高春冬

【摘 要】HPLC在我國(guó)食品分析領(lǐng)域的應(yīng)用始于20世紀(jì)70年代末，90年代后期國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中開始將HPLC法列為檢測(cè)食品中的污染物、營(yíng)養(yǎng)成分、添加劑、毒素和無(wú)機(jī)成分等的國(guó)標(biāo)方法。

【關(guān)鍵詞】HPLC；高效液相色譜分析；食品檢測(cè)

1.HPLC在食品添加劑領(lǐng)域的應(yīng)用

1.1食品甜味劑的檢測(cè)

采用液相色譜—?dú)庀嗌V聯(lián)用技術(shù)， SpherigelC18色譜柱，電噴霧負(fù)離子采集模式，甲醇-甲酸-三乙胺緩沖鹽梯度洗脫，定量測(cè)定果凍等食品中安賽蜜、糖精鈉和甜蜜素含量，結(jié)果加樣回收率為93.19%～100.90%，相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.05%～2.04%。該方法選擇性好，定性定量準(zhǔn)確，分析時(shí)間短，同時(shí)也適用于飲料等其他食品的定性定量檢測(cè)。

用高效液相色譜—熒光法（HPLC-FLD）測(cè)定食品中的糖精鈉，最低檢出限在0.005～0.200mg/ml，與高效液相色譜—紫外檢測(cè)法（HPLC-UV）相比較，HPLC-FLD法重現(xiàn)性好，準(zhǔn)確度更高，由于FLD的選擇性響應(yīng)，降低了對(duì)色譜柱的性能要求，更適合復(fù)雜樣品的快速分析，使其具有比UV法更高的可靠性，是一種較為理想的糖精鈉檢測(cè)方法。

1.2食品防腐劑的檢測(cè)

利用HPLC測(cè)定含乳飲料中苯甲酸的含量。用Zn（Ac）2和KFe（CN）3溶液作為沉淀劑進(jìn)行樣品的預(yù)處理，磷酸鹽緩沖液和甲醇混合溶液為流動(dòng)相，C18色譜柱，于波長(zhǎng)225nm處紫外檢測(cè)，方法簡(jiǎn)單快速、靈敏度高，既適用于大部分含乳飲料，也適用于純牛奶的測(cè)定。蘇愛(ài)梅采用加沉淀劑沉淀法對(duì)火腿腸樣品進(jìn)行預(yù)處理，過(guò)濾后用RP-HPLC法測(cè)定火腿腸中防腐劑苯甲酸和山梨酸的含量。色譜柱為Symetry-C18，以0.02mol/L乙酸銨-甲醇（97∶3）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm。苯甲酸和山梨酸濃度在0～0.05g/L范圍內(nèi)線性很好（r=0.9996）；山梨酸最低檢出限為0.024g/L，平均回收率為100.4%，RSD為0.68%。

1.3食品色素的檢測(cè)

采用HPLC法測(cè)定保健食品黃金搭檔包衣片中食用合成色素，樣品前處理用粉碎提取法和漂洗法，聚酰胺吸附純化LichrospherC18柱，甲醇-乙酸銨流動(dòng)相梯度洗脫，單波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)測(cè)定檸檬黃、靛藍(lán)和誘惑紅3種色素。其線性范圍寬（0～100g/ml），回收率高（91.3%～103.1%），重現(xiàn)性好（RSD=2.11%～5.63%），最低檢出限為2～11ng。其中，尤以粉碎提取法，梯度洗脫，多波長(zhǎng)檢測(cè)效果更佳。

1.4食品抗氧化劑的檢測(cè)

采用RP-HPLC法測(cè)定油炸薯?xiàng)l沒(méi)食子酸內(nèi)酯（PG）、叔丁基對(duì)苯二酚（TBHQ）、羥基茴香醚（BHA）、4-已基間苯二酚（4HR）、二丁基羥基甲苯和2246含量。其中，PG、TBHQ用50%甲醇（RP-HPLC體積分?jǐn)?shù)1%的冰醋酸）作流動(dòng)相，BHA、4HR、BHT和2246用80%甲醇作流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm，相關(guān)系數(shù)在0.9983～0.9996，最低檢出限為1.0～2.0μg/g，平均回收率均在85%以上。

采用基質(zhì)固相分散萃取植物油中抗氧化劑BHA、BHT、TBHQ和PG，經(jīng)HPLC法進(jìn)行分離。結(jié)果通過(guò)基質(zhì)固相分散技術(shù)，可減少有機(jī)溶劑的用量，縮短分析時(shí)間，提高分析效率，回收率為85.8%～94.3%，最低檢出限為2ng。

2.HPLC在食品營(yíng)養(yǎng)成分領(lǐng)域的應(yīng)用

2.1碳水化合物的檢測(cè)

