比例的不同，從而影響每天需要服用的次數(shù)和劑量。

本研究制劑是采用阿莫西林和克拉維酸鉀（14：1）比例制成的干混懸劑。本文對其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進行了研究，從而得出是否在此比例時的阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑更穩(wěn)定，更有利臨床使用。通過對（14：l）干混懸劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)考察，顯示濕度是影響其穩(wěn)定性的最關(guān)鍵性因素，尤其對克拉維酸鉀的影響極大，因此本品在制備和貯藏過程中，應(yīng)嚴(yán)格控制環(huán)境濕度，同時制劑需采用棕色玻璃瓶包裝，瓶口壓鋁箔紙板復(fù)合內(nèi)蓋密封封口，才能確保在有效期內(nèi)的產(chǎn)品質(zhì)量。

干混懸劑把藥物與輔料共同以干粉形式貯存，而使用時加入溶液后則以混懸液形式供口服，因此特別適于對水、濕度不穩(wěn)定的藥物；干混懸劑也可用于兒童和部分有吞咽困難的成人，在臨床上是值得研發(fā)的一種新劑型。

[1] 中華人民共和國藥典委員會.中國藥典(二部)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2010.

[2] The United States Pharmacopeial Convention. United States Plarmacop eia(USP)XXIX[S],2005.

[3] 張珂.HPLC法測定阿莫西林克拉維酸鉀顆粒的含量[J].藥學(xué)進展,2007,31(5)：221-224.

[4] 吳小玉,常學(xué)軍,李嘉宇,等.阿莫西林克拉維酸鉀(7：l)干混懸劑工藝及穩(wěn)定性研究[J].中國藥師,2006,9(5)：394-397.

The study of quality standards on Amoxicillin and Clavulanate Potassium for Suspension(14∶1)

Ouyang Yihua Li Ruiming

ObjectiveTo study the quality standards of amoxicillin and clavulanate Potassium for Suspension (14∶1).MethodsQuality standards, quality control of all aspects of a complete investigation to determine the save method of preparation and quality control indicators.Results and ConclusionAmoxicillin and clavulanate Potassium for Suspension (14∶1) when with a high relative humidity will be less stability, affecting its quality problems, should be saved in proper material.

Amoxicillin; Clavulanate Potassium; Quality control

R927.11

A

1673-5846(2013)02-0056-03

1 廣州市番禺區(qū)人口和計劃生育服務(wù)站藥劑科，廣東廣州 511400

2 中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院藥學(xué)部，廣東廣州 510080

廣東省重大科技專項項目（2011A080300004）；廣州市生物產(chǎn)業(yè)示范工程發(fā)展專項項目（2012-243）

歐陽亦華（1971-9），男，本科，主管藥師，主要研究方向為醫(yī)院藥學(xué)。E-mail：617888649@qq.com。

李瑞明（1974-7），男，本科，主管藥師，主要研究方向為醫(yī)院制劑。E-mail：liruiming321@163.com。