秦迎春秦衛(wèi)紅

（1 湖南省張家界市食品藥品檢驗(yàn)所，湖南 張家界 427000；2 湖南省張家界市人民醫(yī)院藥劑科，湖南 張家界 427000）

GC法測定利魯唑的含量

秦迎春1秦衛(wèi)紅2

（1 湖南省張家界市食品藥品檢驗(yàn)所，湖南 張家界 427000；2 湖南省張家界市人民醫(yī)院藥劑科，湖南 張家界 427000）

目的 采用氣相色譜法（GC）測量利魯唑原料中含有利魯唑的比例，為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法 本文使用了氣相色譜法中的內(nèi)標(biāo)法，用來測量利魯唑中的含量。其中色譜柱采用了DB-1彈性的毛細(xì)管柱，檢測器使用了FID；而汽化室的溫度保持在260℃，檢測器的溫度保持在260℃；柱溫保持在230℃，載氣使用高純氮?dú)饬魉倏刂圃?.0mL/min，尾吹控制在30mL/min，分流比為1/5，采用咖啡因子作為內(nèi)標(biāo)物。結(jié)果 利魯唑的含量在1.5～19.5μg/mL呈現(xiàn)了較好的線性關(guān)系（r=0.9998），平均的回收率達(dá)到了100.1%，其中的RSD達(dá)到了0.36%。結(jié)論 采用GC法對利魯唑的含量進(jìn)行測定，不但方便簡便、準(zhǔn)確、快速以及可靠，而且最終測出結(jié)果比較準(zhǔn)確，能夠有效測定利魯唑含量。

含量；利魯唑；GC法測定

利魯唑（Riluzole，RLZ）是用來治療ALS（肌萎縮側(cè)索硬化癥）新藥，也是目前被認(rèn)準(zhǔn)治療ALS唯一藥物。從文獻(xiàn)中可知，目前使用高效液相的色譜法測定該藥物含量[1,2]。但是從使用效果來看還存在許多需要改進(jìn)之處，因此本文結(jié)合相關(guān)資料后，采用GC法測定出利魯唑的含量，通過實(shí)驗(yàn)體現(xiàn)出這種方法的優(yōu)勢和可行性。

1 儀器與試藥

日本島津的GC-2014氣相色譜儀。利魯唑?qū)φ掌罚ㄗ灾频?，高效液相的色譜法測定含量≥99.9%）；咖啡因（中國藥品生物制品檢定所，純度：90%）；利魯唑原料（魯南貝體制藥有限公司生產(chǎn)，批號：080502）；無水乙醇等各種試劑，這些試劑都屬于分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 方法

2.1.1 色譜條件

本文采用了DB-1的彈性石英毛細(xì)管柱（30cm×0.53 mm，1.5μm）；將汽化室的溫度控制在260℃；柱溫控制在230℃；載氣使用高純氮?dú)饬魉倏刂圃?.0mL/min，尾吹控制在30 mL/min，分流比為1/5，采用咖啡因子作為內(nèi)標(biāo)物。

2.1.2 樣品溶液的制備

精密稱取利魯唑原料50.10mg，置100mL容器中，加無水乙醇進(jìn)行溶解，最終配制出濃度是0.501mg/mL溶液。

2.1.3 對照品溶液的制備

精密稱取干燥利魯唑?qū)φ掌?0.00mg放置到100mL的量瓶中，加無水乙醇稀釋到刻度，搖勻，得到濃度0.50mg/mL的儲備溶液。

2.1.4 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

精密稱取咖啡因約100mg，放置到100mL的量瓶中并加入無水乙醇稀釋到刻度上，搖勻即得。

2.1.5 考察線性關(guān)系

從配制好的對照溶液（濃度:0.5mg/ml）中精密吸取1.0、3.0、5.0、7.0、9.0、11.0、13 mL，分別置于100mL容量瓶中，加入無水乙醇稀釋刻度，搖勻。精確吸取3μL，按“2.1項(xiàng)下”色譜條件進(jìn)行測定，記錄色譜圖。根據(jù)色譜圖利魯唑和內(nèi)標(biāo)峰面積之比，橫坐標(biāo)X是對照品濃度（μg/mL），縱坐標(biāo)Y表示吸光度，以內(nèi)標(biāo)峰面積與利魯唑峰面積之比對利魯唑濃度回歸，得回歸方程：y＝3.4570x-0.2700，r＝0.9998，結(jié)果表明利魯唑在1.5～19.5μg/mL線性關(guān)系良好。GC色譜圖如圖1，其分離度符合規(guī)定。

2.1.6 空白試驗(yàn)考察線性

吸取無水乙醇3.0 μL按“2.1” 項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定，其空白圖譜如圖2所示，結(jié)果顯示無水乙醇沒有干擾到利魯唑的含量。

2.1.7 測定校正因子

圖1 GC色譜圖

精密吸取對照品儲備液3.0、5.0、7.0mL，分別放置到50mL的量瓶中，每個(gè)瓶中再加入內(nèi)標(biāo)溶液5 mL，用無水乙醇稀釋到刻度。每一個(gè)濃度重復(fù)測定3次，得出其平均校正因子為1.06，RSD=0.32%。

