楊亞麗 樊寶娟 吳 芳 楊瑞瑞 陜西省食品藥品檢驗(yàn)所（西安710065）

膚疾洗劑原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)于1998年收入《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑》第十五冊(cè)，標(biāo)準(zhǔn)號(hào)WS3－B－2918－98，之后有其他企業(yè)相繼提高此標(biāo)準(zhǔn)，其具有解毒殺蟲(chóng)，止癢收斂，活血祛瘀的功效。用于疥瘡、濕疹、脂溢性皮炎、瘙癢性皮膚病、花斑癬。處方由苦參、百部、花椒、白鮮皮、硼砂、雄黃六中藥材組成，本文收集了十三批膚疾洗劑樣品，結(jié)合其方解及現(xiàn)行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，建立了其中五味藥材的鑒別或含量測(cè)定方法，方法驗(yàn)證證明此標(biāo)準(zhǔn)專屬性好，重復(fù)性、準(zhǔn)確性符合要求，耐用性好，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程可操作性強(qiáng)，可以作為控制本品內(nèi)在質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)。

1 儀器與試藥

1.1 儀 器 Waters 2487－2695型高效液相色譜儀（美國(guó)沃特世公司），BS224S型電子分析天平（賽多利斯公司），KQ500－DE 型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。

1.2 試 藥 對(duì)照品及對(duì)照藥材均由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供：苦參堿（批號(hào)：110805－200508含量測(cè)定用）；苦參對(duì)照藥材（批號(hào)121019－200705）；花椒對(duì)照藥材（批號(hào)121106－200402）；白鮮皮對(duì)照藥材（批號(hào)978－9301）；膚疾洗劑樣品分別由清華德人西安幸福制藥有限公司、陜西關(guān)愛(ài)制藥有限公司、陜西康惠制藥股份有限公司、陜西摩美得制藥有限公司、江西杏林白馬藥業(yè)有限公司提供；膚疾洗劑陰性對(duì)照樣品及苦參藥材由清華德人西安幸福制藥有限公司提供。乙腈、甲醇為色譜純，水為超純水，其余試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 制劑中苦參的鑒別［1］為原標(biāo)準(zhǔn)收載方法，此次提高中，對(duì)原方法進(jìn)行了優(yōu)化：①刪除了無(wú)水硫酸鈉脫水過(guò)程。②將原標(biāo)準(zhǔn)中2%氫氧化鈉薄層板改為普通硅膠G 薄層板用濃氨試液飽和。③將原展開(kāi)劑中苯用相對(duì)毒性較小的甲苯代替。④為提高專屬性，以苦參對(duì)照藥材作為對(duì)照進(jìn)行控制。結(jié)果表明優(yōu)化后不影響苦參的鑒別結(jié)果，故將原標(biāo)準(zhǔn)優(yōu)化為：取本品10mL，置分液漏斗中，用4%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH 值至10，加三氯甲烷振搖提取2次，每次10mL，合并三氯甲烷提取液，置水浴上蒸干，殘?jiān)尤燃淄?.5mL使溶解，作為供試品溶液。另取苦參對(duì)照藥材2g，加水30mL，加熱回流2h，濾過(guò)，濾液同法制成對(duì)照藥材溶液。另取不含苦參的陰性樣品10mL，同法制成陰性樣品溶液。照薄層色譜法（中國(guó)藥典2010年版一部附錄VIB）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以甲苯－丙酮－甲醇（8∶3∶0.5）為展開(kāi)劑，以氨蒸氣飽和，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，分別在與對(duì)照藥材色譜主斑點(diǎn)及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。陰性無(wú)干擾。

2.2 制劑中花椒的鑒別 取本品10mL，置分液漏斗中，加乙醚振搖提取2 次，每次10mL，合并乙醚液，揮至約1mL作為供試品溶液。另取花椒對(duì)照藥材2g，加水30mL，回流2h，濾過(guò)，濾液同法制成對(duì)照藥材溶液。另取不含花椒的陰性樣品10mL，同法制成陰性樣品溶液。照薄層色譜法（中國(guó)藥典2010年版一部附錄VIB）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以正己烷－乙酸乙酯（5∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，在紫外光燈（365nm）下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。陰性無(wú)干擾。

2.3 制劑中白鮮皮的鑒別 為新增標(biāo)準(zhǔn)：取本品10mL，置分液漏斗中，用三氯甲烷－氨水（10∶1）混合溶液提取2次，每次10mL，合并三氯甲烷層，水浴蒸干，殘?jiān)尤燃淄?mL 溶解，作為供試品溶液。另取白鮮皮對(duì)照藥材2g，加水30mL，回流2h，濾過(guò)，濾液同法制成對(duì)照藥材溶液。另取不含白鮮皮的陰性樣品10mL，同法制成陰性樣品溶液。照薄層色譜法（中國(guó)藥典2010年版一部附錄VIB）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，石油醚（30～60℃）－丙酮（3∶2）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，在紫外光燈（365nm）下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。陰性無(wú)干擾。

2.4 苦參堿的含量測(cè)定 2.4.1 色譜條件：Ultimate XB－NH2柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相［2］：乙腈－無(wú)水乙醇－3%磷酸溶液（81∶13∶6）；流速：1.0mL·min－1；檢測(cè)波長(zhǎng)220nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量10μL。在上述條件下，供試品中丹酚酸B色譜峰與其他雜質(zhì)峰基線分離。陰性無(wú)干擾。見(jiàn)圖1。

圖1 HPLC色譜圖（1.苦參堿）

2.4.2 精密稱取苦參堿對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1mL含0.05mg的溶液，即得。