對(duì)于碳水化合物的測(cè)定，HPLC法操作簡(jiǎn)便，靈敏度高，可同時(shí)測(cè)定各種糖，國(guó)際上已將HPLC法作為酒類糖分含量測(cè)定的仲裁法。

2.2氨基酸的檢測(cè)

氨基酸是生物體中重要的生命物質(zhì)，是組成酶和蛋白質(zhì)的基本單元，準(zhǔn)確靈敏地測(cè)定食物中氨基酸的含量具有十分重要的意義。目前，柱前衍生化高效液相色譜法以其靈活和易于推廣的特點(diǎn)。

采用鄰苯二甲醛（OPA）-9-芴甲基氯甲酸酯（FMOC）進(jìn)行氨基酸柱前衍生，RP-HPLC法測(cè)定氨基酸含量。3個(gè)不同濃度梯度的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液線性關(guān)系良好，樣品保留時(shí)間絕對(duì)誤差小于0.1min，重現(xiàn)性RSD值低于4%，加標(biāo)回收率均在90%～110%。

2.3脂肪酸的檢測(cè)

脂肪酸是指一端含有一個(gè)羧基的長(zhǎng)的脂肪族碳?xì)滏?，是有機(jī)物。飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸和三脂酰苷油磷脂卵磷脂等，對(duì)人體的健康起到了重要的作用。用HPLC法與基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間技術(shù)聯(lián)用，分析蛋黃中磷脂粗提物。將從蛋黃中提取的多種磷脂通過(guò)HPLC預(yù)先分離，收集各組分后分別進(jìn)行MALDI-TOF-MS分析得到比較清晰的質(zhì)譜圖。選用RP-HPLC與電容耦合非接觸電導(dǎo)檢測(cè)（C4D）結(jié)合的方法分離測(cè)定肉蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、油酸與亞油酸5種未衍生化長(zhǎng)鏈脂肪酸，采用HypersilODSC18色譜柱，以甲醇-1mmol/L醋酸鈉（78∶22，V/V）為流動(dòng)相，結(jié)果表明，硬脂酸在5～200μg/ml范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，其他4種酸線性范圍為2～200μg/ml。將此種方法用于檢測(cè)南瓜、大豆、米糠及棕櫚油中脂肪酸，與標(biāo)準(zhǔn)氣相色譜檢測(cè)方法相比，簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高。

3.HPLC在食品污染物領(lǐng)域的應(yīng)用

3.1食品農(nóng)藥、獸藥殘留的檢測(cè)

農(nóng)藥殘留是由于使用農(nóng)藥而導(dǎo)致的在食品、農(nóng)產(chǎn)品或動(dòng)物飼料中殘留的一定物質(zhì)，國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)都有明確的藥物最大殘留量，超過(guò)其值有可能對(duì)人體造成危害。運(yùn)用HPLC柱后衍生熒光檢測(cè)法，測(cè)定蘋果、梨、桃、葡萄、香蕉和芒果等水果樣品中涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威、三羥基克百威、涕滅威、克百威和甲萘威7種氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留量，結(jié)果7種農(nóng)藥3種不同濃度平均添加回收率在72.5%～116.2%，最低檢出限為0.0037～0.0074mg/kg。

3.2食品中其他來(lái)源化學(xué)污染物的檢測(cè)

環(huán)境污染物以及在工業(yè)生產(chǎn)中所產(chǎn)生的有毒有害化學(xué)物，如包裝材料等均可通過(guò)植物或動(dòng)物進(jìn)入食物鏈，并引起人類的疾病或健康問(wèn)題。

3.3食品中霉菌毒素的檢測(cè)

食品中存在多種霉菌毒素，主要的霉菌毒素有黃曲霉毒素、鐮刀菌毒素和玉米赤霉烯酮等。糧食及食品由于霉變不僅會(huì)造成經(jīng)濟(jì)損失，有些還會(huì)造成誤食人畜急性或慢性中毒，甚至導(dǎo)致癌癥。

4.小結(jié)

目前在食品安全檢測(cè)高標(biāo)準(zhǔn)的情況下，HPLC分析技術(shù)以其分辨率、靈敏度及定量精度高等特點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于食品檢測(cè)領(lǐng)域。現(xiàn)今科學(xué)技術(shù)日益更新，高效液相色譜儀器也在不斷地更新發(fā)展，并且與各種檢測(cè)技術(shù)的聯(lián)用越來(lái)越普遍，包括液相色譜（LC）和質(zhì)譜儀（MS）及核磁共振譜儀的集成（LC-MS-NMR）、氣相色譜-液相色譜聯(lián)用（GC-HPLC）、固相微萃取-液相色譜聯(lián)用（SPME-HPLC）、聚焦微波輔助萃取-液相色譜聯(lián)用（FAME-HPLC），大大拓寬了HPLC的應(yīng)用范圍，提高了檢測(cè)水平，在今后HPLC也會(huì)有更廣闊的發(fā)展空間。

【參考文獻(xiàn)】

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