2.1.8 精密度試驗(yàn)

精密吸取對照品的儲備溶液中5mL，放置到50mL的量瓶中，并加入內(nèi)標(biāo)溶液5mL，用無水乙醇稀釋到刻度并搖勻。吸取樣品3μL，“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定，重復(fù)6次，結(jié)果RSD為0.27%。

2.1.9 重復(fù)性試驗(yàn)

從利魯唑的原料中稱取5份樣品，按“2.2”項(xiàng)下方法制備，“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定，結(jié)果顯示利魯唑含量為RSD為1.3%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.1.10 加樣回收率試驗(yàn)

從已知含量為99.86%利魯唑的原料吸取出9份樣品，分別放置到50mL的量瓶之中，并且分別加入“2.3”項(xiàng)下儲備溶液分別是3.0、4.0、5.0mL的溶液，再加入內(nèi)標(biāo)溶液5mL，使用無水乙醇進(jìn)行稀釋到量瓶的刻度上，均勻，過濾，吸取3.0μL，按“2.1”項(xiàng)下條件測定。

2.2 結(jié)果

對加樣回收率采用了GC法進(jìn)行試驗(yàn)之后，得出了計(jì)算回收率的結(jié)果，見表1。

表1 所測定的回收率結(jié)果統(tǒng)計(jì)（n=3）

從上面2.2中配制的樣品溶液中精密取出5mL，精密稱取5mL內(nèi)標(biāo)溶液加入進(jìn)去，均勻混合，并取出3μL注入到氣相色譜儀中，按照上述測定色譜條件，采用內(nèi)標(biāo)法測量利魯唑中的含量，對這3批樣品進(jìn)行測量之后結(jié)果如下，見表2。

3 討 論

3.1 選擇色譜柱

表2 測定樣品結(jié)果

從各種文獻(xiàn)結(jié)果可知，如果采用DB-624或HP-5毛細(xì)管柱測定，根本就不能夠有效分離咖啡因與利魯唑，但是使用了DB-1的毛細(xì)管柱最終結(jié)果完全不一樣，有效且完全分離出了咖啡因和利魯唑，并且基線比較穩(wěn)定，柱效較好。

3.2 選擇內(nèi)標(biāo)

通過對乙酰氨基酚、非娜西丁以及咖啡因進(jìn)行試驗(yàn)，利魯唑是不能夠和非娜西丁分離，乙酰氨基酚能夠和利魯唑進(jìn)行分離，但是穩(wěn)定性比較差，但是咖啡因與利魯唑之間進(jìn)行分離效果比較明顯，并且整個(gè)過程都具備較好穩(wěn)定性。

3.3 該方法的優(yōu)勢

采用GC法測定利魯唑含量，有效的避免了使用二類有毒溶劑的甲醇，而且整個(gè)測定過程分析都比較簡單，柱效比較高，采用GC法測定平均回收率高達(dá)100.1%，RSD僅僅為0.36%，但是從文獻(xiàn)張維斌2006年發(fā)表《反相高效液相色譜法測定利魯唑片含量》可知，采用反相高效液相色譜法，平均回收率高達(dá)99.5%，RSD為0.71%。相比而言GC法最終所測定結(jié)果具備可靠的準(zhǔn)確度，同時(shí)還能夠有效控制柱本品質(zhì)量。同時(shí)這種方法消耗樣品量比較少。而且通過本研究發(fā)現(xiàn)應(yīng)用GC法測定，柱效較高，并且分析簡便、快速且結(jié)果準(zhǔn)確可靠，能夠有效控制本品的質(zhì)量。從本試驗(yàn)中可以發(fā)現(xiàn)采用無水乙醇作為提取劑效果比較明顯，之后再采用甲醇定容做紫外色譜分析。提取極少的原料就能夠達(dá)到試驗(yàn)提取要求，這種提取方式不但靈敏度高而且降低了樣品的雜質(zhì)含量，確保了色譜柱能夠連續(xù)分析大量的樣品。本文構(gòu)建出了利魯唑樣品的預(yù)處理方法與色譜條件操作，其屬性比較強(qiáng)，準(zhǔn)確度也比較高，已經(jīng)被利魯唑的代動力學(xué)以及生物等各種有效性研究廣泛使用。

[1] 鄭靜,陳德俊.高效液相色譜法測定布洛芬片中布洛芬含量[J].中國藥業(yè),2007,16(23):34-36.

[2] 李鳳蘭,胡新海.HPLC法測定布洛芬片的含量[J].中外健康文摘,2010,7(4):92-94.

[3] 郭琦,傅強(qiáng),潘永西,等.毛細(xì)管氣相色譜法測定布洛芬膠囊的含量[J].中國藥師,2009,12(7):56-59.

[4] 米振清,范劍.用HPLC法測定布洛芬片的含量[J].藥學(xué)服務(wù)與研究,2009,9(2):119-122.

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1671-8194（2013）21-0105-02