付天靈楊炳烈
(1 內(nèi)蒙古赤峰紅山中醫(yī)院,內(nèi)蒙古 赤峰 024000;2 內(nèi)蒙古赤峰65655部隊(duì)醫(yī)院,內(nèi)蒙古 赤峰 024000)
青天葵提取液脫色工藝的研究
付天靈1楊炳烈2
(1 內(nèi)蒙古赤峰紅山中醫(yī)院,內(nèi)蒙古 赤峰 024000;2 內(nèi)蒙古赤峰65655部隊(duì)醫(yī)院,內(nèi)蒙古 赤峰 024000)
青天葵提取液中通常含有較多有色物質(zhì),使得溶液顏色較深,為后續(xù)純化操作帶來不便。因此有必要對(duì)青天葵提取液進(jìn)行脫色。通常用于中藥提取液脫色的是粉末狀活性炭,可以將溶液中的有色物質(zhì)吸附在其表面,從而達(dá)到脫色的目的。本文采用活性炭對(duì)青天葵提取液進(jìn)行了脫色研究,考察了活性炭用量、pH值、脫色溫度、脫色時(shí)間等工藝條件對(duì)脫色效果的影響,并用正交實(shí)驗(yàn)考察其最佳脫色條件。確立了最佳的工藝條件為活性炭加入量1.0g/100mL,脫色溫度40℃,提取液pH值為3.0,脫色時(shí)間為30min。
青天葵;脫色;活性炭
青天葵為蘭科植物毛唇芋蘭Nervilia fordii(Hance)Schhr,的干燥全草或塊莖[1]。性平,味苦、甘,歸心、肺、肝經(jīng)。能潤肺止咳,清熱解毒,散瘀止痛。主治肺癆咯血,肺熱咳嗽,口腔炎,咽喉腫痛,瘰疬,瘡瘍腫毒,跌打損傷。分布于廣東、廣西、四川、云南等地,在廣東、廣西、港澳及東南亞地區(qū)應(yīng)用較多,也是我國出口創(chuàng)匯的主要藥材[2-4]。
青天葵中總氨基酸成分為青天葵解熱、抗炎、鎮(zhèn)痛、止咳平喘和提高免疫力等作用的有效成分[5-6]。因此,對(duì)青天葵的氨基酸類成分進(jìn)行研究,對(duì)進(jìn)一步研究其藥理藥效具有重要的意義。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),用水提取青天葵所含的氨基酸時(shí),常伴隨有大量色素物質(zhì),這些色素的存在,影響氨基酸的進(jìn)一步純化,使其在工業(yè)中的應(yīng)用受到了限制。因此,在提取過程中須將色素除去?;钚蕴渴鞘称饭I(yè)中廣泛使用的吸附劑。本實(shí)驗(yàn)研究了活性炭對(duì)青天葵提取液脫色效果的影響,并找到了較為理想的工藝參數(shù)。這一研究結(jié)果無論對(duì)提高青天葵氨基酸的品質(zhì),還是為其提取液脫色的大規(guī)模應(yīng)用都有一定的意義。
青天葵藥材為蘭科植物毛唇芋蘭青天葵Nervilia fordii(Hance)Schltr.的全草,干燥、粉碎,過二號(hào)篩;亮氨酸對(duì)照品;茚三酮(分析純);Sartorius BP110S 電子天平(德國);SartoriusCP225D 電子天平(德國);Thermo electron corporation紫外分光光度計(jì)(英國);高速中藥粉碎機(jī);乙醇(分析純);活性炭(分析純)
2.1 脫色原理
通常用于中藥提取液脫色的是粉末狀活性炭,具有很強(qiáng)的吸附能力,可以將溶液中的有色物質(zhì)吸附在表面,從而達(dá)到脫色的目的。
2.2 分析方法
①色素含量的測定及色素除去率的計(jì)算:從脫色前液體和脫色后液體中各取1.00mL,定容至5.00mL,用紫外分光光度計(jì)在色素的最大光吸收處(波長268nm)測定其光吸收值。
色素除去率=(脫色前色素吸光度—脫色后色素吸光度)/脫色前色素吸光度(%)。②氨基酸含量的測定及氨基酸損失率的計(jì)算:從脫色前溶液和脫色后溶液中,分別取2.00mL溶液到25mL容量瓶,再加1.00mLpH 5.0醋酸鈉緩沖液、1.00mL蒸餾水和2.00mL2%茚三酮,100℃水浴加熱19min,用紫外分光光度計(jì)在氨基酸的最大光吸收處(波長568nm)測定其光吸收值。氨基酸損失率=(脫色前氨基酸含量—脫色后氨基酸含量)/脫色前氨基酸含量(%)。
3.1 正交試驗(yàn)
根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,選擇脫色pH、活性炭用量、脫色時(shí)間、脫色溫度4項(xiàng)為考察因素,各取3個(gè)水平,進(jìn)行正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)設(shè)定正交實(shí)驗(yàn)的水平和因素,其因素和水平見表1。其中:A為pH;B為活性炭加入量,g;C為脫色時(shí)間,min;D為脫色溫度,℃。其實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2,方差表見表3和4。
各因素的極差R值如表2所示,對(duì)于氨基酸損失率正交表,通過比較R值的大小可以得出影響氨基酸損失率的因素順序?yàn)椋簆H,活性炭用量,脫色溫度,脫色時(shí)間。經(jīng)方差分析得,因素A和B具有顯著性差異,表明pH和活性炭用量對(duì)青天葵中氨基酸損失率有顯著影響;對(duì)于脫色率正交表,影響色素除去率的因素的順序?yàn)椋簆H,脫色時(shí)間,活性炭用量,脫色溫度。經(jīng)方差分析得,因素A、B和C具有顯著性差異,表明pH、活性炭用量和脫色時(shí)間對(duì)青天葵中氨基酸的提取液的脫色溫度有顯著性影響。
3.2 印證試驗(yàn)
上述各因素水平對(duì)脫色率和氨基酸損失率的影響趨勢,從直觀分析我們確定脫色最佳工藝條件為A2B2C2D1,即在pH 3.0的條件下,活性炭用量為1.0g/100mL,在40℃脫色30min。按照此實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行脫色實(shí)驗(yàn),考察脫色條件?;钚蕴棵撋∽C實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表5所示。
3.3 討論與小結(jié)
實(shí)驗(yàn)分析了脫色溶液pH、活性炭用量、脫色時(shí)間、脫色溫度對(duì)青天葵提取液脫色效果的影響,并通過正交試驗(yàn)分析得出影響氨基酸損失率的因素順序?yàn)椋簆H,活性炭用量,脫色溫度,脫色時(shí)間;色素除去率的因素的順序?yàn)椋簆H,脫色時(shí)間,活性炭用量,脫色溫度;綜合考慮二因素,最佳的脫色工藝為:脫色pH3.0,活性炭用量1.0g/100mL,脫色溫度40℃,脫色時(shí)間30min。
[1] 國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草,第8冊(cè)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1999:740.
表1 正交試驗(yàn)因素水平表
表2 正交試驗(yàn)結(jié)果
表3 氨基酸損失率方差表
表4 脫色率方差分析
表5 活性炭脫色印證試驗(yàn)
[2] 陳蔚文,徐鴻華.嶺南道地藥材研究[M].廣州:廣東科技出版社, 2007:326-351.
[3] 畢殿洲.藥劑學(xué)[M].4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1999.
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R282.710.3
B
1671-8194(2013)27-0054-02