2.4.3 供試品溶液的制備：取本品適量，搖勻，精密量取1mL，加水至25mL，加濃氨試液1mL 及三氯甲烷25mL 超聲處理（功率500W，頻率40kHz）30min，分取下層液，低溫蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇溶解，轉(zhuǎn)移至25mL 容量瓶中，用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.4.4 陰性對(duì)照溶液的制備：稱取不含苦參的陰性樣品，同法制成陰性對(duì)照溶液。

2.4.5 線性實(shí)驗(yàn)：精密吸取苦參堿對(duì)照品溶液（質(zhì)量濃度89.0μg·mL－1）1，2，5，10，15，25和50μL，在上述條件下測(cè)定峰面積，以峰面積（y，A）對(duì)對(duì)照品進(jìn)樣量（x，μg）作標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程為Y ＝61126 X－14588，r＝0.9999（n＝7），表明苦參堿對(duì)照品的進(jìn)樣量在0.089μg～4.45μg之間與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.4.6 精密度實(shí)驗(yàn)：精密吸取對(duì)照品溶液10μL，重復(fù)進(jìn)樣6次，其峰面積RSD為0.79%。

2.4.7 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)：取同一批號(hào)供試品（批號(hào)），精密量取6份，分別按供試品溶液同法制備，測(cè)定，平均含量為34.8μg·mL－1，RSD 為0.92%。

2.4.8 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：取同一供試品溶液（批號(hào)111009）分別在0，3，6，9，12 和18h 測(cè)定，其RSD 為1.79%。

2.4.9 加樣回收率實(shí)驗(yàn)：精密量取已知含量的樣品（批號(hào)111009苦參堿含量為34.8μg·mL－1）6份各0.5mL，分別精密加入對(duì)照品溶液（0.87mg·mL－1）1mL，按供試品溶液同法制備，測(cè)定含量，平均回收率為101.8%，RSD 為0.76%。

2.4.10 樣品測(cè)定：按2.7.1色譜條件，精密吸取13批供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，結(jié)果13 批樣品含量分別為0.73，0.86，0.84，1.84，1.19，2.34，4.09，4.15，1.37，1.01，2.45，2.44 和2.48μg·mL－1。

3 討 論

3.1 鑒別部分 對(duì)原標(biāo)準(zhǔn)的方法進(jìn)行了優(yōu)化及提高：①將硼砂及雄黃的鑒別方法進(jìn)行了優(yōu)化［2］，②將苦參的鑒別采用專屬性更強(qiáng)的苦參對(duì)照藥材進(jìn)行對(duì)照，③優(yōu)化了花椒的鑒別方法［3，4］。依據(jù)方解新增了處方中白鮮皮的薄層鑒別方法［5，6］。通過(guò)重現(xiàn)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)原標(biāo)準(zhǔn)中百部的薄層鑒別方法不可行，建議刪除，其鑒別方法有待進(jìn)一步研究。

3.2 檢查部分 由于膚疾洗劑是由液體和雄黃粉末的固體組成，本文通過(guò)對(duì)13批樣品的測(cè)定及工藝增加了一下內(nèi)容：①確定了液體部分的pH 值及相對(duì)密度的范圍：其中pH 值范圍為6.3～8.0，相對(duì)密度的范圍為不得低于1.05，②增加了雄黃粉末中三氧化二砷的檢查［2］，增加了雄黃粉末的裝量檢查。

3.3 含量部分 ①參照《中國(guó)藥典》2010年版一部雄黃項(xiàng)對(duì)其含量進(jìn)行了測(cè)定［2］，結(jié)果含量范圍為：43.0～89.7%，表明部分企業(yè)使用雄黃質(zhì)量不好，建議將雄黃中二硫化二砷的含量測(cè)定列入標(biāo)準(zhǔn)。②依據(jù)原標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)文獻(xiàn)［7］建立了苦參堿的含量測(cè)定方法，并對(duì)方法進(jìn)行了耐用性實(shí)驗(yàn)（其中包括波長(zhǎng)、柱溫、色譜柱、提取方式、提取溶劑、提取時(shí)間、提取次數(shù)、流動(dòng)相組成比例、流動(dòng)相流速等因素的選擇），結(jié)果方法簡(jiǎn)便可行，重現(xiàn)性好，列入標(biāo)準(zhǔn)正文，通過(guò)對(duì)13批樣品含量測(cè)定，考慮到藥材來(lái)源以及制劑生產(chǎn)、貯藏、轉(zhuǎn)移率等因素，將苦參堿的含量限度修訂為本品每1mL 含苦參以苦參堿（C15H24N2O）計(jì)，不得少于0.80mg。

［1］ 王立軍，劉麗萍.黃柏止癢洗劑中黃柏、苦參的薄層色譜鑒別［J］.陜西中醫(yī)，2011，32（10）：1407－1408.

［2］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典2010年版［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：70－71.

［3］ 方明余.復(fù)方苦黃洗劑的薄層色譜鑒別［J］.河北中醫(yī)，2012，34（3）：433.

［4］ 楊 瑜，劉 萍，胡漢昆，等.白癜酊質(zhì)量控制［J］.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2008，28（24）：2132－2133.

［5］ 黃 慧，顧 衛(wèi)，黃麗雅，等.膚寧洗劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)［J］.中國(guó)藥師，2012，15（8）：1096－1098.

［6］ 張麗娟，賈 俊，王小煥，等.克銀丸質(zhì)量控制方法研究［J］.現(xiàn)代儀器，2012，18（2）：39－41.

［7］ 紀(jì) 佳.HPLC 同時(shí)測(cè)定苦參藥材中苦參堿和氧化苦參堿的含量測(cè)定方法［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2012，10（27）：86－87.