陳愛東 朱正日 陳東麟

半枝蓮多糖對小鼠胃癌模型中P21和VEGF表達(dá)的影響

陳愛東 朱正日 陳東麟

目的研究半枝蓮多糖對小鼠胃癌模型中P21和VEGF表達(dá)的影響，從而分析該藥物的臨床應(yīng)用價值。方法采用人胃癌細(xì)胞裸鼠種植瘤模型，通過藥物半枝蓮多糖對胃癌小鼠體內(nèi)腫瘤細(xì)胞生長的影響，ELISA法檢測對胃癌小鼠模型外周血血清中P21和VEGF含量的影響。結(jié)果半枝蓮多糖各劑量組均對胃癌細(xì)胞生長有抑制作用，能夠提高胃癌小鼠外周血血清中P21及減少VEGF的含量，此現(xiàn)象以中劑量為佳。結(jié)論半枝蓮多糖在小鼠體內(nèi)具有抑制胃癌小鼠模型癌細(xì)胞增殖和擴(kuò)散的作用。

半枝蓮多糖；P21；VEGF；胃癌

胃癌[1]是當(dāng)今臨床醫(yī)學(xué)上最常見的惡性腫瘤之一，有資料報道，我國胃癌發(fā)病率特別高，居世界首列，但是由于發(fā)病案例均為人類，不能將新研發(fā)的藥物進(jìn)行臨床實(shí)驗(yàn)，而導(dǎo)致該疾病很難進(jìn)行攻克。另外，現(xiàn)臨床使用的藥物均為西藥，其副作用之大，在殺死癌細(xì)胞同時也導(dǎo)致正常機(jī)體受損，因此，開發(fā)出無毒無副作用的中藥是抗癌新藥研發(fā)的關(guān)鍵。

半枝蓮（Scutellaria barbata D.Don）為唇形科黃芩屬植物，別名并頭草、狹葉韓信草等。其主要功能為清熱解毒，利尿消腫，止血化瘀等[2]。半枝蓮多糖是從該植物中提取的主要成分。有臨床資料報道，該糖類物質(zhì)有抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的效果，在大腸癌、宮頸癌、肺癌等均有文獻(xiàn)報道，但對胃癌的影響報道相對較少，其主要作用機(jī)制為通過該微生態(tài)調(diào)節(jié)劑，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，使機(jī)體免疫系統(tǒng)活躍，釋放體液因子進(jìn)行殺傷癌細(xì)胞，從而增強(qiáng)機(jī)體自身的抗癌能力[3]，因此，其副作用較少，是當(dāng)今醫(yī)藥開發(fā)的首選藥物。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥品和試劑半枝蓮多糖（SPS）（牡丹江醫(yī)學(xué)院制備）；肝素鈉（靈泰藥業(yè)提高）；黃芪多糖；P21和VEGF測試劑盒（哈爾濱海霞試劑公司）。

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物去胸腺小鼠，體重（20±2.0）g，雄性，人胃癌細(xì)胞SGC7901癌細(xì)胞株。

1.1.2 儀器電子天平（上?？萍及l(fā)展公司）；電熱恒溫水浴鍋（四川泰陽儀器公司）；微量移液器（成都儀器廠）；TD5M-WS型臺式低速離心機(jī)（北京宏遠(yuǎn)醫(yī)療器械公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法隨機(jī)選取40只小鼠，將其分為5組，每組8只，按照造模方法進(jìn)行建立人胃癌細(xì)胞SGC7901裸鼠種植瘤模型。對5組小鼠進(jìn)行灌胃給藥，半枝蓮多糖高（100mg/kg）、中（50mg/kg）、低（25mg/kg）劑量組，陽性組給黃芪多糖100mg/kg，模型對照組給相同體積的生理鹽水，連續(xù)給藥15d。最后一日，將小鼠處死，眼球取血，檢測血清中P21和VEGF含量，同時，進(jìn)行解剖小鼠觀察瘤組織標(biāo)本。

1.3 測定方法半枝蓮多糖對小鼠外周血血清P21和VEGF的測定（ELISA法）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析用SPSS 18.0軟件處理，各組數(shù)據(jù)由樣本比較采用方差比較。

2 結(jié)果

半枝蓮多糖對胃癌小鼠外周血清中P21和VEGF含量的影響，見表1。

表1 半枝蓮多糖對胃癌小鼠外周血清中P21和VEGF含量的影響

3 討論

目前建立惡性腫瘤的動物模型，常用的方法為移植腫瘤的模型。其特點(diǎn)是動物瘤性質(zhì)較為穩(wěn)定，均一性好，人為控制容易，腫瘤發(fā)病率較高而且時間差異性較小，另外容易人為施加干擾因素。

本實(shí)驗(yàn)中，選用胃癌可移植性腫瘤細(xì)胞株，復(fù)制小鼠胃癌模型十分成功；并且人為的進(jìn)行給藥干預(yù)，觀察不同藥物劑量的半枝蓮多糖對小鼠機(jī)體某些因子的影響。P21協(xié)調(diào)細(xì)胞周期中G1的檢查站[4]，由于DNA損傷后不經(jīng)過修復(fù)則無法通過，減少了受損DNA的復(fù)制和積累，從而發(fā)揮抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的作用，實(shí)驗(yàn)中其含量有不同程度的提高。VEGF為血管內(nèi)皮生長因子，在腫瘤細(xì)胞的增殖、分化、轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散中起到很重要的作用，幾乎在所有癌癥患者體內(nèi)均發(fā)現(xiàn)其含量有升高態(tài)勢，但是在本實(shí)驗(yàn)中給藥組均有下調(diào)現(xiàn)象。表現(xiàn)最為明顯者為中劑量組，對于該藥物的詳細(xì)作用機(jī)制需進(jìn)一步研究、探討。

[1] Kostadima L, Pentheroudakis Q, Pavlidis N. Themissingkissoflife：transeri Ptionalaetivityofthemetastasissu PPressorgene KISS 1inearlybreasteaneer[J]. AniieaneerRes, 2007, 27(4)：2499-2504

[2] 蔡震峰,任鳳蓮,申定珠.中草藥半枝蓮的研究進(jìn)展[J].廣州化學(xué),2006,31(4)：55.

[3] 陸平成,許益民.半枝蓮多糖對細(xì)胞免疫的調(diào)節(jié)作用[J].南京中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,1989,2：32-33.

[4] Sheikh MS, Chen YQ, Smith ML, et al. Role of p21 WAF1/ CIP1 in cell death and DNA repair as studied using a tetracyclin inducible system in p53-deficient cells[J]. Oncogene, 1997,14(5)：1875-1882.

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1673-5846(2013)06-0296-02

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