劉永紅　葛立宏　陳惠珍

[摘要] 目的 比較滲透樹脂在乳、恒磨牙鄰面早期齲損中的滲透能力。方法 選取鄰面呈白堊色改變的早期齲損離體乳磨牙32顆、恒牙（磨牙或前磨）36顆，垂直于齲損表面將牙齒切開，在體視顯微鏡下進(jìn)行病損的組織學(xué)分

級(jí)（C1～C4），C1：齲損位于釉質(zhì)外1/2；C2：齲損位于釉質(zhì)內(nèi)1/2；C3：齲損位于牙本質(zhì)外1/2；C4：齲損延伸至牙

本質(zhì)內(nèi)1/2。C4被排除。隨后病損用15%的鹽酸酸蝕2 min后，進(jìn)而使用滲透樹脂滲透5 min。制作牙切片，使用雙熒光染色技術(shù)，在激光掃描共聚焦顯微鏡（CLSM）下觀察樣本。分別測(cè)量乳、恒牙的病損深度（LD）和滲透樹脂的滲透深度（PD），計(jì)算滲透百分?jǐn)?shù)（PP），并對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 在所有組織學(xué)病損分級(jí)（C1～C3級(jí)）中，乳、恒磨牙PP間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；但是，在C1組織學(xué)病損分級(jí)中，乳牙的滲透能力優(yōu)于恒牙（P<0.05），在C2和C3組織學(xué)病損分級(jí)中，乳、恒牙PP間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 滲透樹脂對(duì)乳、恒磨牙鄰面早期

齲損均有很好的滲透作用。尤其對(duì)較淺的早期齲（C1級(jí)），滲透樹脂治療乳牙的效果優(yōu)于恒牙。

[關(guān)鍵詞] 早期齲； 滲透樹脂； 激光掃描共聚焦顯微鏡； 滲透百分?jǐn)?shù)

[中圖分類號(hào)] R 781.05 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼] A [doi] 10.7518/hxkq.2013.02.012

早期齲在臨床上表現(xiàn)為白堊色斑塊，典型的病理損害是釉質(zhì)表層相對(duì)完整而表層下嚴(yán)重脫礦，其微觀結(jié)構(gòu)顯示有許多微小孔隙，這些小孔隙對(duì)有機(jī)酸的擴(kuò)散、礦物質(zhì)的進(jìn)出提供了通道，但同時(shí)也為樹脂的滲入提供了便利。

滲透樹脂是一種新型材料，它可以進(jìn)入早期齲損的微小孔隙，堵塞和封閉其通道，進(jìn)而阻止齲損的進(jìn)展[1]。已有研究結(jié)果顯示：滲透樹脂可以深入地進(jìn)入乳牙[2]和恒牙[3]的鄰面早期齲損，阻止病損的進(jìn)展。但是滲透樹脂在乳、恒牙早期齲損中的滲透能力有無區(qū)別，孰強(qiáng)孰弱，目前尚無相關(guān)報(bào)道。本研究旨在通過對(duì)滲透樹脂在乳、恒牙鄰面早期齲損中滲透能力的比較，了解其滲透能力的差異，進(jìn)而為滲透樹脂在乳、恒牙早期齲損中的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料和設(shè)備

滲透樹脂包括酸蝕劑（Icon-Etch）和滲透劑（Icon-Infiltrant）（DMG公司，德國(guó)），羅丹明B染料、熒光素鈉染料（Sigma公司，美國(guó)），激光掃描共聚焦顯微

鏡（confocal laser scanning microscopy，CLSM）、體視顯微鏡（Olympus公司，日本）。

1.2 樣本的選取

選取2011年9—12月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院口腔頜面外科門診新鮮拔除或自然脫落的乳磨牙32顆和恒牙（磨牙或前磨牙）36顆為研究對(duì)象，磨牙鄰面顯示有白堊色斑的非洞早期齲損，標(biāo)準(zhǔn)符合國(guó)際齲病檢測(cè)和評(píng)估系統(tǒng)的第二類（ICDAS 2）[4]。去除牙根并清理軟組織后，將牙齒置于0.1%的麝香草酚溶液中備用[5-6]。

1.3 試件的制備

垂直于齲損表面將牙齒一切為二后，置于20倍體視顯微鏡下進(jìn)行觀察，并進(jìn)行病損的組織學(xué)分級(jí)[5]，具體如下。C1：齲損位于釉質(zhì)的外1/2；C2：齲損延伸至釉質(zhì)的內(nèi)1/2；C3：齲損延伸至牙本質(zhì)的外1/2；C4：齲損延伸至牙本質(zhì)的內(nèi)1/2。排除標(biāo)準(zhǔn)：20倍體視顯微鏡下觀察有齲洞或表面有損壞的樣本、C4級(jí)樣本。隨后將乳、恒牙樣本分別用滲透樹脂進(jìn)行如下處理[6]。1）將耐酸指甲油涂布于牙切面后，使用

15%的鹽酸凝膠（Icon-Etch）酸蝕齲損表面2 min，用水槍徹底沖洗30 s，無油壓縮空氣吹干。2）將樣本牙放入0.1%的羅丹明B乙醇溶液里染色12 h，讓紅色熒光染料充分標(biāo)記齲損的微孔。3）用壓縮空氣干燥樣本牙10 s，將滲透樹脂（Icon-Infiltrant）涂抹于病損

面，靜置5 min，用棉卷擦掉多余材料后光固化60 s。4）把樣本牙放入30%的過氧化氫溶液中，靜置于37 ℃恒溫箱12 h，將未被滲透樹脂封閉的羅丹明B染料漂白，隨后用水槍沖洗樣本60 s。5）去除吸附在樣本切面上的指甲油，將樣本牙用慢速砂片平行于牙切面切成厚約3 mm的試件，然后用不同表面粒度的砂紙由粗到細(xì)依次打磨、拋光，直至試件透光。6）為了標(biāo)記未被滲透樹脂滲入病損的微孔結(jié)構(gòu)，將試件置于含有100 μmol·L-1熒光素鈉的50%乙醇溶液中浸泡3 min，然后用去離子水沖洗10 s，隨即在CLSM下進(jìn)行觀察。

1.4 羅丹明B和熒光素鈉在CLSM下的觀察

羅丹明B激發(fā)波長(zhǎng)為568 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為590 nm；熒光素鈉激發(fā)波長(zhǎng)為488 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為525 nm。羅丹明B顯示紅色，熒光素鈉顯示綠色。被滲透樹脂滲入的病損顯示為紅色，沒有被滲透的病損微孔顯示為綠色。在CLSM圖像的6個(gè)指定點(diǎn)上測(cè)量病損深度（lesion depth，LD）和滲透深度（penetration depth，

PD）（用100 μm的格子標(biāo)識(shí)）。PD和LD為從釉質(zhì)表面分別到紅色和綠色熒光最深點(diǎn)的距離，并計(jì)算滲透百分?jǐn)?shù)（percentage penetration，PP），公式為：PP=PD/LD×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)呈非正態(tài)分布，故采用中位數(shù)（下

四分位數(shù)，上四分位數(shù)）表示。使用兩獨(dú)立樣本秩和

檢驗(yàn)（Wilcoxon rank test）比較乳、恒磨牙的PP。檢驗(yàn)水準(zhǔn)為雙側(cè)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 乳、恒磨牙病損的組織學(xué)分級(jí)

組織學(xué)病損分級(jí)為C1～C3的乳磨牙分別為11、14、7顆；組織學(xué)病損分級(jí)為C1～C3的恒磨牙分別為10、15、11。乳、恒磨牙的組織學(xué)病損分級(jí)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.738，P=0.691）。

2.2 在雙熒光染色下乳、恒牙CLSM圖像的比較

滲透樹脂治療后乳、恒磨牙早期齲損的觀察結(jié)果見圖1。由圖1可見，滲透樹脂滲入的病損顯示為紅色，而病損剩余的微孔被熒光素鈉染成綠色，黃色為紅綠熒光疊加。沒有微孔的健康釉質(zhì)或表層呈黑色。

2.3 乳、恒磨牙PP的比較

乳、恒磨牙PP的計(jì)算結(jié)果見表1。由表1可見，在所有組織學(xué)病損分級(jí)中，乳、恒磨牙PP間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但是在C1組織學(xué)病損分級(jí)中，乳牙的滲透能力優(yōu)于恒牙（P<0.05），而在C2和C3組織學(xué)病損分級(jí)中，乳、恒牙PP間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

3 討論

牙齒鄰面由于位置隱蔽、不易清潔或清潔不徹底，易導(dǎo)致菌斑堆積，且牙齒鄰面釉質(zhì)表層存在較多微孔[7]，使得牙齒鄰面容易患齲。研究發(fā)現(xiàn)：乳磨

牙鄰面患齲率最高，其次為面[8]。也有研究表明：即使在患齲率很低的人群，通過翼片檢查發(fā)現(xiàn)也有相當(dāng)比例的兒童乳磨牙鄰面患齲[9]。而對(duì)于恒牙[10]，

齲損的好發(fā)牙面也以咬合面、鄰面居多。目前，對(duì)于鄰面早期齲損的臨床治療主要采用微創(chuàng)療法，常使用牙線控制菌斑和局部用氟[11]，然而對(duì)于依從性

較差的人群，治療效果不佳。至于創(chuàng)傷性治療鄰面齲，即使是微小的牙體預(yù)備，也會(huì)導(dǎo)致健康牙體硬組織不必要的損失，且充填體容易脫落?，F(xiàn)今，齲損滲透技術(shù)[1-3，5-6]是運(yùn)用低黏度光固化滲透樹脂通過毛細(xì)作用滲入到病損微孔內(nèi)，堵塞和充填微孔，替代因脫礦丟失的硬組織，并形成擴(kuò)散屏障，無創(chuàng)、有效地終止病變進(jìn)展。

實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)：滲透樹脂能有效甚至完全地滲入到乳[12]、恒牙[3，5]鄰面早期齲損中。臨床研究表明：用滲透樹脂能夠有效地減少恒牙鄰面早期齲的進(jìn)展[13]。另有研究表明：應(yīng)用滲透樹脂治療乳磨牙

鄰面早期齲，隨訪1年，結(jié)果發(fā)現(xiàn)滲透樹脂治療的效果優(yōu)于使用氟保護(hù)漆[14]。

本實(shí)驗(yàn)使用CLSM作為實(shí)驗(yàn)研究的檢測(cè)儀器，通過齲損熒光分布情況觀測(cè)齲損部位的深淺以及滲透樹脂的PD，并計(jì)算PP。PP能夠準(zhǔn)確、客觀地反映滲透能力，所以本研究旨在通過對(duì)滲透樹脂在乳、恒磨牙鄰面早期齲損中滲透能力的比較，了解其滲透能力的差異，進(jìn)而為滲透樹脂在乳、恒牙早期齲損中的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：滲透樹脂對(duì)乳、恒磨牙早期齲均有很好的滲透作用，這與國(guó)外的研究報(bào)道是一致的[2-3，5，12]。本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)：在C1組織學(xué)病損分級(jí)中，乳牙的滲透能力優(yōu)于恒牙。筆者認(rèn)為這與乳、恒牙的釉質(zhì)結(jié)構(gòu)不同有關(guān)。與恒牙相比，乳牙釉質(zhì)中有機(jī)質(zhì)含量高，礦化程度低[15]；易磨耗，硬度差；乳牙釉質(zhì)的厚度薄，約為恒牙釉質(zhì)厚度的1/2；乳牙的釉柱比恒牙彎曲少，排列整齊；掃描電子顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，乳牙的平滑面常見小孔，而且越近牙頸部小孔的發(fā)生率越高，明顯高于恒牙[16]；并且乳牙鄰面牙頸部集中存在微小龜裂，與其易患齲有關(guān)。

總之，對(duì)于乳、恒磨牙鄰面早期非洞齲損，滲

透樹脂能夠滲入、甚至完全滲入到齲損內(nèi)，無創(chuàng)、有效地終止病變的進(jìn)展，尤其對(duì)乳牙較淺的早期齲，滲透樹脂的治療效果更佳。但是，在臨床上要嚴(yán)格把握適應(yīng)證，應(yīng)用于光滑面和鄰面的早期非洞齲損。注意使用橡皮障，防止鹽酸凝膠損傷牙周組織，并定期隨訪，觀察療效。

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（本文編輯 杜冰）